IFN-γ促进树突状细胞分化成熟的实验研究

目的研究IFN-γ对人外周血单核细胞源树突状细胞(MoDC)分化成熟的影响。方法从正常健康人外周血中分离出单核细胞(Mo),然后将Mo与GM-CSF,IL-4体外培养7d,并于培养第5d加入不同浓度的IFN-γ(1×106U/L和2×106U/L)共同培养,用流式细胞术检测DC膜表面CD83和MHC-DR表达,用MTT法测定DC刺激同种异体T细胞增殖的能力,用ELISA检测DC培养上清中IL-12p40+p70的含量。结果两种浓度的IFN-γ均可显著刺激DC表达CD83和MHC-DR,分泌IL-12p40+p70,增强DC刺激同种异体T细胞增殖的能力,尤以IFN-γ1×106U/L作用更强。结论IFN-γ可以有效促进MoDC的功能成熟。

世界11个不同人群MICA基因遗传多态性研究及聚类分析

目的探讨MICA基N在世界11个不同人群的遗传多态性分布特征，并绘制系统发生树。方法应用11个人群MICA基因频率数据，采用PHYLIP软件，计算不同群体的遗传距离，绘制遗传树，并进行聚类分析。结果MICA＊001基因主要分布在欧洲和美洲地区，MICA＊002基因在亚洲人及高加索人中均有检出，但在黑人和印第安人基因频率相对较高，MICA＊008基因频率在高加索人种中有较高的分布；中国、泰国、日本和韩国等亚洲人彼此遗传关系相对较近聚为一大类；美国、英国的高加索人种聚为一类；中国的浙江和湖北汉族人遗传距离最近。结论MICA基因在不同人种、不同地区人群分布不同，具有高度遗传多态性。建立稳定的MICA基因技术检测平台有助于开展中国人群MICA基因多态性研究，为人类学、MICA基因和疾病相美性和器官夥植等研究提棋黄倍晕泰者数据．

前S1蛋白阳性慢性乙型肝炎患者外周血中树突状细胞功能的研究

目的研究前S1(preS1)蛋白阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中树突状细胞(DC)的免疫功能。方法分别从正常健康人(10例,对照组1)、preS1蛋白阴性CHB患者(10例,对照组2)和preS1蛋白阳性CHB患者(10例,实验组)外周血中分离出单核细胞(Mo),然后将Mo与GM-CSF,IL-4体外培养12d,并于培养第6d加入IFN-γ共同培养,用MTT法测定DC刺激同种异体T细胞增殖的能力,用ELISA检测DC培养上清中TNF-α和IL-12p40+p70的含量,并与对照组比较。结果preS1蛋白阳性CHB患者组DC刺激同种异体T细胞增殖的能力,培养上清中TNF-α和IL-12p40+p70的含量,均明显低于正常健康对照组(P<0.01);而与preS1蛋白阴性对照组相比则无明显差异(P>0.05)。结论CHB患者外周血DC的免疫功能低下;在CHB患者HBV持续感染时期,其外周血DC的功能状态与PreS1阳性与否无直接相关性。

中国人群HLA-DRB1*1454等位基因和HLA-DRB1第3外显子鉴定意义(英文)

目的:在中国人群中鉴定人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)DRB1*1454等位基因,分析供受者HLA-DRB1第3外显子DNA序列信息对器官移植、细胞移植及人类遗传学研究的重要现实意义。方法:应用聚合酶链反应-直接测序分型方法对58例等待造血干细胞移植供受者进行人类白细胞抗原测序分型,1268例广东地区随机健康供者采用聚合酶链式反应-序列特异寡核苷酸探针反向杂交法进行HLA-DRB1中高分辨基因分型,部分模棱两可结果采用聚合酶链式反应-序列特异引物PCR-SSPHLA-DRB*14高分辨方法分型法。结果:在1268例广东地区随机健康人群中检出HLA-DRB1*1403,1406,1410,1412,1418,1425和1454等位基因,HLA-DRB*1401/1434/1454等位基因模棱两可结果的8例样本被确认为HLA-DRB1*1454等位基因,DRB1*1454等位基因可能是广东人群最为常见的HLA-DRB1*14基因。中国人群HLA-DRB1*14第3外显子存在多态性。结论:中国人群HLA-DRB1*1454等位基因确认了DRB1等位基因第3外显子多态性的存在,进一步明确了开展中国汉族人群及少数民族HLA-DRB1第3外显子检测的意义。

