深圳地区婴幼儿诺如病毒感染的分子流行病学检测及分析

目的了解深圳地区婴幼儿属于人类杯状病毒(HuCV)的诺如病毒(NoV)的感染状况并对NoV阳性病毒株进行基因型分析。方法采集连续2个秋冬季腹泻流行期间在深圳市儿童医院就诊的临床检验已排除寄生虫、细菌性腹泻和轮状病毒检测结果为阴性的3岁以下腹泻患儿粪便标本226例,应用分型引物RT-PCR法进行检测NoVGⅠ和GⅡ群,扩增产物通过1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定;部分阳性标本测序,结合GenBank参考株相应核苷酸序列进行进化和型别流行特点分析。结果深圳地区婴幼儿NoV阳性率为10.62%(24/226),检测出NoV阳性株GⅡ/4群18株,GⅡ/3群5株;7至24月龄为NoV高发年龄段。结论NoV是深圳地区婴幼儿冬季腹泻的重要病原体之一,流行株为NoV-GⅡ/4。

深圳地区婴幼儿人类杯状病毒感染状况及基因型分析

目的了解深圳地区婴幼儿人类杯状病毒（HuCV）感染状况和对HuCV阳性病毒株进行基因型分析。方法采集连续二个秋冬季腹泻流行期间来深圳儿童医院就诊的临床检验已排除寄生虫、细菌性腹泻和轮状病毒检测结果为阴性的3岁以下腹泻患儿粪便标本226份，应用分型引物RT—PCR法检测HuCV的诺如病毒（norovirus，NoV）GⅠ和GⅡ群和扎如病毒（sappovirus，SaV），扩增产物通过1．5g／d1琼脂糖凝胶电泳鉴定。部分阳性标本测序，结合GenBank参考株相应核苷酸序列进行进化和型别流行特点分析。结果HuCV阳性率11．06％（25／226），其中NoV阳性率10．62％（24／226），saV阳性率0．44％（1／226），检测出NoV阳性株GⅡ／4群18株，GⅡ／3群5株，1株尚不能确定所属群（占4．17％，]／24）。1株Sav为SGⅡ／1群。7月～24月龄为NoV高发年龄段。结论HuCV是深圳地区婴幼儿冬季腹泻的重要病原体之一，流行株为NoV的GⅡ／4群，同时，还发现SaV的SGⅡ／1群存在。

喹那普利对单侧输尿管结扎大鼠肾纤维化拮抗作用的研究

目的研究喹那普利对梗阻性肾病肾间质纤维化的影响及其机制。方法30只SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=6)、单侧输尿管结扎(UUO)组(n=12)和喹那普利组(n=12)。喹那普利组在UUO术前1d予喹那普利10mg.kg-1.d-1灌胃,假手术组及UUO组予同等体积生理盐水灌胃。各组大鼠分别于术后14和28d取梗阻侧肾组织。采用Masson染色及免疫组化方法观测各组大鼠的肾间质容量、肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白水平的变化。以原位杂交法检测各组大鼠肾组织TGF-β1mRNA表达的变化。结果与假手术组比较,UUO组大鼠肾小管明显萎缩塌陷或极度扩张,伴肾间质增生,输尿管梗阻后4周时上述病理改变尤为明显,肾间质容量明显升高(P<0.001)。免疫组化染色检测结果显示,UUO组α-SMA及TGF-β1蛋白水平均明显高于假手术组,且随梗阻时间的延长呈进行性升高(P<0.001)。原位杂交结果表明,UUO组TGF-β1mRNA在肾小管间质中的表达显著高于假手术组(P<0.001)。喹那普利组肾间质容量、肾小管间质中TGF-β1mRNA表达、TGF-β1蛋白和α-SMA水平均显著低于UUO组(P<0.05或<0.01)。结论喹那普利可明显抑制肾组织分泌TGF-β1,可能的机制之一是减少其下游效应细胞-肌纤维母细胞的活化,从而减缓UUO大鼠肾纤维化进程。

川崎病冠状动脉内皮细胞损伤的定量蛋白组学研究与生物信息学分析

目的通过同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学技术鉴定川崎病(KD)冠状动脉内皮细胞损伤的蛋白标记物。方法采用KD患儿血清培育的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)作为KD组,健康儿童血清培育的HCAECs作为健康对照组。利用iTRAQ检测两组细胞蛋白质的表达情况;采用生物信息学手段分析蛋白质数据;使用Western blot法进行蛋白标记物的验证。结果本研究共鉴定出518个显著差异表达蛋白(差异倍数的绝对值>1.2且P<0.05)。GO分析显示差异蛋白明显富集的生物过程有细胞过程、代谢过程、生物调节等;细胞组分有细胞部分、细胞、细胞器等;分子功能有结合、催化活性、分子功能调节剂等。KEGG分析显示明显富集的信号通路是核糖体、PI3K-Akt信号通路、癌症中的转录失调等。根据PPI网络结果将关系密集程度排在前9的蛋白标记物PWP2、MCM4、MCM7、MCM5、MCM3、MCM2、SLD5、HDAC2、MCM6筛选出来作为KD冠状动脉内皮细胞损伤的蛋白标记物。Western blot法验证KD组蛋白标记物HDAC2、PWP2、MCM2表达水平低于健康对照组(P<0.05)。结论KD患儿血清显著改变了HCAECs的蛋白表达模式并影响与心血管系统相关的信号通路,为KD的病理机制和治疗靶标提供了新的依据。

