miR-20a-5p在肺结核外周血单核细胞中的表达及临床价值

目的:探讨结核菌感染过程中单核细胞miR-20a-5p的表达变化情况及其与肺结核诊断、治疗的关系。方法:选取健康人群(HD)、结核菌潜伏感染(LTBI)、活动性肺结核(PTB)各5例,采集外周血并分离外周血单个核细胞(PBMC),利用免疫磁珠分选外周血CD14+单核细胞,提取总RNA并采取miRNA芯片检测,将肺结核差异表达最为显著的miRNA分子筛选出来,采用定量PCR技术在大样本人群中进行验证(每组各10例),并对5例活动性肺结核患者进行动态随访,利用定量PCR技术检测抗结核治疗前、治疗3个月后、6个月后miR-20a-5p分子的表达情况。利用结核菌强毒株H37Rv、弱毒株H37Ra以及BCG分别感染分化的人单核细胞进行体外实验验证。结果:miRNA芯片显示PTB人群与LTBI、HD人群表达谱存在显著差异,TB人群中共发现14个下调的miRNA分子,包括miR-20a-5p。定量PCR技术证实miR-20a-5p分子在TB人群中的表达水平显著低于HD和LTBI,当服用抗结核药后,其表达水平逐渐上调。用H37Rv、H37Ra及BCG在MOI=10时感染分化的人单核细胞,不同菌株均显著下调miR-20a-5p表达,而以弱毒株下调最为明显。结论:无论是体内还是体外,结核菌感染均下调单核细胞miR-20a-5p表达,而抗结核治疗则显著逆转这种抑制状态。

飞行时间质谱与TaqMan探针技术在结核病易感性相关基因单核苷酸多态性筛选中的应用

目的 对比分析飞行时间质谱技术（MALDI-TOF）和TaqMan探针筛选与结核病易感性相关单核苷酸多态性（SNP）位点的结果,以及联合应用的方法学和效果评价.方法 选取2010年10月至2011年4月在深圳市第三人民医院收治并确诊的结核病患者400例为结核病组,对照组为同时期收集的健康体检者300名,利用MALDI-TOF对选取的7个SNP位点（rs2227476、rs1800795、rs56077270、rs1800797、rs2227484、rs2227472和rs2227473）同时进行基因分型,初步筛选易感SNP位点;与结核病易感相关的单个SNP位点,采用基于TaqMan探针技术的实时荧光定量PCR对同样的标本再进行基因分型,比较两种方法的准确性与敏感度;以rs2227473位点为实例对分型结果的基因频率进行分析,确定肺结核的易感SNP.结果 MALDI-TOF分型成功率为99.7％（698/700）,TaqMan探针技术为98.4％（689/700）;在基因分型过程中,MALDI-TOF与TaqMan探针方法对1例标本的分型结果不一致,经过对此分型结果进行了测序验证,MALDI-TOF的分型结果正确,MALDI-TOF在准确性和敏感度比TaqMan法稍高.位点rs2227473基因频率分析中,结核病组G等位基因频率（90.3％,722/800）明显高于对照组（82.5％,495/600）（x2=6.911,P=0.009）.结论 上述肺结核易感基因的筛选方法是可行的;实例分析中,将两种方法联合应用,发现了IL-22基因rs2227473位点等位基因G可能与肺结核发病相关,两位点中等位基因A可能为保护性基因.