不同相对分子质量mPEG-SPA修饰血小板CD42a效果差异分析

目的观察mPEG-SPA对血小板抗原的修饰效果,并比较不同相对分子质量的mPEG-SPA修饰效果有无差别。方法分别用相对分子质量为5000、20000的mPEG-SPA对血小板CD42a进行化学修饰;流式法检测修饰前后CD42a荧光强度变化;模拟CD42a三维空间结构,分析赖氨酸区域在CD42a的分布情况。结果经5000和20000的mPEG-SPA修饰后,CD42a荧光强度与对照组相比明显降低,降低比例分别为85.54%和88.65%。CD42a分子表面表达多个赖氨酸区域。结论5000和20000的mPEG-SPA对血小板CD42a均具有良好的化学修饰作用,20000的mPEG-SPA修饰效果优于5000mPEG-SPA的修饰效果。

中国南北方汉族急性淋巴细胞白血病患者HLA基因分型特征

目的研究中国南北方汉族急性淋巴细胞白血病（ALL）患者人群中人类白细胞抗原（HLA）-A，B，DRB1等位基因的分布特征.方法根据11个南方省区556名南方汉族和18个北方省区644名北方汉族ALL患者的HLA—A，B，DRB1表型数据，采用最大似然性方法分别计算两个群体的HLA—A，B，DRB1等位基因和单倍型频率并采用卡方检验方法比较其分布特征.结果南北方汉族ALL患者群体中，A＊02，A＊11，A＊24，A＊33，B＊13，B＊46，B＊51，B＊60，B＊62，DRB1＊04，DRB1＊08，DRB1＊09，DRB1＊11，DRB1＊12，DRB1＊14和DRB1＊15均比较常见，另外B＊58，B＊62和B＊75仅在南方群体中较高，而A＊30，B＊35，B＊61和DRB1＊07则仅常见于北方患者，7个A，12个B和5个DRB1等位基因的分布存在显著性差异.结论中国南北方汉族ALL患者人群HLA—A，B，DRB1等位基因的分布有其自身特征，此研究数据可作为ALL患者群体的HLA相关研究和应用的参考数据.

