莱茵衣藻线粒体遗传系统及其外源基因表达

外源基因表达是目前光合生物线粒体遗传系统研究的瓶颈.作者在成功进行光合生物线粒体外源基因稳定表达的基础上,评述光合生物———莱茵衣藻的线粒体遗传表达系统,指出该系统是目前唯一能够有效表达外源功能基因的光合生物.介绍莱茵衣藻线粒体基因组结构、mtDNA复制、转录及翻译特性,论述莱茵衣藻线粒体遗传转化方法、转化株筛选标记基因及外源基因表达的研究进展,分析外源基因在线粒体基因组中的同质化过程、表达效率及存在问题,为莱茵衣藻线粒体基因表达调控及反向遗传学研究辟出新径.

莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶cDNA克隆及其酵母表达

旨在预测并克隆莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶cDNA(cracs),分析其在酵母中的功能。RT-PCR克隆cracs序列,Clustal W和MEGA6.0软件分别分析其编码蛋白保守序列和进化树,表达并分析其在酵母YB525中的底物偏好性。结果表明,首次在莱茵衣藻中克隆获得一个cracs,测序表明其序列大小为2 004 bp,编码667个氨基酸,编码蛋白crACS的预测分子量为72.3k D,包含酰基辅酶A合成酶的两个保守区:AMP-binding区和FACS区。进化树比对显示,cr ACS与拟南芥的长链酰基辅酶A合成酶LACSs具有较高的同源性。酵母表达显示cracs编码蛋白能互补酵母YB525 LACS的缺陷表型,活化并优先利用C16∶1和C14∶0。莱茵衣藻cracs编码蛋白可活化外源脂肪酸,属于酰基辅酶A合成酶家族。