获得性免疫缺陷综合征合并慢性扁桃体炎患者Th1及Treg应答水平及意义

目的探讨获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodef iciency syndrome,AIDS)合并慢性扁桃体炎患者外周血和扁桃体组织中Th1/Treg应答情况。方法采用RT-PCR检测了外周血和扁桃体T-bet/Foxp3的表达;同时采用免疫组织化学法检测T-bet/Foxp3以及CD4/C D 8细胞的数量;采用全血胞内细胞因子染色方法,分析CD4+IFN-γ+T/CD4+CD25+Foxp3+细胞表达水平。结果FACS检测A IDS伴慢性扁桃体炎患者CD4+IF N-γ+T细胞表达(20.65±7.14)%显著低于健康对照(39.13±13.30)%和慢性扁桃体炎患者(36.89±10.05)%;CD4+CD25+Fo x p 3+细胞表达(7.38±2.6 3)%则明显高于健康对照(4.31±2.14)%和慢性扁桃体炎患者(4.79±2.23)%;CD4细胞计数(104.5±60.96)显著低于健康对照(663.9±170.3)和慢性扁桃体炎患者(546.4±151.9);CD8细胞计数(580.5±130.7)显著高于健康对照(364.7±69.85)和慢性扁桃体炎患者(443.0±150.5);RT-PCR检测AIDS伴慢性扁桃体炎患者T-bet表达(4.831±2.61)显著低于健康对照(20.12±11.31)和慢性扁桃体炎患者(9.83±3.54);Foxp3表达(102.5±47.42)显著高于健康对照(57.28±25.19);免疫组化检测AIDS伴慢性扁桃体炎患者扁桃体组织中T-bet表达(80.20±2.20)显著高于慢性扁桃体炎患者(31.9±2.82);Foxp3表达和慢性扁桃体炎患者差异无统计学意义;CD4细胞(42.09±4.09)显著低于慢性扁桃体炎患者(80.93±3.42);CD8细胞(80.45±2.81)显著高于慢性扁桃体炎患者(37.57±3.11)。结论患者外周血和扁桃体组织中存在明显不同的Th1/Treg免疫反应,Th1/Treg失衡在AIDS伴慢性扁桃体炎患者致病机制中起着重要作用。

结核分枝杆菌感染对Ⅰ型干扰素受体基因表达的影响及其在结核病患者外周血表达的意义

目的 研究结核分枝杆菌感染对工型干扰素受体（IFNAR）基因表达的诱导作用及其在结核病患者外周血中表达的临床意义.方法 选取2013年1月至2013年5月在深圳市第三人民医院确诊的痰菌阳性的肺结核患者（TB组）15例;结核分枝杆菌潜伏感染（latent tuberculosis infection,LTBI）者（LTBI组）15例、健康对照（HC组）15例,均为同期医院体检人员.应用免疫磁珠从健康人外周血单个核细胞（PBMCs）中分选CD14＋单核细胞,在巨噬细胞集落刺激因子（M CSF）刺激下诱导分化为巨噬细胞,随后感染不同毒力结核分枝杆菌（H37Ra、H37Rv）,应用实时定量PCR检测巨噬细胞中IFNAR1和IFNAR2基因表达情况,以2-△△Ct值表示IFNAR1和IFNAR2基因拷贝数.观测HC组、LTBI组、TB组患者各15例,分析不同人群PBMCs中IFNAR基因表达的差异.采用GraphPad 4.0软件对数据进行统计处理.多组计量资料数据首先进行齐性检验以判断是否符合正态分布,若符合正态分布,则用-x±s表示,并通过方差分析进行两两比较,从而计算q值.计数资料进行“行×列”表x2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 经H37Rv刺激后,IFNAR1基因表达水平（5.95±0.41）显著低于空白对照（7.53±0.41）,差异有统计学意义（q=4.15,P＜0.05）;而H37Ra刺激后IFNAR1基因表达水平为（6.54±0.33）,与空白对照（7.53±0.41）、H37Rv感染（5.95±0.41）相比差异均无统计学意义（q值分别为2.56、1.57,P值均＞0.05）;而IFNAR2基因在H37Ra和H37Rv刺激后表达水平分别为（8.81±0.85）、（8.84±0.80）,均显著低于空白对照组（12.67±1.15）,差异具有统计学意义（q值分别为4.10、4.13,P值均＜0.05）;而H37Ra和H37Rv刺激后IFNAR2的基因表达差异无统计学意义（q=0.02,P＞0.05）.IFNAR1基因在TB、LTBI、HC三组人群之间表达水平分别为（5.39±0.64）、（6.59±0.86）、（7.08±1.10）,两两比较差异均无统计学意义（TB vs HC,q=1.91;TB vs LTBI,q=1.53;HC vs LTBI,q=0.87;P值均＞0.05）,而TB患者IFNAR2基因相对表达量为（5.96±0.58）,显著低于健康对照组（10.01±1.58）,差异有统计学意义（q=3.67,P＜0.05）.结论 结核分枝杆菌感染可以诱导巨噬细胞IFNAR基因表达下调,且与菌株毒力无关.在结核病患者外周血中IFNAR2基因表达下调,具有潜在诊断价值.