地中海贫血患者找到人类白细胞抗原A-B-DR单倍型及抗原全相合供者的可能性

背景:选择适合的人类白细胞抗原匹配供者是实施造血干细胞移植治疗的关键,不同人种、地区和疾病人群的人类白细胞抗原与单倍型频率分布是评估地中海贫血患者选择适合供者的重要遗传学依据。目的:分析地中海贫血患者人类白细胞抗原A-B-DRB1单倍型和表型频率分布格局,估算其与骨髓库相合供者相配的概率。设计:病例-对照分析。对象:患者组为2000-06/2006-12广东地市级以上13家医院诊断为地中海贫血的108例患者,广东籍,彼此无血缘关系。正常对照组为2000-08/2006-12中华骨髓库招募的5352名广东籍健康供者,与患者无血缘关系。方法:应用最大似然性算法计算两组人类白细胞抗原A,B,DRB1单倍型及表型频率分布。根据人类白细胞抗原单倍型遗传特征,某一个体人类白细胞抗原A,B,DRB1表型频率等于相应的基因型频率之和。在由n个供者组成的供者群体找到至少1例与患者表型全相同供者的概率P,应用公式P=1-(1-Df)n计算,Df为供者表型频率。结果:患者组和对照组最常见单倍型和表型频率分布格局不同。正常对照组常见的单倍型为A2-B46-DR9,A33-B58-DR17,A11-B75-DR12,A11-B13-DR15和A33-B47-DR13;患者组常见的单倍型为A2-B46-DR9,A33-B58-DR17,A2-B46-DR14,A11-B60-DR12和A11-B75-DR12。正常对照组常见的表型频率分布情况为A2,33;B46,58;DR9,17,A2,11;B46,75;DR9,12,A11,33;B58,75;DR12,17,A2,2;B46,46;DR9,9和A2,11;B13,46;DR9,15;患者组常见的表型为A2,33;B46,58;DR9,17,A2,2;B46,46;DR9,9,A2,2;B46,46;DR9,14,A2,11;B46,60;DR9,12和A2,11;B46,75;DR9,15。两组之间相匹配的表型有19种,表型匹配概率为0.44%(19/4282)。人类白细胞抗原A24-B51-DR8,A3-B38-DR7,A24-B50-DR12,A3-B38-DR4,A24-B51-DR8和A24-B60-DR7等34条单倍型及A2,33;B46,58;DR9,17,A2,2;B46,46;DR9,9和A2,11;B46,75;DR9,15等67种表型,其频率在正常对照组有不同程度的降低,携带有这些单倍型或表型患者找到人类白细胞抗原单倍型相合或全相合供者的概率降低。结论:地中海贫血患者人类白细胞抗原A-B-DR单倍型频率分布呈高度遗传多态性,患者找到人类白细胞抗原全相合供者的概率取决于供者群体人类白细胞抗原表型频率。

抗-D抗原决定簇互补区多肽遮蔽RhD抗原的效果

目的建立抗-D抗原决定簇互补区(CDRs)多肽遮蔽Rh D抗原的方法,并对遮蔽效果进行评价。方法根据抗-D CDRs氨基酸残基顺序合成多肽,使用流式细胞术检测红细胞表面Rh D抗原在多肽遮蔽前后的荧光强度;荧光显微镜下观察多肽与Rh D抗原的结合情况;使用在线分析工具对有效多肽进行理化性质及二级结构分析。结果不同多肽对Rh D抗原的遮蔽效果有较大差异,其中3号多肽遮蔽效果较理想,荧光强度显著降低。结论抗-D CDRs多肽可有效遮蔽Rh D抗原。

猪苓多糖对慢性乙型肝炎患者单核细胞源树突状细胞的影响初探

目的探讨猪苓多糖(PPS)对慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞源树突状细胞(MoDC)的影响。方法从CHB患者外周血中分离出单核细胞(Mo),然后将Mo与GM-CSF、IL-4体外培养9天,并于培养第6天加入PPS共同培养,在倒置显微镜下观察DC的形态,用MTT法测定DC刺激同种异体T细胞增殖的能力,用ELISA检测DC培养上清中IL-12p40+p70的含量,并与对照组比较。结果PPS可刺激DC分泌IL-12p40+p70,增强DC刺激同种异体T细胞增殖的能力。结论PPS可以增强CHB患者外周血MoDC的免疫功能,提示其可能通过调节DC的功能参与免疫应答。

体外诱导培养健康成人外周血单核细胞源树突状细胞

目的建立在体外从健康成人外周血单核细胞(Mo)诱导培养成熟的树突状细胞(DC)的方法。方法采用密度梯度离心法分离健康成人外周血中的单个核细胞(PBMC),再以黏附法分离出Mo,加入重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白细胞介素-4(rhIL-4)体外培养12天,并于培养第6天加入重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)共同培养,于倒置显微镜下观察细胞的形态,以流式细胞仪检测培养6、9、12天DC表面CD1a、CD83、CD86和MHC-DR的表达水平,用MTT法测定DC刺激同种异体T细胞增殖的能力,进行比较分析。结果Mo经rhGM-CSF+rhIL-4诱导培养6 d后,细胞成簇,表型为CD1a 53.2%、CD83 13.6%、CD86 65.5%、MHC-DR 75.4%;TNF-α诱导后,即培养第9 d,细胞表型为CD1a 62.1%、CD83 73.5%、CD86 92.3%、MHC-DR 98.4%,激发初始T细胞增殖的能力最强。结论rhGM-CSF+rhIL-4诱导Mo 6 d,可获得大量不成熟的DC,该体系有利于DC扩增;加入TNF-α,培养第9 d,DC成熟度最高,适合于临床免疫治疗。

