深圳市宝安区感染性腹泻病原菌监测结果分析

目的了解宝安区感染性腹泻的病原菌构成情况,为控制感染性腹泻提供病原学依据。方法采集辖区内2011年5月至2012年4月感染性腹泻患者的粪便标本,进行病原菌分离、鉴定,并对检测结果统计分析。结果检测标本2 310份,病原菌的检出率为12.29%(284/2 310)。分离菌株以副溶血性弧菌为主,其次是沙门菌和肠致泻性大肠埃希菌;夏秋季为高发季节,副溶血性弧菌检出高峰在6-9月;沙门菌感染中婴幼儿占52.56%,副溶血性弧菌在20～40岁多见。结论副溶血性弧菌是辖区内感染性腹泻的主要病原菌,加强夏秋季海产品的监测和针对特定人群的饮食安全教育是腹泻防控的重要措施。

深圳市宝安区病毒性腹泻监测分析

目的了解深圳市宝安区病毒性腹泻的感染情况。方法采用实时荧光定量–聚合酶链反应对2011年5月—2012年4月宝安区403例腹泻患者的粪便标本进行诺如病毒和轮状病毒的核酸检测。结果腹泻患者的病毒阳性率为37.22%,其中诺如病毒和轮状病毒的阳性率分别为20.35%和18.86%。诺如病毒和轮状病毒全年各月均有检出,诺如病毒在6—10月检出较多,轮状病毒秋冬季为发病高峰。儿童的病毒阳性率和轮状病毒检出率显著高于成人。结论诺如病毒和轮状病毒是辖区内病毒性腹泻的主要病原,应加强全部人群的病毒性腹泻监测工作。

深圳地区急性上呼吸道感染中人鼻病毒的流行状况和基因特征分析

目的了解深圳地区急性上呼吸道感染患者人鼻病毒(HRV)的分子流行特征。方法对门诊采集的急性上呼吸道感染患者咽拭子用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)进行鼻病毒检测,随机选择阳性样本通过巢式RT-PCR对其VP4/VP2基因片段进行扩增,测定核酸序列并进行同源性比对和分型。结果 1 494份样本HRV检出率为16.13%,HRV感染主要集中在<7岁儿童,占63.07%(152/241);HRV主要在春、夏、秋季检出,冬季检出较少。获得的47条VP4/VP2序列中,25条为HRV-A型,9条为HRV-B型,13条为HRV-C型。结论深圳地区急性上呼吸道感染患者HRV的感染率高,呈现多个基因型共同流行且以A型为主的特点。

CA6感染对人JurkatT细胞Toll样受体表达的影响

目的观察柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CA6)在人JurkatT细胞中的感染特点,并检测感染后Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)的表达及细胞因子分泌情况,从而探索CA6的感染和致病机制。方法选取人Jurkat T细胞建立CA6病毒细胞感染模型,检查病毒感染引起的细胞形态学改变。采用RT-PCR方法检测不同感染时间后TLR1~TLR10mRNA表达情况,并利用Real-TimePCR方法进一步分析细胞中TLRs的动态表达谱;采用ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素6(IL-6)白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌水平。结果CA6可在人JurkatT细胞中复制增殖并引起细胞病变效应;RT-PCR结果提示,CA6感染引起人JurkatT细胞TLR7的表达上调;Real-TimePCR检测结果显示,感染6h、12h、24h和48h后,感染组TLR7mRNA的相对表达水平分别为1.69±0.473.53±1.174.46±0.69和2.76±0.39,与对照组结果差异有统计学意义(t值分别为-2.53、-3.74、-8.64、-7.75,P值分别为0.112、0.02、0.001、0.001);细胞因子检测结果提示,CA6感染后IL-8的分泌上调,明显高于对照组24h和48h的分泌水平,差异有统计学意义(t值分别为-49.75、-91.10,P值<0.05)。结论CA6病毒感染人JurkatT细胞后引起TLR7表达上调,其诱导的炎性反应与部分TLR介导的信号转导途径可能有关。

Toll样受体7在肠道病毒71型感染人Jurkat T细胞诱导炎症因子中的作用

目的研究Toll样受体（TLRs）在肠道病毒71型（EV—A71）感染人T细胞中的表达情况，阐明其在EV—A71致炎症反应机制中的作用。方法EV—A71毒株由深圳市CDC于2014年从手足口病患儿粪便中分离，接种200txl病毒滴度为103细胞培养半数感染量（CCID50）／ml的病毒液于人JurkatT细胞，不同感染时间后，采用RT—PCR方法检测TLR1～TLR10mRNA表达情况；采用Real—timePCR分析TLR7mRNA变化水平；采用Westernblot分析TLR7相关接头分子髓样分化因子（MyDS8）表达水平；采用ELISA检测培养上清细胞因子白细胞介素（IL）-6、IL．8和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的分泌水平。结果Real—timePCR检测结果显示，感染6、12、24和48h，感染组TLR7mRNA的相对表达水平分别为1．26±0．15、1．75±0．20、2．26±0．23和3．74±0．62，与对照组差异有统计学意义（t值分别为-2．96、-6．38、-9．57、-7．71，P值均〈0．05）；Westernblot结果显示，感染24h和48h时，感染组MyD88蛋白表达水平与对照组相比分别增加1．34和2．17倍；细胞因子检测结果显示，感染24h和48h时，IL-6的分泌水平分别为（302．86±38．11）、（[79．70±14．50）pg／ml，高于对照组24h和48h的分泌水平[（[76．42±9．60）、（179．70±14．50）pg／ml]，差异有统计学意义（t值分别为-5．57、-18．54，P值均〈0．05）。48h感染组TNF．01分泌水平为（[00．81±9．81）pg／ml，高于对照组【（56．19±6．94）pg／ml】，差异有统计学意义（t=-6．43，P=0．003）。结论EV-A71主要通过TLR7被免疫活性细胞识别，进而激活TLR7相关信号通路，诱导产生大量促炎因子来参与感染致炎症反应的病理过程。