慢性ITP患儿调节性B细胞与效应Th细胞的相关性研究

目的研究慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患儿外周血调节性B细胞数量与相关细胞因子的变化,分析它们之间的相关性,研究这些细胞的分化在CITP发病机制中的作用。方法选择30例CITP患儿,外周血单个核细胞被分离,Breg细胞以及Th1、Th22、Th17的比例变化通过流式细胞术检测;并体外培养PBMC细胞,上述培养液中IL-10水平以及IFN-γ、IL-17、IL-22运用ELISA法检测,与同期选择的健康组比较。结果与健康组比较,CITP患儿外周血中Th1、Th17、Th22细胞亚群的比例均升高(18.4±4.7vs 10.82±4.4;2.42±1.02vs 1.23±0.42;0.79±0.24vs 0.26±0.11,%),调节性B细胞(Breg)的比例降低(0.83±0.21vs 1.89±0.12,%),差异均有统计学意义(P<0.05),Breg细胞分别与Th效应细胞亚群的变化呈负相关(P<0.05),细胞因子IL-10水平与IFN-γ、IL-17、IL-22水平也呈负相关(P<0.05)。结论调节性B细胞比例下调可能参与CITP患儿效应T细胞免疫紊乱机制,为CITP患儿的免疫调节治疗提供了新思分路。

SPR技术检测血小板抗体及其临床应用的研究

目的利用表面等离子体共振(SPR)技术对血小板抗体筛选与配型的可行性进行研究,摸索一种血小板相容性输注的新方法。方法采用氨基耦联法在SPR芯片表面固定相应的通用型血小板抗原,并优化芯片分析条件,再用该芯片检测对照血清,分析该技术的特性;MAIPA法对比研究临床样本,同时运用SPR技术对10例血小板抗体阳性患者输注前进行血小板配合试验,选用配合型血小板输注,临床跟踪评价输注效果。结果 SPR技术检测血小板抗体的稳定性、敏感性与特异性均较好;SPR技术与MAIPA法对106例多次输注血小板的临床样本检测显示,2种方法比较差异无统计学意义(χ2=0.333,P>0.05),灵敏度为91%,特异性为97.9%,总一致性为97.2%;利用SPR技术配型输注的10例血小板抗体阳性患者,8例1h血小板增加值CCI>7.5,24hCCI>4.5,临床跟踪评价良好。结论 SPR技术筛检血小板抗体与MAIPA法性能基本相当,但SPR技术操作更简便快速、可靠直观,而且非标记,可满足临床血小板输注前抗体的快速检测和配型的初步要求。

B10细胞及相关因子异常在CITP免疫紊乱中的作用

目的检测慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者外周血新型调节性B细胞(B10)数量与相关细胞因子的变化,分析患者B10细胞与血小板计数及血小板抗体的相关性,探讨B10在CITP免疫紊乱中的作用。方法选择40例CITP患者,分离外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测B10细胞亚群的比例变化;用ELISA法检测培养液上清中细胞因子IL-10与TGF-β1的水平,FCM法检测患者血小板抗体阳性率的变化,与健康对照组比较分析。结果 CITP患者外周血中CD19+B、CD5+CD19+B细胞亚群的比例均升高,而调节性B10的比例降低(t=5.52,P﹪0.05),并与血小板计数呈正相关(r=0.621,P<0.05),与血小板抗体的水平呈负相关性(r=-0.518,P<0.05);患者PBMC培养液上清IL-10、TGF-β1的水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P﹪0.05);患者B10的比例变化与IL-10表达水平呈正相关(r=0.687,P<0.05),而与TGF-β1的变化无相关性(r=0.053,P>0.05)。结论 B10细胞及相关细胞因子IL-10的下调参与CITP的免疫紊乱机制,这将可为CITP的临床诊断与治疗提供新靶点。