痰结核杆菌检验方法的应用研究

为研究痰结核杆菌检验的应用价值,本文筛选2018年3月—2019年12月我院收治的疑似肺结核患者104例作为研究对象,按照患者选择的检验方式分为实验组和对照组,对照组52例,实验组52例,对照组进行抗原胶体金法检验,实验组进行痰涂片结核杆菌检验,对比分析2组的阳性检出率数据。结果显示,实验组的阳性检出率为96.15%,对照组的阳性检出率为90.38%,实验组的阳性检出率明显大于对照组,P>0.05,差异无统计学意义。由此可见,在肺结核患者病症诊断中,相较于抗原胶体金法检验,痰涂片结核杆菌检验在临床中的阳性检出率较高,能够更好地进行临床诊断,实际应用效果较好,值得广泛推荐运用。

评价梅毒螺旋体颗粒凝集试验与甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检验中的应用价值

目的:探讨在梅毒检验中使用梅毒螺旋体颗粒凝集试验与甲苯胺红不加热血清试验的临床价值。方法:从2018年6月开始收集研究对象,至2019年6月收集结束,共收集配合本研究的梅毒患者78例,所有患者均证实为梅毒,将病人进行随机编码,随机抽取号码进行分组,研究组39例,为梅毒螺旋体颗粒凝集试验,对照组39例,为甲苯胺红不加热血清试验,比较两组的检测准确率以及对不同时期梅毒的检出率,并评价两组的成本和检测时间。结果:研究组的检测准确率比对照组高(P<0.05),对于早期梅毒和一期梅毒的研究组检出率高于对照组(P<0.05),对二期和三期的检出率两组没有差异(P>0.05),研究组的成本比对照组高(P<0.05),检测时间短于对照组(P<0.05)。结论:在梅毒检验中使用梅毒螺旋体颗粒凝集试验的准确率较高,对早期梅毒的检出率较高,检测时间短,但是成本较高,在临床检测诊断中,需要根据实际情况进行选择,甲苯胺红可以作为初筛方法,梅毒螺旋体颗粒凝集可以进行确证,以保证诊断的准确性。

embB基因突变与乙胺丁醇药敏表型及耐多药关系的研究

目的研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)emb B306位点及其他突变位点与乙胺丁醇(ethambutol,EMB)的耐药表型及耐多药(multidrug resistant,MDR)的关系;分析emb B基因突变与EMB药敏表型及MDR的关系。方法对临床分离的MTB采用BD MGIT 960 SIRE试剂比例法进行药敏试验,取48株EMB耐药、46株EMB敏感但耐其他药及7株四药均敏感MTB提取核酸并扩增emb B基因全序列,对扩增产物进行测序分析emb B基因序列,与H37Rv标准株序列比对,分析emb B基因各突变位点、形式及频率。结果 101株MTB发现emb B基因序列上有17个不同位点突变形式。53株MTB在emb B基因序列上发生突变,其中46株为EMB耐药,7株为EMB敏感;emb B基因野生型的MTB有48株,其中2株为EMB耐药,46株为EMB敏感;emb B突变型与emb B野生型的MTB之间EMB耐药率有显著性差异(c2=68.95,P<0.01)。101株MTB中MDR有51株,其中有42株发生emb B突变,9株为emb B基因野生型,emb B基因突变率在MDR和非MDR之间有显著性差异(c2=36.9,P<0.01)。结论 emb B306位点与EMB耐药及MDR中度相关,emb B基因突变与EMB耐药及耐多药结核菌(multidrug resistant-Mycobacterium tuberculosis,MDR-TB)高度相关,emb B基因突变可作为MDR-TB的检测分子标记物,指导临床用药。