IP-10在结核患者中的表达及在诊断中的应用

目的研究全血干扰素诱导蛋白10(interferon-inducible protein10,IP-10)在不同人群不同标本中的表达情况,评价其在结核病诊断中的应用价值。方法采用免疫酶联吸附试验(ELISA)法来检测24例健康人、24例结核潜伏患者及34例结核患者血浆中的IP-10表达量,并对结核病患者进行随访,观察抗结核治疗后IP-10表达的变化。检测23例结核患者和15例非结核患者脑脊液中IP-10表达量,通过绘制ROC曲线,评价IP-10对结核病的诊断效能。结果结核患者血浆中IP-10显著高于健康人和结核潜伏患者;IP-10在分辨结核病人和健康对照或潜伏感染者有较好的效果,AUC均在0.9以上;结核患者血浆中IP-10随着治疗的进行逐渐降低;结核患者脑脊液和胸腔积液中IP-10显著高于非结核患者。结论 IP-10在结核患者中高表达,能有效地区分结核病,可用于诊断结核的生物标识。

外周血CD3^+CD161^+淋巴细胞检测在结核病诊断中的价值初探

目的检测外周血CD3^+CD161^+淋巴细胞在结核病人中的表达水平,探讨其应用价值。方法选择菌阳结核病人40例、菌阴结核病人37例、潜伏感染者20例、健康对照者30例。采用流式细胞仪检测各组人群外周血CD3^+CD161^+淋巴细胞水平。通过绘制ROC曲线,评价其对结核病的诊断效能。结果菌阳组和菌阴组CD3^+CD161^+淋巴细胞表达水平分别为(17.59±1.36)%和(16.89±0.83)%,均明显低于对照组[(30.05±1.27)%]和潜伏感染组[(26.88±1.30)%],差异有统计学意义(F=30.77,P<0.01)。根据绘制的ROC曲线,CD3^+CD161^+淋巴细胞在分辨对照组和菌阳组时曲线下面积(AUC)为0.945,敏感度为82.5%,特异度为93.33%;在分辨潜伏感染组和菌阳组时AUC为0.913,敏感度为82.5%,特异度为95%;在分辨对照组和菌阴组时AUC为0.892,敏感度为81.08%,特异度为96.67%;在分辨潜伏感染组和菌阴组时AUC为0.868,敏感度为81.08%,特异度为95.0%。结论结核病人CD3^+CD161^+淋巴细胞下降明显,能够较好地分辨菌阳和菌阴结核病患者与健康人和潜伏感染者,可考虑作为诊断结核病的候选分子标志。

丹皮酚对人肝星状细胞α-SMA表达的影响

目的研究丹皮酚对肝星状细胞活化及胶原合成的影响,进一步阐明其抑制肝纤维化的机制,为抗肝纤维化提供新的成分明确的中药单体。方法采用TGF-β刺激培养的人肝星状细胞,观察丹皮酚在上述条件下对肝星状细胞表型转化、胶原合成的影响,以探讨丹皮酚在体外抗纤维化作用并初步研究其机制。实时荧光定量PCR、Western Blotting检测肝星状细胞α-SMA mRNA及蛋白水平表达,明确丹皮酚对TGF-β刺激下肝星状细胞表型转化的影响。羟脯氨酸法检测细胞培养上清总胶原的表达。结果在TGF-β刺激作用下,α-SMA基因表达明显上调,加入不同浓度的丹皮酚后,α-SMA基因表达下调,并且具有丹皮酚剂量依赖性。在TGF-β刺激作用下,肝星状细胞培养上清中的羟脯氨酸含量明显上升,加入不同浓度的丹皮酚后明显下降。结论 TGF-β刺激使得α-SMA基因表达上调,加入丹皮酚表达下调,丹皮酚对肝星状细胞表型转化有促进其纤维化作用。TGF-β刺激作用下,肝星状细胞培养上清中的羟脯氨酸含量明显上升,提示肝星状细胞胶原合成增加。

