三氧化二砷单用或联用化疗药物对多药耐药白血病细胞的毒性研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3)单用或与化疗药物合用对敏感白血病细胞 (K5 6 2 )或多药耐药 (MDR)白血病细胞 (K5 6 2 /A0 2 )的毒性作用。方法 :细胞毒实验采用MTT法 ,细胞表面P 糖蛋白 (P gp)和细胞内柔红霉素 (DNR)浓度采用流式细胞术测定。结果 :As2 O3 对K5 6 2和K5 6 2 /A0 2的IC50 分别为 ( 2 .1± 0 .2 ) μmol·L-1和( 1.5± 0 .3) μmol·L-1,二者比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。As2 O3 分别与DNR、足叶乙苷 (VP16 )和三尖杉酯碱(H)联合应用时 ,对K5 6 2和K5 6 2 /A0 2的联合指数均大于 1。加入As2 O3 前后K5 6 2 /A0 2细胞表面P gp和细胞内DNR荧光强度均无明显改变。结论 :As2 O3 对敏感和MDR白血病细胞的细胞毒性作用相似 ;它分别与DNR ,VP16和H联合应用时 ,对敏感或MDR白血病细胞的毒性均为拮抗作用 ;它不影响MDR细胞P

深圳地区地中海贫血患病率调查及其基因分型

目的调查深圳地区地中海贫血的患病率及其基因分型。方法用二步法筛查地中海贫血,基因诊断采用PCR及PCR/RDB技术。结果在12220名受检者中检出携带者或轻症病人714例,检出率为5.84%,其中广东籍人472例,占广东籍人的10.19%。进一步基因诊断,其中α1地中海贫血杂合子386例,β珠蛋白基因突变杂合子326例,2例异常血红蛋白基因诊断不明。对16对双方均为β地贫基因携带者夫妇的胎儿实施产前诊断,检出纯合子或双重杂合子胎儿4例。结论深圳人以广东等南方省区为主,人群中地中海贫血检出率高,开展大规模的人群筛查和遗产咨询,对指导优生优育具有重大意义。

联合应用化疗药物对三氧化二砷耐药白血病细胞的毒性实验研究

目的:探讨化疗药物联合应用对三氧化二砷(As2O3)耐药白血病细胞(K562/AS2)的毒性作用。方法:细胞毒实验采用MTT法,二药合用时细胞毒性作用采用ChouTalalay联合指数法分析,细胞表面P糖蛋白(Pgp)和细胞内柔红霉素(DNR)浓度测定采用流式细胞术测定。结果:K562/AS2细胞对三氧化二砷、柔红霉素、鬼臼乙叉苷(VP16)、三尖杉酯碱(H)、米托蒽醌(NVT)和阿糖胞苷(AraC)的耐药倍数分别为7.4、2.9、3.8、3.6、2.8和1.1。K562细胞和K562/AS2细胞的细胞表面Pgp或细胞内任意荧光强度无显著的统计学意义(P>0.05)。As2O3与DNR、VP16、H或NVT联合应用时,对K562、K562/AS2和Pgp表达的白血病细胞(K562/A02)细胞的联合指数均大于1。异搏定与DNR联合应用时,对K562和K562/AS2细胞的联合指数均大于1,但是对K562/A02细胞的联合指数均小于1。结论:K562/AS2细胞对As2O3、DNR、VP16和NVT耐药,其机制与Pgp表达无关。异搏定联合应用DNR可以逆转K562/A02对DNR的耐药性,不能逆转DNR对As2O3耐药细胞的耐药性。As2O3与DN、VP16、H和NVT联合应用时,对K562、K562/AS2和K562/A02细胞的毒性均为拮抗作用。