应用SBT直接测序分型法研究中国南方汉族人群HLA五个基因座单倍型

目的 研究中国南方汉族人群HLA—A、B、Cw、DRB1、DQB1等位基因多态性及单倍型的分布特征。方法 应用聚合酶链反应-直接测序分型（polymerase chain reaction sequence-based typing，PCR—SBT）法对186名中国南方汉族健康人群HLA—A、B、Cw、DRB1、DQB1进行基因分型。结果 检出的HLA—A、B、Cw、DRB1、DQB1等位基因分别有28、49、24、29、20种。经统计分析A＊0207-B＊4601（10．81％），A＊3303-B＊5801（6．14％），B＊4601-DRB1＊0901（6．22％），B＊4001＊DRB1＊0901（3．78％），DRB1＊0901-DQB1＊0303（12．16％）和DRB1＊1202-DQB1＊0301（8．38％）单倍型呈强连锁不平衡单倍型（RLF≥0．5，χ^2〉3．84，P〈0．05）；A＊0207B＊4601Cw＊0102（10．75％），A＊3303-B＊5801-Cw＊0302（5．14%），A＊0207-B＊4601-DR＊0901（5．07％），A＊3303-B＊5801-DRB1＊0301（2．96％），A＊0207-B＊4601-Cw＊0102-DRB1＊0901-DQB1＊0303（4．87％）和A＊1101-B＊1301-Cw＊0304-DRB1＊1501-DQB1＊0601（2．43％）单倍型分别是中国南方汉族人群常见单倍型。结论 中国南方汉族人群HLA5个基因座单倍型分布具有高度的遗传多态性且有其自身分布特点。本研究获得的较完整的HLA5个基因座单倍型分布数据，将为人类学、HLA疾病相关性和器官移植等研究提供遗传学参考数据。

人类白细胞抗原及单倍型与中国北方汉族急性非淋巴细胞白血病相关性研究

急性非淋巴细胞白血病（AML）是我国白血病分类构成中最常见的一类，其疾病的发生、发展机制目前尚不十分清晰，可能与遗传因素、外界环境因素和自身免疫因素等有关。人类白细胞抗原（HLA）与肿瘤的免疫监视作用密切相关，H／A与白血病相关性研究国内外文献均有报道，但结论不一。

造血干细胞移植受-供者HLA抗原识别部位的核苷酸匹配研究

目的研究中国人群等待造血干细胞移植受一供者人类白细胞抗原（human leukocyte antigens，HLA）-A、-B、-Cw、-DRB1、-DQB15个位点的等位基因及核苷酸匹配情况，从单核苷酸水平探讨最佳供选择方案。方法采用聚合酶链反应测序分型法（polymerase chain reaction-sequence-based typing，PCR-SBT），对537对中国人群等待造血干细胞移植受-供者HLA-A、-B、-Cw、-DRB1、-DQB1位点的等位基因进行序列分型，应用BLAST工具分析受-供者HLA核苷酸差异。结果537对受-供者中HLA—A、-B、-Cw、-DRB1、-DQB1五位点核苷酸完全匹配占16．20％，单个等位基因错配的受-供者对分别占8．38％，0．74％，12．29％，2．42％和2．79％，两个或两个以上等位基因错配比率占42.65％。检出A＊02：01-A＊02：06，A＊02：06-A＊02：07，Cw＊03：04-Cw＊15：02，Cw＊03：03-Cw＊04：01，Cw＊03：04-Cw＊14：02，Cw＊03：03-Cw＊08：01，DRB1＊04：03：01-DRB1＊04：05不容许错配等位基因对。两对受-供者B＊07：05：01-B＊07：06，Cw＊07：01：01-Cw＊07：06抗原识别区外核苷酸错配。结论在造血干细胞移植选择HLA错配的无关供者时注意受-供核苷酸匹配差异，对HLA抗原识别区内的核苷酸匹配差异和抗原识别区外的核苷酸匹配差异应当加以区别。本研究结果为优化供者选择顺序提供科学参考数据。

