重组人巨细胞病毒(HCMV)优势表位嵌合抗原的构建表达以及捕获法检测IgM抗体

通过计算机软件分析选择巨细胞病毒优势抗原表位,用聚合酶链式反应(PCR)扩增优势表位基因,构建了巨细胞病毒多优势表位嵌合抗原表达载体p4T-UL32-UL44-UL80a-UL83,转化宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,GST亲和层析法获得高纯度嵌合抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记嵌合抗原,并构建捕获法检测血清中的抗HCMVIgM抗体。结果表达的优势表位嵌合抗原具有很好的抗原性,用其建立的捕获法检测确诊的30份阳性和63份儿童阴性血,阳性检出率和阴性检出率都是100%说明用嵌合抗原构建的捕获法检测血清中抗HCMVIgM抗体具有更高的灵敏度和检出正确率,其检测水平已经达到国外的同类产品水平。

胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺与胃癌BGC-823细胞系P16、P21蛋白的表达研究

目的:探讨丙谷胺(PGM)抑制胃癌BGC-823细胞增殖及胃泌素的促增殖作用,通过P16及P21蛋白表达的变化,为内分泌途径治疗胃癌提供理论依据,并提供内分泌途径治疗癌症疗效的指标。方法:通过体外细胞培养及对癌细胞进行分组实验研究,应用免疫荧光技术及Northern blot方法测定癌细胞内P16及P21蛋白的表达情况。结果:P16蛋白的表达量随PGM的抑癌作用而升高,两者呈负相关;P21蛋白的表达量与PGM的抑癌作用无明显相关。结论:丙谷胺作为胃癌的一种内分泌治疗手段,可采用P16的表达情况作为其疗效的一个指标。