miR-18a表达在HPV感染及宫颈癌发生发展中的意义

目的研究宫颈脱落细胞中miR-18a的表达水平在人乳头状瘤病毒(HPV)感染及宫颈癌发生发展中的意义。方法收集2015年6月至2017年6月深圳市南山区妇幼保健院及广州南方医院门诊及住院患者宫颈脱落细胞标本,通过HPV DNA分型检测将宫颈脱落细胞标本分为HPV未感染组(NE-HPV)、低危型HPV感染组(LR-HPV)、高危型HPV感染组(HR-HPV),采用荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测各组间miR-18a相对表达量;收集HR-HPV感染阳性的宫颈脱落细胞标本,依据病理检查结果分为宫颈上皮内瘤变(CIN)组及宫颈癌组各30例,对照组选取年龄、体重配对的30例宫颈上皮细胞正常无化生的标本,采用qRT-PCR检测各组间miR-18a相对表达量,分析miR-18a表达与HPV感染及宫颈癌发生发展的关系。结果 HR-HPV感染组宫颈脱落细胞中miR-18a相对表达量高于LR-HPV组与NE-HPV组,差异均有统计学意义(t值分别为11.144、18.482,均P<0.05);宫颈癌组、CIN组中miR-18a表达较对照组显著增高(t值分别为25.02、15.355,均P<0.05),但宫颈癌组与CIN组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线显示宫颈脱落细胞中miR-18a用于诊断CIN的曲线下面积(AUC)为0.699(95%CI:0.606～0.791,P<0.001),用于诊断宫颈癌的AUC为0.801(95%CI:0.724～0.879,P<0.001)。结论 HR-HPV感染者宫颈脱落细胞中miR-18a相对表达量明显升高,并与宫颈癌的发生发展密切相关。宫颈脱落细胞中miR-18a可能作为宫颈癌或癌前病变潜在标志物用于早期无创诊断。

长链非编码RNA SPATA31D5P吸附微小RNA-320a促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的乳腺癌(BC)中存在多种长链非编码RNA(lncRNA)的异常表达,并且与生存预后密切相关。本研究旨在探讨lncRNA SPATA31D5P在乳腺癌中的表达并通过吸附miR-320a影响乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。方法收集乳腺癌组织及癌旁组织各30例,采用Real-time PCR检测SPATA31D5P在乳腺癌组织及乳腺癌细胞系中的表达水平。选择乳腺癌MDA-MB-231细胞转染针对SPATA31D5P siRNA干扰载体,采用CCK-8法、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)法、Transwell小室实验和细胞划痕实验测定细胞增殖、侵袭和迁移能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡的改变。采用生物信息学方法筛选可与SPATA31D5P互补结合的miRNAs,Real-time PCR及双荧光素酶报告实验验证SPATA31D5P对miR-320a的调控作用。结果乳腺癌组织中SPATA31D5P水平显著高于邻近正常乳腺组织,各乳腺癌细胞系中SPATA31D5P表达都高于正常乳腺上皮细胞MCF10 A。siRNA干扰组的SPATA31D5P水平为0.288±0.052,低于空白对照组的1.114±0.096和阴性对照(NC)组的1.079±0.128(P<0.01)。与NC组和空白对照组相比,干扰组MDA-MB-231细胞的增殖活力明显下降并出现G_(1)期阻滞,凋亡率明显增加(P<0.01);干扰组的划痕愈合率和穿膜细胞数目分别为(14.36±1.75)%和(26±1.52)个,低于NC组的(52.25±1.87)%和(67.33±2.91)个(P<0.01)。双荧光素酶实验证实,SPATA31D5P能够直接调控miR-320a的表达及荧光素酶活性。结论 SPATA31D5P在乳腺癌中高表达,干扰其表达能有效抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与靶向调控miR-320a有关。

血浆miR-18a-5p表达对宫颈癌的诊断及预后价值研究

目的探讨血浆miR-18a-5p对宫颈癌诊断及预后的预测价值。方法采用qRT-PCR法检测60例宫颈癌患者血浆miR-18a-5p表达量,并分析其对宫颈癌的临床病理特征、诊断及预后的关系。结果宫颈癌患者血浆miR-18a-5p表达水平明显高于术后组及对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。ROC曲线显示血浆miR-18a-5p诊断宫颈癌的曲线下面积为0.928,95%置信区间为0.876-0.979;诊断灵敏度为76.7%,特异度为96.7%。血浆miR-18a-5p表达水平与宫颈癌患者肿瘤分化程度(P=0.032)、临床分期(P=0.001)及淋巴结转移(P=0.001)相关,而与其他临床特征无关。Kaplan-Meier分析表明miR-18a-5p高表达患者的总体生存率显著低于低表达患者(P<0.05)。结论血浆miR-18a-5p表达水平可作为宫颈癌潜在标志物用于临床诊断及预后评估。

血液学筛查指标在不同年龄组地中海贫血的诊断价值评价

目的:用诊断性实验指标评价平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)在不同年龄人群地中海贫血(以下简称地贫)检测中的价值。方法:选择不同年龄筛查人群5 564例,疑似地贫患者1 166例,其中成人780例,儿童260例,新生儿126例,地贫基因成人确诊336例,儿童确诊110例,新生儿确诊21例,MCV、RDW-SD、MCH用SYSMEX SF-3000检测,α、β地贫基因诊断分别用GAP-PCR法和PCR结合反向斑点杂交法(RDB)法。应用诊断性实验指标,以基因诊断结果为金标准,对以上几项血液学参数在不同年龄组对地中海贫血的诊断价值进行分析。结果:①在判断地贫时,MCV、MCH、RDW-SD ROC曲线下面(AUCROC)在成人组分别为0.917、0.895、0.869;在儿童组分别为0.965、0.956、0.778;在新生儿组分别为0.873、0.806、0.774;②MCV、MCH、RDW-SD判断地贫最佳临界值在成人组分别为75.45 fl,23.65 pg,36.76 fl;儿童组分别为68.95 fl,21.70 pg,33.75 fl;新生儿组分别为96.30 fl,32.85 pg,55.45 fl。③MCV,MCH,RDW-SD判断地贫阴性预测值在成人组分别为99.3%、99.2%、97.5%;儿童组分别为99.5%、99.3%、97.0%;新生儿组分别为99.0%,99.4%、99.0%。阳性似然比成人组分别为15.1,11.0,9.53;儿童组分别为17.3、17.2、13.8;新生儿组分别为16.3、20.8、13.5。阴性似然比成人组分别为0.08、0.10、0.28;儿童组分别为0.06、0.12、0.35;新生儿组分别为0.31、0.20、0.30。结论:①MCV,MCH,RDW-SD对不同年龄组地贫的诊断价值均较高,其中MCV诊断价值最大;②在诊断地贫时,新生儿,儿童,成人MCV、MCH、RDW-SD最佳临界值明显不同。