Alport综合征患者尿肾状杆细胞诱导成多能干细胞系的建立

目的:将Alport综合征(AS)患者尿肾状杆细胞诱导成多能干细胞(iPSCs)。掌握建立iPSCs细胞系的技术与方法。方法:利用慢性病毒介导4种转录因子(OCT4,Sox2,KLF4,c-myc)诱导从尿液中分离出的尿肾状杆细胞,建立诱导成干细胞样的克隆。挑选成功诱导的iPSCs克隆进行扩大培养,并对克隆进行免疫荧光检测,克隆形态观察,RT-PCR分析iPSCs细胞相关基因,体外三胚层分析及核型鉴定。结果:成功地从尿肾状杆细胞诱导成iPSCs,所获得的iPSCs可以表达人胚胎干细胞多能性分子标记,具有体外分化3个胚层的能力。在培养过程中能始终保持核型的稳定,并且能自我增殖、更新、分化。结论:从Alport综合征患者尿液中的尿肾状杆细胞成功诱导成iPSCs,为今后研究AS提供了良好的细胞模型。