深圳地区地中海贫血发病率及其基因诊断的初步报告

为了解深圳地区地中海贫血的发病情况及其基因分型，用二步法对深圳地区６３０ 名孕妇及１８７０ 名参加健康体检的常住居民进行地中海贫血筛查，共检出携带者或轻症病人１４３ 例，发生率５－８％ 。检出人群中，广东籍人发病率最高，为９－８ ％ ，其次是广西、四川、湖北、江西、福建、海南等。对９０ 例地贫筛查阳性标本做进一步基因诊断，以α１ 地贫杂合子及β基因ＩＶＳ２ｎｔ６５４（Ｃ→Ｔ） 及ＣＤ４１４２（ＣＴＴＴ） 等突变最为常见。对４ 对夫妇双方均为地贫携带者胎儿实施产前基因诊断，有效地避免了重症患儿的出生。

白血病患者Th、Tc细胞IFN-γ、IL-4表达研究

目的探讨白血病患者Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞亚群极化改变的临床意义。方法采用流式细胞仪检测39例白血病患者发病时外周血CD3+CD8-、CD3+CD8+细胞内IFN-γ和IL-4水平,并与同期30例对照组比较。结果白血病患者Th、Tc细胞内IFN-γ较对照组显著降低(P<0.01),而IL-4升高(P<0.05),Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞比值显著降低(P<0.01)。结论白血病的发病可能与Th1/Th2失调有关。

2-氯脱氧腺苷对多药耐药白血病细胞的毒性实验研究

目的 探讨 2 -氯脱氧腺苷 (2 - CDA)对多药耐药白血病细胞 (K5 6 2 / A0 2 )的毒性作用。方法 细胞毒实验采用 MTT法 ,二药合用时细胞毒性作用采用 Chou- Talalay联合指数法分析。结果 2 - CDA对 K5 6 2和K5 6 2 / A0 2的 IC50 分别为 (2 3.9± 2 .4) nmol/ L 和 (137.6± 12 .7) nm ol/ L(P<0 .0 5 )。 2 - CDA与柔红霉素 (DNR)联合应用时 ,对 K5 6 2细胞的联合指数分别是 1.0 ,对 K5 6 2 / A0 2细胞为 5 .1。结论 2 - CDA对敏感白血病细胞具有明显细胞毒性作用。多药耐药白血病细胞对 2 - CDA不敏感。2 - CDA与 DNR联合应用时 ,对敏感白血病细胞的毒性为相加作用 ,对多药耐药白血病细胞的毒性为拮抗作用。

多媒体计算机技术在血液病中的应用

多媒体计算机技术是把常规的视频、音频文字传媒与计算机交互控制功能结合在一起一高新技术。这种集文、图、声、像于一体的新型信息处理模式，在医学领域具有极为广阔的应用前景。本文以贫血的诊断及治疗专家系统为例，着重介绍了多媒体计算机技术在血液病专家中的应用，包括血液病图象数据库的建立和与专家系统推理网络相连接的过程。此外，尚对多媒体技术在血细胞形态图象分析、血液病档案管理。

血液分析仪测定白细胞分类误诊病例报告及分析

由于自动血液细胞分析仪具有全自动、多功能、多参数、快速度的功能，近年来在全国大小医院迅速普遍使用。在使用三分类或五分类自动血细胞分析仪时，有些单位便不再进行末梢血涂片分类计数，这样很容易造成漏诊或误诊。现将我们在使用ｓｙｓｍｅｘＫ—４５００（日本）三...

K562/AS2细胞株对三氧化二砷耐药机制的初步研究

目的:研究K562/AS2细胞株对三氧化二砷(ATO)耐药的机制。方法:采用MTT法检测细胞毒性。细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、细胞内柔红霉素(DNR)浓度采用流式细胞术检测。DNA聚合酶、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、多药耐药基因1(mdr1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)以及肺耐药相关蛋白基因(lrp)表达水平的检测采用RT-PCR法。结果:K562和K562/AS2细胞表面P-gp任意荧光强度、K562/AS2细胞内DNR浓度均无显著差异(P>0.05)。K562/AS2细胞株MRP1和TopoⅡ表达明显高于K562细胞(P<0.05),DNA多聚酶,mdr1和lrp表达与敏感细胞株K562细胞相同(P>0.05)。结论:ATO耐药细胞K562/AS2高表达MRP1,并产生低倍数的多药耐药。K562/AS2细胞TopoⅡ基因表达增高,其意义有待进一步阐明。