HLA-B27阳性类风湿关节炎和强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群分析

目的探讨人类白细胞抗原B27(HLA-B27)阳性类风湿关节炎(RA)和强直性脊柱炎(AS)患者外周血T细胞亚群变化特点及其临床意义。方法应用流式细胞术分析受试患者及健康者CD4+T、CD8+T细胞百分率和CD4+T/CD8+T比值。结果 HLA-B27阳性RA患者CD4+T和CD8+T细胞百分率低于健康对照组,CD4+T/CD8+T比值高于健康对照组。HLA-B27阳性Ⅰ、Ⅱ级AS患者CD4+T细胞百分率和CD4+T/CD8+T比值低于健康对照组,CD8+T细胞百分率高于健康对照组;HLA-B27阳性Ⅲ级AS患者3项指标与健康对照组差异无统计学意义。HLA-B27阳性AS各级患者CD8+T细胞百分率和Ⅲ级患者CD4+T细胞百分率高于HLA-B27阳性RA患者,各级患者CD4+T/CD8+T比值低于HLA-B27阳性RA患者。结论外周免疫功能异常可能是HLA-B27阳性RA和AS发病机制之一,CD4+T/CD8+T比值有助于两者的鉴别诊断。

习惯性流产患者绒毛和蜕膜中Toll样受体4与Treg/T_H17细胞免疫平衡的相关性研究

目的探讨习惯性流产(RSA)患者绒毛和蜕膜中Toll样受体4(TLR4)与Treg/TH17细胞免疫平衡的关系。方法收集32例RSA患者和32例健康对照组的绒毛和蜕膜,用实时荧光定量PCR法检测其TLR4 mRNA表达水平,用流式细胞术检测Treg和TH17细胞数量,分析TLR4 mRNA与Treg/TH17细胞间的相关性。结果 RSA患者绒毛和蜕膜中TLR4 mRNA的相对表达水平分别为2.6±1.1、2.1±1.1,明显低于健康对照组(7.4±2.3、6.8±1.3),差异有统计学意义(t分别为10.650、15.613,P均<0.01)。Treg细胞百分率分别为(7.75±1.83)%、(7.24±1.71)%,明显低于健康对照组(12.18±2.65)%、(11.64±3.23)%,差异有统计学意义(t分别为7.781、6.810,P均<0.01);TH17细胞百分率分别为(7.78±2.13)%、(8.13±2.11)%,明显高于健康对照组(3.85±1.53)%、(4.11±1.52)%,差异有统计学意义(t分别为8.477、8.13,P均<0.01)。RSA患者绒毛和蜕膜中TLR4 mRNA水平均与Treg细胞数量呈正相关(r分别为0.925、0.948,P均<0.01);RSA患者绒毛和蜕膜中TLR4 mRNA水平均与TH17细胞数量呈负相关(r分别为-0.954、-0.939,P均<0.01)。结论 RSA患者绒毛和蜕膜中TLR4低表达与Treg/TH17免疫失衡有关,可能参与RSA的发生。

习惯性流产患者绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡的检测及其临床意义

目的探讨绒毛和蜕膜中调节性T细胞(Treg)/Th17免疫失衡在习惯性流产(RSA)患者免疫发病机制中的作用。方法收集RSA患者和自愿终止妊娠的早孕妇女(正常对照组)的绒毛和蜕膜,采用流式细胞术检测其中Treg和Th17细胞数量,采用RT-PCR检测其中叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)的mRNA水平;收集RSA患者和正常对照组的外周血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-10、IL-17A和IL-17F的水平;统计分析Treg细胞和其相关细胞因子、Th17细胞和其相关细胞因子之间的相关性。结果和正常对照组比较,RSA患者绒毛和蜕膜中Th17细胞明显增多(均P<0.01),Treg细胞明显减少(均P<0.01),RORγt的mRNA水平明显升高(均P<0.01),Foxp3的mRNA水平明显降低(均P<0.01);RSA患者外周血中IL-17A和IL-17F水平明显升高(均P<0.01),TGF-β和IL-10水平明显降低(均P<0.01);RSA患者和正常对照组Treg细胞数量和TGF-β及IL-10水平、Th17细胞数量和IL-17A及IL-17F水平均呈正相关(均P<0.01)。结论绒毛和蜕膜中Treg/Th17免疫失衡可能与RSA的免疫发病机制有关。