不同无菌技术操作方法效果的比较研究

目的 探讨不同无菌技术操作方法的效果。方法①选择进行头皮静脉穿刺患儿61例,随机分为实验组33例用0.1％安多福消毒皮肤,对照组28例用75％酒精消毒皮肤,分别做局部皮肤细菌培养;②将配药瓶口分别用0.5％安多福与2％碘酒、75％酒精消毒,比较其效果;③比较无菌持物镊和无菌罐开启2、4、6、8h的细菌培养结果,并对监测结果进行统计学处理。结果①0.1％安多福与75％酒精消毒效果比较,P<0.05,差异有显著性;②0.5％安多福与2％碘酒、75％酒精消毒瓶口无论何种情况,P>0.05,差异无显著性;③无菌持物镊和无菌罐保存时间6h仍可无菌生长。结论 0.1％安多福皮肤消毒效果好;使用1根棉签消毒无论用0.5％安多福或2％碘酒、75％酒精消毒1个药瓶口均是安全的;无菌持物镊和无菌罐有效保存时间最长6h。

血液净化治疗29例小儿急性肾功能衰竭临床分析

目的 探讨小儿急性肾功能衰竭 (ARF)时血液净化技术临床应用的特点。方法 对 2 6例ARF采用血液透析(HD) ,3例ARF患儿应用腹膜透析 (PD)治疗 ,1例采用HD +PD治疗。结果 ARF患儿透析后血BUN、Cr显著下降 ,同时酸中毒和电解质紊乱纠正或改善。ARF患儿经过透析后 2 5例临床治愈 ,血BUN、Cr恢复正常 ,4例明显好转出院。结论 (1)HD和PD是ARF患儿安全有效的治疗措施 ;(2 )HD和PD可改善ARF患儿危急的状况 ,但ARF患儿预后与ARF发病年龄、原发疾病严重程度、ARF是否合并多脏器功能衰竭、诊断治疗时机及治疗方案选择等密切相关。

G6PD缺乏症患儿地中海贫基因缺陷的检测

[目的]了解合并地中海贫血(地贫)的G6PD缺乏症患儿珠蛋白基因缺陷类型。[方法]硝基四氮唑蓝(NBT)定量法测定红细胞G6PD／6PGD值筛选G6PD缺乏症;裂口PCR(gap-PCR)检测东南亚缺失型α地贫,PCR结合反向点杂交(RDB)技术检测β地贫。[结果]有25例G6PD缺乏症患儿合并有地贫,其中东南亚缺失型α地贫11例,占 44％;β地贫14例,占56％,基因型分别为IVS2nt654 6例(占24％),CD41-42 4例(16％),CD71-72、βE、IVSgnt654／CD41- 42、--／αα／IVS2nt654／IVS2nt654各1例(4％)。[结论]合并地贫血的G6PD缺乏症患儿珠蛋白基因缺陷类型多样,但 G6PD缺乏症与地贫不同基因型之间并无明显的相关性。

重症肌无力的免疫治疗

重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是一种T细胞依赖、抗体介导的自身免疫病.患者血清中抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体等自身抗体滴度升高.MG免疫治疗目前主要有两大类,一是对免疫系统有广泛作用的免疫疗法如皮质激素等;二是针对MG发病有关的特异性免疫细胞或细胞因子等,而对全身其他免疫功能影响较小的免疫治疗方法.

早期静脉营养治疗多系统器官功能衰竭患儿的护理

目的 探讨早期静脉营养支持对多系统器官功能衰竭 (MSOF)患儿的作用及护理。方法 6 4例患儿分 2组。 2组根据具体病情均给予胃肠营养 ,其中实验组于入院后 2～ 3天给予静脉营养。结果 实验组治愈率及治愈时间均优于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 早期静脉营养支持是影响MSOF患儿预后的重要治疗手段 ,精心的护理是保证其成功实施的关键。

小儿癫痫病健康教育

目的 引导癫痫患儿接受系统正规治疗 ,减少癫痫发作造成的脑损害 ,提高生活质量。方法 将深圳市儿童医院小儿神经科及癫痫治疗中心 2 0 0 0年 1 1月至 2 0 0 1年 1 1月门诊及住院癫痫患儿 4 0 3例作为观察组 ,用药物治疗同时配合多种形式健康教育。将 1 999年 3月至 2 0 0 0年 1 1月间单纯用药物治疗 ,6 0 9例作为对照组 ,评定癫痫病知识掌握情况和长期随诊情况。结果 观察组对癫痫病知识掌握良好 ,长期随诊率高于对照组 ( χ2=4 0 4 8,P <0 0 1 )。结论 对癫痫患儿及家属采用多种形式健康教育 ,可提高患者的依从性 ,更好地引导患儿及其家长配合系统正规治疗 ,有利于患者的治疗与康复。