529例中国汉族健康人群HLA-DQB1基因型遗传特征研究

目的探讨中国汉族健康人群HLA—DQBI基因型遗传特征。方法应用聚合酶链反应一测序分型（polymerase chain reaction sequenc}based typing，PCR—SBT）法对529例中国汉族健康人群HLA—DQBI位点进行基因测序分型。结果在529例中国汉族健康人群中，共检出18种等位基因，常见的等位基因依次是DQB】＊03：01（23．16％），DQBl＊03：03（15．88％），DQBl＊06：01（11．63％）和DQBI＊05：02（11．15％）。检出的HLA—DQBj基因型有84种，最常见的基因型依次是DQBj＊03：0J—DQBI＊。3：03（9．64％），DQBl＊03：0j—DQBI＊06：01（6．99％）和DQBI＊03：0I-DQBI＊03：01（4．54％），检出1例罕见基因型HLA—DQBj＊03：0I—DQB1＊06：20（0．19％）。检出12种模棱两可基因型组合。结论中国健康汉族人群HLA—DQBj基因型遗传较丰富，且有其自身遗传特点。HLA—DQBJ基因模棱两可组合结果应该引起注意并加以区分。

血小板经不同活性基团mPEG修饰后功能变化的研究

目的:观察血小板经不同mPEG修饰后功能变化情况,并分析其原因。方法:分别用mPEG-BTC、mPEG-SPA对血小板进行化学修饰;流式法检测修饰前后血小板CD62P荧光强度变化;并对血小板的聚集、黏附及释放功能进行检测。结果:经mPEG-BTC、mPEG-SPA修饰后,血小板CD62P表达率由修饰前的(12.77±2.87)%分别降至0和(4.12±1.28)%;聚集能力由修饰前的(1.43±0.74)%分别升至(3.86±1.21)%和(3.84±1.12)%;黏附能力由修饰前的(30.2±5.59)%分别升至(45.5±2.72)%和(45.2±3.99)%;而血小板Ca2+释放能力修饰前后差异无统计学意义。结论:使用mPEG-SPA对血小板进行化学修饰可影响血小板的功能,是一种较为理想的修饰剂。