干化学法和沉渣镜检法检测尿液白细胞结果分析

目的分析尿液干化学法与尿沉渣镜检法白细胞检验结果的相关性,探讨两种方法联合应用的临床价值。方法采用干化学法和尿沉渣镜检法检测患者尿液白细胞,对两种方法的检测结果进行对比分析。结果尿沉渣镜检法白细胞阳性率略高于干化学法,但差异无统计学意义(P>0.05),两种方法同时阴性、阳性结果之间互有交叉现象。结论联合应用干化学法和沉渣镜检法测定尿液白细胞有利于临床疾病的诊断与治疗。

CD30在强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群的表达及意义

目的研究CD30在强直性脊柱炎(AS)患者外周血T细胞亚群的表达及意义,分析AS患者免疫学发病机制。方法健康对照组24例,患者组CT检查AS患者骶髂关节并分为Ⅰ(11例)、Ⅱ(12例)和Ⅲ级(10例)。采用ECD标记抗CD3单抗,PE-Cy5标记抗CD4、CD8单抗以及FITC标记抗CD30单抗作三色流式细胞术;CD3/CD4、CD3/CD8设门,分析CD30在AS患者外周血CD4+T、CD8+T细胞的表达水平。结果健康对照比较,CD4+CD30-T细胞在Ⅰ、Ⅱ级AS患者中均明显降低(P<0.05),在Ⅲ级AS患者中则明显升高(P<0.05);CD8+CD30-T细胞在Ⅱ级AS患者明显升高(P<0.05);CD8+CD30+T细胞在AS各级患者中均明显升高(P<0.05)。结论 AS各级患者外周血T细胞亚群比例失衡与患者外周免疫功能紊乱及疾病进程有关。

正常孕妇妊娠各期甲状腺激素参考范围的建立及其临床意义

目的建立本地区正常孕妇早、中、晚孕期甲状腺激素的参考值范围，探讨其变化规律及临床意义。方法采用罗氏E601电化学发光仪测定本地区单胎妊娠健康妇女早、中、晚孕期及年龄匹配非妊娠妇女的甲状腺激素水平并建立各自的参考范围。其中孕早期448例，孕中期451例，孕晚期428例，非妊娠妇女150例。结果早、中、晚孕妇女及非妊娠妇女的甲状腺激素水平均呈偏态分布，以中位数（M）及双侧限值（P2．5～P97．5）表示其参考范围。TSH在早[1．10（0．23～3．58）]、中[2．07（0．13～3．96）]、晚孕期[2．62（1．08～3．62）]逐渐上升，各期两两比较差异有统计学意义（P〈0．017），晚孕期略低于非妊娠妇女[2．63（1．00～5．14）】但差异无统计学意义（P〉0．05）。FT3和FT4在早[4．80（4．25～6．23）；17．56（11．65－22．16）]、中[4．45（3．84～5．18）；14．16（9．49～20．14）]、晚孕期[4．14（3．98～4．45）；12．38（10．13～15．88）]逐渐降低，各期两两比饺差异有统计学意义（P〈0．017），早孕期低于非妊娠妇女[5．01（4．02~6．12）；18．71（14．35－21．69）]且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论正常孕妇的甲状腺激素水平明显不同非妊娠妇女，早、中、晚孕期之间也存在显著差异，建立正常孕妇妊娠各期甲状腺激素参考范围将有助于妊娠期甲状腺功能紊乱的临床诊疗。