自身抗体检测及其临床应用

机体在各种不利环境因素(感染、药物、不良刺激等)和不利机体内因素(肿瘤、恶劣情绪、过度疲劳等)作用下,自身免疫耐受机制遭到破坏,免疫系统将自身抗原作为异己攻击目标,最终发生各种类型的自身免疫性疾病(AID).免疫系统可通过自身抗体、细胞毒性细胞及其细胞因子、补体膜攻击复合物、自身消化酶系统等途径来完成对自身组织抗原的病理损伤,其中自身抗体的作用尤为突出,它常被视为机体产生AID重要标志,检测自身抗体也被视为诊断AID的重要手段.

2种气道给药方法治疗毛细支气管炎的疗效对比研究

目的 评价喘乐宁超声雾化吸入和氧气动力吸入 2种方法治疗毛细支气管炎的疗效。方法 1998年 1月～2 0 0 1年 7月住院确诊为毛细支气管炎的患儿 15 8例 ,采用喘乐宁雾化治疗 ,其中 92例为超声雾化给药 ,6 6例为氧气动力。比较 2种给药途径的疗效。结果 超声雾化给药的显效率明显高于氧气动力者 (P <0 .0 5 ) ;2组好转率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;氧气动力组的无效率明显高于超声雾化组 (P <0 .0 1)。结论 喘乐宁超声雾化吸入是有效的治疗毛细支气管炎的辅助方法 。

儿童结节性硬化症的临床诊断探讨

目的 探讨结节性硬化症儿科病人的特点。方法 应用美国全国结节性硬化症 1998年诊断标准 ,分析31例有结节性硬化症特征病例的临床表现并进行诊断。结果 31例就诊年龄为 2个月至 12岁 ,中位数 2岁 1个月。儿科结节性硬化症患儿的临床表现主要有 :癫疒间 发作、精神运动发育落后、皮肤损害 (色素脱失斑和面部血管纤维瘤 )、侧脑室室管膜下结节、大脑皮质结节、心脏横纹肌瘤和肾脏血管肌脂瘤。通过临床表现 ,诊断结节性硬化症 2 5例 ,可能为结节性硬化症 2例 ,4例怀疑为结节性硬化症。结论 新的临床诊断标准对儿科患儿的特点比较重视 ,有较好的可操作性。小儿结节性硬化症常见具有诊断性意义的特征为 :皮肤损害 (色素脱失斑和面部血管纤维瘤 )、侧脑室室管膜下结节、大脑皮质结节。

人血丙种球蛋白和阿司匹林治疗对川崎病患儿循环内皮祖细胞功能的影响

目的研究人血丙种球蛋白(IVIG)和阿司匹林(ASP)治疗对川崎病患儿循环内皮祖细胞功能的影响及其可能的机制。方法抽取10例川崎病患儿IVIG和ASP治疗前及治疗7 d后的外周血,将单个核细胞诱导培养内皮祖细胞。利用MTT法、改良Boyden小室法、细胞培养板贴壁法测定内皮祖细胞的增殖、迁移和贴壁功能。同时测定血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)的浓度。结果 IVIG和ASP治疗7 d后循环内皮祖细胞的功能较治疗前显著提高。IVIG和ASP治疗7 d后血浆中TNF-α和hs-CRP的浓度显著降低。治疗后TNF-α和hs-CRP浓度的降低与内皮祖细胞功能的提高呈显著正相关关系。结论 IVIG和ASP治疗可显著改善川崎病患儿循环内皮祖细胞的功能,其机制可能与TNF-α和hs-CRP的浓度降低有关。

川崎病患儿循环内皮祖细胞功能与血浆超敏C反应蛋白浓度的关系

目的研究川崎病患儿循环内皮祖细胞的功能状态及其与血浆超敏C反应蛋白(Hs-CRP)浓度的关系。方法将10例川崎病患儿和10例健康体检儿童分为川崎病组和对照组。利用含有血管内皮细胞生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的DMEM培养基将入选者的外周血单个核细胞诱导培养为内皮祖细胞。然后分别利用MTT法,改良Boyden小室法及细胞培养板贴壁法测定内皮祖细胞的增殖、迁移和贴壁功能。利用胶乳增强的免疫比浊法测定血浆Hs-CRP的浓度。结果川崎病组内皮祖细胞的增殖能力、迁移能力和贴壁能力均较对照组显著降低,差异有统计学意义,P<0.01。川崎病组Hs-CRP的浓度较对照组显著升高(87.1±30.2mg/Lvs5.3±3.4mg/L;P<0.01)。川崎病组循环内皮祖细胞功能与血浆Hs-CRP浓度呈显著负相关。结论川崎病患儿循环内皮祖细胞功能显著降低,这可能与川崎病患儿体内的炎症介质反应有关。