不同年份老香黄定量分析及其化学模式识别研究

建立了一种联合化学标志物定量分析和化学模式识别技术快速判别不同年份老香黄的方法,并筛选其差异性化学标志物。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)建立了对21种与老香黄相关的化学标志物及其内标物山柰酚-3-O-芸香糖苷的检测方法,该方法的线性关系良好,灵敏度高,专属性强,可用于对不同年份老香黄的区别分析。根据检出的不同年份老香黄的15个化学标志物含量,结合主成分分析(PCA)、聚类分析(HCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)法进行分析,可快速判别不同年份的老香黄,并筛选出6个差异性化学标志物。结果表明,贡献最大的差异化学标志物为5,7-二甲氧基香豆素,其中0年含量为(47.465±1.987)μg/g,3年含量为(17.069±0.542)μg/g,5年含量为(11.073±1.862)μg/g,8年含量为(41.905±2.240)μg/g,10年含量为(21.079±2.270)μg/g,15年含量为(43.267±2.432)μg/g,20年含量为(51.711±1.439)μg/g,该标志物的含量在一定程度上体现了不同年份的老香黄,可用于区分老香黄的贮藏年份。为了验证方法的可靠性,进行盲样适用性能力测试,测定结果所得年份和厂家提供的保持一致。该研究给市面上老香黄的质量控制及其品质鉴定提供了快速可靠的方法。

黄芪经益生菌发酵后异黄酮转化研究

目的:通过益生菌发酵中药黄芪提取液筛选出最佳菌株,探讨发酵时间对异黄酮类成分含量的影响。方法:以黄芪提取液为底物,分别接种10种益生菌,发酵32 h,发酵液前处理后,经HPLC法检测发酵前后异黄酮类成分含量,计算转化效率,筛选最佳菌株;用最佳菌株发酵黄芪提取液,考察不同时间下异黄酮类成分含量的变化情况。结果:有8种益生菌可使2种主要异黄酮苷类成分转化为各自苷元;根据转化效率筛选出最佳菌种为植物乳杆菌;植物乳杆菌发酵黄芪后2种异黄酮苷的转化率随着发酵时间的延长而增加,最终可达80%以上。结论:植物乳杆菌发酵黄芪效果最佳,该研究建立的检测方法专属性强,操作简单,重现性好,可用于黄芪发酵过程中异黄酮类成分的检测。

UPLC-MS/MS法与HPLC-FLD法分析检测中药中的黄曲霉毒素

目的:建立黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS法),同时采用高效液相色谱荧光法(HPLC-FLD法)进行测定。方法:采用UPLC-MS/MS测定,待测黄曲霉毒素的中药经过免疫亲和柱净化,采用C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)进行色谱分离,柱温30℃,以含0.1%甲酸的2.0 mmol·L^-1乙酸铵溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,用电喷雾正离子多反应监测模式(MRM)扫描;采用HPLC联用柱后衍生荧光检测方法测定同样的样品;并验证检测结果。结果:UPLC-MS/MS黄曲霉毒素质谱检测的线性关系良好,定量下限范围在0.177 8~0.633 3μg·kg^-1,检测下限范围在0.055 1~0.190 0μg·kg^-1,样品测定结果在1.423~1.975μg·kg^-1之间;同时采用HPLC-FLD荧光检测法进行测定(定量下限范围为0.660~0.204μg·kg^-1,检测下限范围为0.059~0.206μg·kg^-1)。同一样品测定结果误差在1.501%~9.377%之间。结论:与柱后衍生化HPLC-FLD法相比,液质联用测定中药材中黄曲霉毒素的方法,专属性强,操作简单,简便快速,灵敏度高,减少实验成本。