三氧化二砷耐药白血病细胞株K562/AS2的建立及其与多药耐药的关系

目的 :建立三氧化二砷 (As2 O3 )耐药白血病细胞株 ,用于研究其耐药机制。初步探讨该细胞系与多药耐药的关系。方法 :As2 O3 耐药白血病细胞株的建立通过逐步增加药物浓度方法。细胞毒实验采用MTT法 ,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法 ,细胞表面P -糖蛋白 (P -gp)、细胞内柔红霉素 (DNR)浓度、以及细胞免疫表型测定采用流式细胞术测定。结果 :As2 O3 耐药白血病细胞株K5 6 2 /AS2的细胞倍增时间和细胞周期与敏感细胞株K5 6 2相似。K5 6 2 /AS2对As2 O3 、DNR、足叶乙甙 (VP16 )和阿糖胞苷 (Ara -C)的耐药倍数分别为 (7 4、2 9、3 8和 1 1倍 )。多药耐药细胞K5 6 2 /A0 2对As2 O3 、DNR、VP16和Ara -C的耐药倍数分别为 (0 8、94、2 5和 0 9倍 )。K5 6 2细胞与K5 6 2 /AS2细胞之间的表面P -gp和细胞内DNR荧光强度无明显差异。结论 :建立一株对临床可获得药物浓度 (2μmol/L)的As2 O3 产生耐药的白血病细胞K5 6 2 /AS2。K5 6 2 /AS2对As2 O3 的耐药倍数是敏感株K5 6 2的 7 4倍。K5 6 2 /AS2对DNR和VP16部分耐药 ,其机制与多药耐药基因 1(mdr1)表达产物P

混合系白血病基因重排的检测方法及其临床意义

为了研究混合系白血病(MLL)基因重排在急性白血病(AL)中的发生率、融合基因类型及其临床意义,用荧光原位杂交技术检测60例急性白血病(AL)患者MLL基因重排,对于MLL基因重排阳性的患者,用巢式RT-PCR方法检测MLL基因重排形成的6种常见融合基因类型。结果表明:7例AL患者有MLL基因重排,发生率为11.67%,其中2例为急性髓细胞白血病M5(AML-M5),融合基因均为MLL/AF9;另5例为B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL),其中2例融合基因为MLL/ENL,1例MLL/AF4,2例未扩增出融合基因产物。结论:荧光原位杂交技术是检测ALMLL基因易位重排的快速、特异、灵敏的方法,巢式RT-PCR是检测MLL基因重排产生的融合基因类型的简便可行的方法;MLL基因重排的检测对急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义。

白血病MLL基因重排及其融合基因检测的临床意义

目的:研究白血病MLL(mixed lineage leukemia)基因重排及其融合基因的检测及其临床意义。方法:采用荧光原位杂交(FISH)检测70例白血病患者MLL基因重排,对于MLL基因重排的患者,用巢式RT-PCR方法检测常见6种MLL融合基因类型。结果:9例白血病有MLL基因重排,发生率为12.86,5例B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL),其中融合基因2例为MLL/ENL,1例MLL/AF4,2例未扩出融合基因产物;3例为急性髓细胞白血病M5(AML-M5),其中2例融合基因均为MLL/AF9,1例未扩出融合基因产物;1例为幼年型粒单核细胞白血病(JMML),其融合基因为MLL/ENL。结论:巢式RT-PCR是检测MLL基因重排及其融合基因类型简便有效的方法,MLL基因重排见于B-ALL、AML-M5、JMML,预后差。