IL-22基因单核苷酸多态性与肝癌易感性的相关性研究

目的:利用高通量飞行时间质谱来探讨IL-22基因多态性与肝癌易感性的相关性。方法:选取2011年1月至2012年12月赣南医学院第一附属医院普外科收治的病理确诊的肝癌患者55例,同期在本医院体检科体检的健康人60例为对照组,采用美国Sequenom公司建立的Massarray检测平台分析IL-22基因4个SNP位点(rs2227472、rs2227478、rs2227483、rs2227473)基因型,统计两组人群各个SNP等位基因频率;应用ELISA方法检测不同基因型肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)的培养上清液中IL-22浓度。结果:IL-22基因rs2227472位点存在GG、GA和AA 3种基因型,病例组等位基因G频率(57.2%)高于健康对照组(51.7%),差异有统计学意义(P<0.05),其他3个位点病例组和对照组之间差异无统计学意义;rs2227472位点GG基因型肝癌患者的PBMC培养上清液中IL-22浓度为(40±6)ng/L,明显高于AA/GA基因型肝癌患者(17±5)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-22基因rs2227472多态性与肝癌易感性有相关性,其等位基因G可能和肝癌发生有关;rs2227472多态性影响机体PBMC的IL-22的分泌,在肝癌的免疫学机制中起关键作用。

不同毒性Mtb菌株对Ⅰ型干扰素基因的诱导作用及其在结核病患者外周血中的表达

目的研究不同Mtb菌株对Ⅰ型干扰素基因的诱导作用及其在结核病患者外周血中的表达。方法从2012年2月至2012年8月在深圳市第三人民医院健康体检者中利用随机数字表法抽取30名健康人外周血标本，并提取单个核细胞中分选出CD14^＋细胞，用重组人巨噬细胞集落刺激因子（macrophage colony stimulating factor，M-CSF）刺激，诱导分化为人巨噬细胞，并分别感染Mtb减毒株H37Ra和Mtb标准株H37Rv，应用实时定量PCR（real—time PCR）检测2种菌株感染后Ⅰ型干扰素基因IFNB和IFNA的相对表达量2^-ΔΔCt值。此外使用上述方法对同期选取的结核病组（15例）、健康对照组（15例）、Mtb潜伏感染组（15例）的Ⅰ型干扰素基因的相对表达量进行检测。采用GraphPad4．0软件对数据进行统计处理，两组均数间比较采用t检验，三组均数间比较采用方差分析，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果经H37Rv感染的健康人巨噬细胞的IFNB基因相对表达量2^-ΔΔCt值（10．38±2．24）显著高于空白对照组（6．26±3．42），差异有统计学意义（t=2．47，P=0．026）；经H37Ra感染的巨噬细胞的IFNB基因相对表达量2^-ΔΔCt值（8．92±0．85）与空白对照组（6．26±3．42）比较差异无统计学意义（t=1．84，P=0．09）；IFNA相对基因表达量2^-ΔΔCt值在H37Rv感染组（5．11±2．31）、H37Ra感染组（5．17±3．40）及空白对照组（4．41±1．69）之间差异无统计学意义（F=0．16，P=0．85）。结核病组IFNB基因表达（4．32±1．22）显著高于健康对照组（2．73±1．23），差异有统计学意义（t=3．55，P=0．0014）；IFNA基因在健康对照组（3．91±0．75）、Mtb潜伏感染组（4．25±1．03）、结核病组（4．73±1．44）之间表达差异无统计学意义（F=1．93，P=0．064）。结论Mtb的感染可以诱导Ⅰ型干扰素基因的表达，在结核病患者中IFNB基因表达上调显著。