血清胰岛素样生长因子-1及其受体在乳腺癌患者中的检测价值

目的探讨血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其IGF-1受体(IGF-1R)在乳腺癌患者中的检测价值。方法选取2017年3月至2019年3月200例乳腺癌患者作为观察组,另选取同期200例健康女性作为对照组。比较两组血清IGF-1、IGF-1R及胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平,并比较观察组中不同疾病分期、淋巴结转移情况及分化程度者的IGF-1、IGF-1R及IGFBP-3水平,采用Spearman秩相关分析检测指标与疾病分期、淋巴结转移情况及分化程度的关系。结果观察组血清IGF-1及IGF-1R水平均明显高于对照组,血清IGFBP-3水平明显低于对照组,观察组中不同疾病分期、淋巴结转移情况及分化程度者IGF-1、IGF-1R及IGFBP-3水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析显示,血清IGF-1及IGF-1R与乳腺癌疾病分期及淋巴结转移情况均呈正相关,与分化程度呈负相关;血清IGFBP-3与乳腺癌疾病分期及淋巴结转移情况均呈负相关,与分化程度呈正相关。结论血清IGF-1及IGF-1R在乳腺癌患者中的检测价值较高,对于乳腺癌的疾病分期、淋巴结转移情况及分化程度均有一定检测意义。

尘螨疫苗免疫治疗对过敏性哮喘小鼠气道抗铜绿假单胞菌感染能力的影响

目的探讨尘螨疫苗免疫治疗对过敏性哮喘小鼠气道抗铜绿假单胞菌感染能力的影响。方法取24只BALB/c小鼠随机分为4组(非哮喘组、非哮喘感染组、哮喘感染组和哮喘感染治疗组),每组6只。建立粉尘螨过敏性哮喘小鼠模型,采用尘螨疫苗进行过敏原特异性免疫治疗,并经鼻感染铜绿假单胞菌。取小鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)分析小鼠肺部炎症状况;取小鼠肺组织匀浆进行铜绿假单胞菌选择性培养,并分析小鼠肺组织及BALF沉渣细菌载量;免疫荧光组织化学染色分析小鼠气道上皮细胞β防御素3(MBD-3)的表达水平,聚合酶链反应检测MBD-3的mRNA水平,并对以上数据进行统计学处理。结果哮喘感染治疗组小鼠肺部炎性浸润比哮喘感染组轻,哮喘感染治疗组小鼠BALF中的炎性细胞低于哮喘感染组(P<0.05)。哮喘感染治疗组小鼠肺组织及BALF细菌菌落数低于哮喘感染组(P<0.05)。哮喘感染组MBD-3表达水平低于非哮喘感染组和哮喘感染治疗组(P<0.05),而哮喘感染治疗组和非哮喘感染组MBD-3表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论尘螨疫苗免疫治疗可能通过上调MBD-3的表达来降低哮喘小鼠气道铜绿假单胞菌感染的严重程度,从而增强过敏性哮喘小鼠气道抗铜绿假单胞菌感染能力。

Ⅱ型登革病毒非结构蛋白1特异性T细胞系的构建和特征分析

目的构建Ⅱ型登革病毒(DENV2)非结构蛋白1(NS1)特异性T细胞系,分析其抗原特异性、表型特征和细胞因子分泌能力。方法 NS1蛋白与弗氏佐剂乳化后腹腔注射免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞分离T细胞,加入丝裂霉素C预处理的同系小鼠单核细胞和NS1蛋白,体外循环间歇刺激和有限稀释培养获得DENV2NS1特异性T细胞,MTT法分析其抗原特异性,流式细胞术分析其表型特征,ELISA法分析其细胞因子分泌能力。结果共获得9株DENV2NS1抗原特异性的T细胞,其纯度和活细胞率均大于95%;与胎牛血清刺激培养比较,该抗原特异性T细胞在NS1特异性刺激和植物血凝素非特异性刺激下均明显增殖(t=6.2780,P<0.05;t=5.1176,P<0.05),而在DENV2E非特异性刺激下无明显变化;与同系小鼠T细胞比较,九株NS1特异性T细胞均高表达死亡配体分子FasL(t=30.3652,P<0.05);培养6h和12h时,NS1特异性T细胞培养上清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TNF-α浓度均明显升高;其中IFN-γ浓度升高最显著,6h时达到峰值[(348.2±53.4)pg/ml],TNF-α浓度在培养24h时仍维持在较高水平[(23.2±1.2)pg/ml],而同系小鼠T细胞培养上清中上述细胞因子浓度均无明显变化。结论成功构建了DENV2NS1特异性T细胞系,为进一步研究NS1蛋白介导的细胞免疫应答在登革病毒所致疾病中的作用奠定了一定基础。