常染色体短串联重复序列基因座复合扩增等位基因丢失现象的研究

目的探讨常染色体短串联重复序列（STR）基因座复合扩增等位基因丢失现象的特征和原因，以及亲子鉴定中STR基因座等位基因疑似突变的确认策略。方法选择2017年1月至6月，于深圳市血液中心接受三联体亲子鉴定的3个家庭的9例家庭成员为研究对象。研究对象纳入标准：STR基因座等位基因初检结果不符合孟德尔遗传规律，疑为STR基因座等位基因丢失者。采用美国ABI公司生产的GlobalFiler Express试剂盒对受试者血斑片样本的21个常染色体STR基因座等位基因进行分型。采用美国Promega公司生产的PowerPlex 21复合扩增系统对受试者血斑片样本的STR等位基因分型结果进行验证。采用PCR-直接测序（SBT）法，检测受试者DNA样本人类白细胞抗原（HLA） -A/-B/-C/-DR/-DQB1基因座等位基因，并且对受试者HLA基因座单倍型进行分型，作为个体识别的补充验证。本研究所遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》，并且与受试者或其监护人签订知情同意书。结果①本研究3个家庭的三联体亲子鉴定中，6例受试者丢失的等位基因分别发生在STR的3个基因座CSF1PO、D1S165和TH01，并且突变步数均不相同。上述丢失的等位基因，既可能为父源性，亦可能为母源性。②家庭1中，对母亲和孩子的CSF1PO基因座等位基因分型的初检结果显示，等位基因均为纯合子；验证结果显示，等位基因均为杂合子；二者的CSF1PO基因座等位基因初检结果均丢失等位基因10。③家庭2中，对父亲和孩子的D1S1656基因座等位基因分型的初检结果显示，等位基因均为纯合子；验证结果显示，等位基因均为杂合子；二者的D1S1656基因座等位基因初检结果均丢失等位基因16。④家庭3中，对母亲和孩子的TH01基因座等位基因分型的初检结果显示，等位基因均为纯合子；验证结果显示，等位基因均为杂合子；二者的TH01基因座等位基因初检结果均丢失等位基因9。⑤于3个家庭的9例受试者DNA标本中，共检出12种HLA-A/-B/-C/-DRB1/-DQB1基因座单倍型，并且HLA基因座单倍型遗传方式符合孟德尔遗传规律。结论对于疑似存在STR等位基因突变的STR基因座复合扩增中，采取单一的检测方法，可能存在漏检等位基因的风险，采用不同试剂盒进行验证其等位基因突变的真实性，能获得更加可靠的鉴定结果。

2000-2006年中华骨髓库等待造血干细胞移植白血病患者的人口学及临床分布特征

目的研究2000--2006年中华骨髓库中等待造血干细胞移植的白血病患者的分布特征和规律，为白血病的预防、干预提供科学依据。方法采用MicrosoftSQL2005数据库操作平台对3708例中国籍汉族白血病患者数据，分组计算患者年龄、性别、地区等分布曲线，并采用x2检验方法比较其分布差异。结果2000--2006年间，中华骨髓库中3708例白血病患者，年龄范围7个月至69岁，中位年龄为24．5岁，标准差为±6．7岁；男女患者总体比值1．95：1（2451／1257）；慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）患者1435例，急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）患者1202例，急性非淋巴细胞白血病（acute myeloid leukemia，AML）患者1066例，慢性淋巴细胞白血病（chronicly mphoblastic leukemia，CLL）患者5例，以CML最为多见；白血病患者的分布高峰值在15-岁至30～岁年龄组，15～岁年龄组542例，20-岁年龄组559例，25～岁年龄组514例，30一岁年龄组522例；20～岁以下年龄组（儿童组），其中ALL占49．36％（613／1242），AML占27．78％（245／1242），CML占22．78％（283／1242），CLL占0．08％（1／1242），以ALL患者构成比居多；白血病患者在我国30个地区的分布构成不均一，最低0例，最高494例，中位数101例。结论2000--2006年间，中华骨髓库中等待造血干细胞移植的白血病患者构成以儿童和青少年为主，男性高于女性，儿童白血病分类以ALL为主，应加强这一群体的健康教育和白血病防治工作。等待造血干细胞移植的白血病患者在各地区分布不均一，江苏、广东、浙江和山东地区患者有较高的分布格局。