Eotaxin在结核病患者中低表达及其临床意义

目的:研究探讨嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)在不同人群血浆中的表达情况,评价其在结核病诊断中的应用价值。方法:免疫酶联吸附试验(ELISA)检测12例健康人,12例结核潜伏患者,18例结核病患者血浆中eotaxin表达量,并随访其中8例结核病患者抗结核治疗后eotaxin表达的变化。通过绘制ROC曲线,评价eotaxin对结核病的诊断效能。比较9例结核性胸膜炎患者胸水上清和血浆中eotaxin的表达。结果:结核病患者血浆中eotaxin显著低于健康人和结核潜伏患者;Eotaxin在分辨结核病患者和健康对照或潜伏感染者的显示较好的效果,AUC均在0.85以上;结核病患者血浆中eotaxin随着治疗进行逐渐升高。Eotaxin在结核性胸膜炎患者胸水上清中的表达显著低于血浆中的水平。结论:Eotaxin在结核病患者中低表达,能有效地区分结核病,可作为用于诊断结核的生物标识。

单中心尿毒症透析人群的隐性结核感染相关因素分析

目的:本研究横断面调查了北京大学深圳医院肾内科接受血液透析(HD)和腹膜透析(PD)尿毒症人群中隐性结核感染(LTBI)患病率,并探讨影响尿毒症透析人群LTBI的危险因素.方法:选择接受长期(≥3个月)HD和PD患者270例.排除活动性结核病、HIV感染、恶性肿瘤、接受糖皮质激素或免疫抑制剂治疗的患者,使用酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测患者的外周血单个核细胞(PBMCs)的数值,无结核活动相关症状(发热、盗汗、消瘦等)的ELISpot阳性,影像学检查排除活动性结核者为LTBI,通过对LTBI患病率研究,以获得可能导致LTBI的危险因素.结果:270例(122例PD和148例HD)中,47例(17.4%)为ELISpot阳性,223(82.6%)为ELISpot阴性.HD组(18.9%)患者LTBI患病率略高于PD组(15.6%),差异无统计学意义(P=0.575).LTBI的危险因素为年龄(OR:0.97[0.95,0.99]每年增量),结核病史(OR:4.78[1.03,21.9])和吸烟史(OR:2.89[1.15,7.32]).结论:尿毒症透析人群LTBI患病率为17.4%,与健康人群LTBI患病率相似;不同透析方式LTBI患病率的比较差异无统计学意义;老年人、吸烟行为及结核病史为独立危险因素.

趋化因子CXCL9在结核病患者血浆中的表达及临床意义

目的检测不同人群和不同标本CXCL9的表达情况,评价其在结核病诊断中的应用价值。方法收集深圳市第三人民医院2012年1月1日至2013年12月30日入院确诊的结核病人16例作为治疗组,结核病潜伏感染人群和健康者各20例作为对照组,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测三组患者的血浆中CXCL9/MIG的表达水平,其中10例结核病患者同时在抗结核治疗3、6、12个月期间检测血浆中CXCL9/MIG的表达水平。结果结核病人血浆中CXCL9的表达水平显著高于健康对照组和潜伏结核感染人群(P<0.001),随着抗结核治疗CXCL9的表达水平逐渐下降。CXCL9在分辨结核病人和健康对照组的效能AUC为0.9125,敏感性为75%,特异性为90%;分辨结核病人和潜伏感染者的效能ROC曲线下的面积(AUC)为0.8188,敏感性为75%,特异性为80%。结论 CXCL9在结核病人血浆中显著高表达,有可能作为诊断结核的生物标识。

LTA4H基因单核苷酸多态性与肺结核易感性的相关性研究

目的探讨白三烯A4水解酶(leukotriene A4 hydrolase,LTA4H)基因多态性与深圳地区汉族人群肺结核发病的关系,并结合临床指标分析,筛选功能性基因单核苷酸(single nucleotide polymorphism,SNP)。方法利用TaqMan探针技术进行基因分型,分析深圳汉族人群中958例结核病患者和945名健康对照的LTA4H基因位点rs17525495的多态性,明确基因多态性与结核病易感性的关系。结果在SNP位点rs17525495基因频率分析中,结核组CC基因型频率(11.9%)明显高于对照组(6.1%)(P<0.05),结核组G等位基因频率(32.7%)明显高于对照组(29.0%)(χ~2=6.20,P=0.0064),结核组G等位基因频率(32.7%)明显高于对照组(29.0%)(χ~2=6.20,P=0.0064)。将ESR及CT评分按照rs17525495位点的基因型进行分层分析,在三种基因型中无统计学差异。结论 LTA4H基因rs17525495位点等位基因C可能与肺结核发病相关,等位基因T可能为保护性基因。但是rs17525495位点可能不是功能性SNP。

