生殖细胞减数分裂端粒挂膜分子机制概述

减数分裂是生殖细胞形成配子的分裂方式,染色体端粒正确锚定在核膜上是这一重要生理过程顺利进行的前提。蛋白与蛋白的相互作用使端粒悬挂在生殖细胞的核膜上,以保证减数第一次分裂前期中染色体配对、联会和同源重组的正确进行。本文对目前已知的减数分裂端粒挂膜相关蛋白及复合物,包括端粒保护蛋白复合物(Shelterin)、减数分裂特异的核骨架和细胞质骨架连接复合物(LINC)、内核膜相关的TERB1-TERB2-MAJIN(TTM)复合物,以及SPDYA-CDK2复合体的结构和功能方面进行概括及综述。

HLA-G基因敲除人滋养层干细胞模型构建

目的构建人白细胞抗原G(HLA-G)基因敲除的人滋养层干细胞(TSC)模型,初步探究HLA-G对TSC向绒毛外滋养层细胞(EVT)分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人TSC的HLA-G基因,将TSC向EVT细胞分化,采用免疫荧光染色及实时定量聚合酶链式反应(qPCR)方法观察HLA-G基因敲除对其标志基因表达的影响。结果经测序、免疫荧光染色及蛋白质印记法(WB)验证,成功获得了HLA-G基因完全敲除的人TSC细胞系。HLA-G^(-/-)-TSC可诱导分化为EVT样细胞,HLA-G^(-/-)-EVT的标志基因表达量与野生型相比无显著性差异(P>0.05)。结论本研究成功构建了稳定的HLA-G基因敲除人TSC模型,且HLA-G并不明显影响EVT的分化过程。

HLA-G及其亚型在人卵丘细胞中的表达

目的研究HLA-G分子及其亚型在人卵丘细胞中的表达。方法收集临床行辅助生殖治疗取卵患者的卵丘细胞,共聚焦免疫荧光技术探究HLA-G分子在卵丘细胞的表达和定位,微滴式数字PCR技术对HLA-G各亚型(HLA-G1~HLA-G7)在卵丘细胞内的表达水平进行绝对定量检测。结果卵丘细胞的细胞膜和细胞质中均可见HLA-G分子表达,且HLA-G各亚型呈现差异性表达,其中HLA-G3和HLA-G4的拷贝数分别位列第一和第二,高于其他亚型(P<0.05),膜结合型HLA-G拷贝数显著高于可溶型HLA-G(P<0.001)。结论人卵丘细胞内HLA-G3和HLA-G4亚型表达量较高,膜结合型HLA-G表达水平显著高于可溶型。本研究为了解HLA-G及其亚型在人卵丘细胞表达的功能和作用提供了新的发现。