中国南方汉族急性淋巴细胞白血病患者572例的HLA基因和单倍型分析

目的研究HLA—A、B、DRB1基因和单倍型与中国南方汉族急性淋巴细胞白血病（ALL）的疾病相关性。方法应用最大似然性方法分别计算南方汉族ALL患者组572例和5645名南方汉族健康供者HLA—A、B、DRB1基因和单倍型频率，采用X^2检验方法比较其分布差异。结果ALL组HLA—A33、B58和DRB1^＊17基因频率均低于对照组[HLA—A33（7．15％比93％，OR=0．73，P〈0．05）、B58（5．93％比8．75％，OR=0．64，P〈0．05）和DRB1^＊17（5．15％比6．30％，OR=0．82，P〈0．05）]；A3、B51和DRB^＊12基因频率均高于对照组[A3（2．1％比1．26％，OR=1．7，P〈0．05），B51（7．25％比5．78％，OR=1．3，P〈0．05）和DRB^＊12（16．13％比12．99％，OR=1．35，P〈0．05）]；HLA—A33-B58-DRB1^＊17单倍型频率低于对照组（2．46％比4．14％，OR=0．35，P〈0．05），A2-B51-DRB1^＊12单倍型频率高于对照组（1．24％比0．89％，OR=1．66，P〈0．05）。结论携带有A33-B58-DRB1^＊17单倍型个体可能与降低ALL的发病风险有相关性，A3基因和A2-B51-DRB1^＊12可能与增加ALL发病风险有弱相关性。

643例中国北方汉族急性淋巴细胞白血病患者人类白细胞抗原连锁不平衡分析

目的分析643例中国北方汉族急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）患者组和20359名健康对照组的人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）HLA—AB、BDR和A—B-DR单倍型频率及连锁不平衡分布差异。方法应用最大似然性算法（expectation—maximization，EM）计算患者组和对照组的HLA-A-B、B—DRB1和A—B—DRB1单倍型频率及连锁不平衡参数，采用x^2检验比较其分布差异。结果HLA-A30-B13、A2-B46、A33-B58，B13-DR7、B46-DR9、B52-DR15、B58-DR17，A30-B13DR7、A33-B58-DR17和A1-B37-DR10单倍型是两组常见、共有呈强连锁不平衡单倍型。A30—B13、A2-B46、A33-B44、B13-DR7、A30-B13-DR7和A2-B46-DR9的单倍型频率和连锁不平衡水平，患者组低于对照组，差异有统计学意义（x^2〉3．84，P〈0．05）。A2-B52、A2-B27、A24-B8，B60-DR9、B27-DR4、B52-DR14、B44-DR17、B27-DR12、和A11-B27-DR12的单倍型频率和连锁不平衡水平，患者组高于对照组，差异有统计学意义（x^2〉3．84，P〈0．05）。结论643例北方汉族ALL患者组HLA-A-B、B-DRB1、A—B-DRB1单倍型频率分布及连锁不平衡遗传特征和对照组具有高度的同源性。患者组与对照组之间的部分HLA单倍型频率及连锁不平衡分布存在统计学差异。本研究结果为ALL与HLA疾病相关性及HLA相合供者的寻找提供了基础数据。

HLA—A＊02：251新等位基因克隆测序鉴定及序列分析

目的鉴定中国人群人类白细胞抗原（human leukocyte antigen, HLA）A＊02：251新等位基因，分析新等位基因遗传特征。方法采用聚合酶链反应一测序分型法（polymerase chain reaction-sequence based typing,PCR-SBT）对组织配型健康供、患者进行HLA基因分型，发现先证者核苷酸杂合序列与已知序列不匹配，不能指定先证者HLA等位基因型，对先证者DNA扩增HLA—A位点第2～4外显子，PCR产物经克隆到PMD18-T质粒载体中以获得单链核苷酸序列，对克隆所得产物进行HLA-A基因的第2～4外显子双向测序分析。结果发现先证者的一个HLA—A＊02：06：01基因被确认，而另一个HLAA基因为新等位基因，其序列被GenBank接受（编号为HM245348）。新等位基因序列通过IMGT／HLA数据库BLAST，与最相近的A＊02：01：01：01相比，在第3外显子上有1个核苷酸的不同，即第383位G〉C，密码子128GAG→GAC，氨基酸由谷氨酸（Glu）→天门冬氨酸（Asp）。供、患者HLA—A、B、C、DQB1位点等位基因不匹配。结论该等位基因为新的HLA—A＊02：251等位基因。中国人群HLA—A位点第3外显子核苷酸序列存在多态性。