活动性肺结核患者支气管肺泡灌洗液免疫细胞分析

目的探讨活动性肺结核患者的免疫功能状态,为临床免疫治疗提供理论依据。方法收集活动性肺结核患者35例,并根据年龄、镜下分型和支气管CT评分对上述患者进行分组,同期选择12例健康志愿者作为健康对照组,分析两组研究对象支气管肺泡灌洗液T细胞、CD4细胞、CD8细胞、单核细胞和B细胞比例的差异。结果活动性肺结核患者的CD4细胞和CD8细胞的比例分别为(54.76±17.44)%和(41.24±15.65)%,与健康对照组的(65.43±10.00)%和(32.3±8.69)%比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。活动性肺结核组单核细胞比例(9.38±8.1)%高于健康对照组(2.15±2.52)%,差异有统计学意义(P<0.05)。与健康对照者相比,炎性浸润型患者和瘢痕狭窄型患者的CD4细胞比例降低,CD8细胞比例升高,CD4细胞/CD8细胞降低,且具有统计学意义(P<0.05),另外,炎性浸润型患者的单核细胞高于健康对照者(P<0.05)。溃疡坏死型患者的单核细胞和B细胞均高于健康对照者(P<0.05);CT评分高的组单核细胞比例显著高于低CT评分组(P<0.05)。结论支气管肺泡灌洗液免疫细胞水平的检测有助于阐明肺结核的免疫致病机理,同时也可为临床免疫治疗提供理论依据。

女性生殖器结核不孕症的影响因素分析

目的研究女性生殖器结核与不孕症之间的相关性,为临床诊治提供有力参考。方法选择2015年3月—2016年12月期间收治的46例女性生殖器结核患者作为本次观察的对象,对46例女性生殖器结核患者的临床体征、表现进行回顾性分析,为患者实施宫腔镜、B超、血常规、结核菌素试验、γ-干扰素释放试验等检查,观察女性生殖器结核与不孕症之间的相关性。结果经检查可知,初步确诊的患者为12例,占比例26.09%,进一步诊断确诊的患者为34例,占比例为73.91%;女性生殖器结核患者的发病年龄、月经异常现象及病理变化均与不孕症存在着相关性(P<0.05)。结论女性生殖器结核不具有特异性,临床诊断中极易导致误诊现象的出现,女性生殖器结核与不孕症之间存在较为显著的相关性。

IL-6基因单核苷酸多态性与中国汉族人群乙型肝炎易感性的相关性研究

目的 白细胞介素-6（IL-6）在慢性病毒性肝炎发病机制和相关的肝脏疾病中有重要的作用,本文拟通过大样本病例-对照研究以及临床数据分析探讨IL-6单核苷酸多态性与HBV感染易感性的相关性,从而达到能够通过检测机体IL-6基因的表达的水平来预防和治疗HBV感染的目的.方法 选取深圳地区汉族HBV病患者共计848例,对照组894例,抽提基因组DNA,运用TaqMan探针的技术对上述标本的rs1 800 796位点进行基因分型.结果 rs1 800 796位点的单核苷酸多态性与HBV感染的易感性相关P=0.0003,OR=1.43,两者之间的差异具有统计学意义.结论 IL-6rs1800 796位点的单核苷酸多态性与汉族人群HBV感染的易感性相关.

盆腔积液结核特异性IFN-γ酶联免疫斑点检测的研究

目的建立盆腔积液结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点(PEMC Elispot)检测技术,并与相应的外周血检测结果比较。方法以重组结核菌早期分泌抗原6k Da蛋白(ESAT-6)、ESAT-6重组多肽抗原组合(P8.10)及多肽抗原组合(P8.10+Pool B)为抗原,建立盆腔积液结核分枝杆菌特异性IFN-γElispot检测技术(PEMC Elispot)。对46例确诊为结核性盆腔炎病人的盆腔积液进行结核菌特异性IFN-γ水平检测;同时用外周血结核菌特异性IFN-γ水平检测技术对病人相应的外周血进行检测,并用PEMC Elispot检测了30例非结核性盆腔炎病人积液标本。结果 PEMC Elispot技术对46例确诊为结核性盆腔炎病人盆腔积液检测,阳性率为97.8%;PBMC ELlispot检测病人外周血,阳性率为87.0%,经用四格表确切概率法统计,差异有统计学意义(χ2=6.815,P=0.009);PEMC Elispot检测非结核性盆腔炎病人盆腔积液的阳性率为10.0%,显著低于结核性盆腔炎病人盆腔积液阳性率(χ2=60.19,P<0.0001)。结论盆腔积液结核菌特异性IFN-γElispot检测技术与外周血结核杆菌特异性IFN-γElispot检测技术一样在结核性盆腔炎诊断应用中有着较好的敏感性和特异性,可以作为结核性盆腔炎诊断及其鉴别诊断的方法。

颈淋巴结结核患者外周血和组织中T-bet表达的检测

目的探讨颈淋巴结结核患者外周血和组织中T-box基因家族转录因子(T-bet)的表达,并分析在结核病发病中的意义。方法采用实时荧光定量PCR(Realtime-PCR)检测了12例颈淋巴结结核患者和11例健康对照外周血T-bet的表达情况,使用GraphPad Prism 4.0统计软件进行分析,两组间比较采用配对t检验,以P<0.05为差异有统计学意义;同时采用免疫组织化学双染法检测颈淋巴结结核患者淋巴结组织中T-bet的表达情况,计数每个高倍视野中CD4+细胞和CD20+B细胞T-bet阳性细胞的百分率。结果在颈淋巴结结核患者外周血PBMC中T-bet的表达水平为6.07±3.35显著低于健康对照20.12±11.31(t=4.118,P=0.0005);淋巴结核结节中,CD4+细胞T-bet阳性率为65.7%,CD20+B细胞T-bet阳性率为5.0%。结论 T-bet在颈淋巴结结核外周血中低表达,而在淋巴组织中高表达,提示T-bet在颈淋巴结结核免疫发病中起重要的作用。

耐多药结核病检测技术研究进展

耐多药结核病(multi-drug resistance tuberculosis,MDR-TB)是引起结核病治疗失败及结核病患者死亡的重要原因,早期、快速、准确的诊断为其临床管理和治疗赢取宝贵时间,同时也极大程度地避免临床经验性治疗引起的耐药作用。目前,MDR-TB诊断主要包括表型检测和分子基因型检测,本文就相关检测技术的研究进展进行综述。

结核病患者外周血和胸水T细胞中CD161表达差异的研究

目的检测结核病患者外周血(PBMC)和胸水(PFMC)T细胞CD161水平,比较PBMC和PFMC T细胞CD161表达水平的差异,明确结核病人外周及感染部位T细胞CD161表达的差异。方法以流式细胞仪检测51例健康对照者、41例潜伏性结核感染患者、57例肺结核患者PBMC CD3^+CD161^+、CD4^+CD161^+和CD8^+CD161^+细胞的表达水平,比较其在不同人群中的差异;检测21例结核性胸膜炎患者PBMC和PFMC CD3^+CD161^+、CD4^+CD161^+和CD8^+CD161^+细胞的表达水平和差异,比较CD161在外周和感染局部的表达差异。结果利用流式细胞仪检测CD161在PBMC和PFMC中表达,并且分别在T细胞(CD3^+、CD4^+和CD8^+细胞)中表达;结核患者PBMC CD3^+CD161^+、CD4^+CD161^+和CD8^+CD161^+细胞表达均低于健康对照和潜伏感染者;结核性胸膜炎患者PFMC中CD3^+CD161^+和CD4^+CD161^+细胞表达均高于PBMC(P<0.01),但在PFMC中CD8^+CD161^+细胞则高于在PBMC中的表达(P<0.01)。结论 CD161均在PBMC和PFMC中表达,并且CD161能区分结核患者、潜伏感染者以及健康人。另外CD3^+CD161^+和CD4^+CD161^+细胞表达在结核病感染局部增加,结果提示CD161可作为早期诊断结核患者的分子标识。