白细胞单采术治疗高白细胞急性白血病26例临床观察

目的探讨白细胞单采术治疗高白细胞急性白血病的疗效。方法回顾性分析本院收治的26例高白细胞急性白血病患者的临床资料,观察化疗前行白细胞单采术治疗的效果。结果 26例患者中,25例临床症状缓解,外周血白细胞数显著下降,有效率达96.1%。结论白细胞单采术能迅速降低患者外周血中白血病细胞数目,减少体内白血病细胞负荷,有效防止肿瘤溶解综合征的发生,是治疗高白细胞急性白血病的有效方法。

肥大细胞瘤小鼠异基因造血干细胞移植的急性移植物抗宿主病动物模型的建立和评价

目的:初步探索应用环磷酰胺预处理建立异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的急性移植物抗宿主病(a GVHD)动物模型的可行性。方法:以C57/BL/6鼠(B6鼠)为供鼠,B6D2F1鼠(F1鼠)为受鼠,将F1鼠随机分为a GVHD组(Ⅰ组)、肿瘤组(Ⅱ组)和空白组(Ⅲ组),Ⅰ、Ⅱ组均于allo-HSCT予环磷酰胺300 mg/m2·d-1,d-5^-3腹腔注射,Ⅲ组则予等体积的生理盐水腹腔注射;预处理后,Ⅰ组F1鼠经尾静脉注射肥大细胞瘤P185细胞(白血病细胞)、B6鼠的骨髓、脾脏细胞三者的混合液,Ⅱ组小鼠注射肥大细胞瘤P185细胞,Ⅲ组注射等体积的RPMI-1640培养基,随后观察各组小鼠的一般情况及a GVHD发病情况。结果:环磷酰胺预处理后,Ⅰ组小鼠均出现a GVHD,其中4只死于a GVHD,8只存活且a GVHD临床评分1~6分,小鼠出现皮肤受损、耸毛等表现,病理表现为大量的淋巴细胞浸润;Ⅱ组小鼠于第18天内全部死亡,出现后肢的麻痹等表现,病理表现为大量的肿瘤细胞浸润肝脏;Ⅲ组小鼠全程活泼好动,无异常。结论:肥大细胞瘤小鼠allo-HSCT应用环磷酰胺预处理,建立a GVHD动物模型是可行的,且操作简单,对人、动物和环境的危害较小。

急性白血病11q23/MLL基因易位重排及其临床意义

目的研究11q23/MLL基因易位重排在急性白血病(AL)中的发生率、产生融合基因的常见类型及其临床意义。方法用荧光原位杂交技术,MLL双色断裂分离重排探针检测50例AL患者(49例初治,1例难治)的11q23/MLL基因,用流式细胞仪检测免疫表型,对于11q23/MLL基因易位重排阳性的患者,用巢式RT-PCR方法检测11q23/MLL基因易位重排形成的6种常见融合基因类型。结果6例AL有11q23/MLL基因易位重排,发生率为12%,2例为AML-M5,4例为ALL且均为B-ALL。2例11q23/MLL基因易位重排阳性的AML-M5患者融合基因均为MLL/AF9,其中1例为初治,发病时左侧小腿有白血病细胞浸润,本例患者化疗1疗程获CR;1例为难治性AL患者,于第3个疗程化疗后才达CR。4例11q23/MLL基因易位重排阳性的B-ALL患者中有2例于诊断后3周内死于全身衰竭和感染,化疗未获CR,其中1例患者的融合基因为MLL/ENL,1例未扩出融合基因产物;1例于诊断后第2天因DIC脑出血死亡,未进行化疗,其融合基因为MLL/AF9;1例发病时胸椎有白血病细胞浸润,1疗程化疗后获CR,其融合基因产物未扩出。结论荧光原位杂交技术是检测AL11q23/MLL基因易位重排快速、灵敏的方法,巢式RT-PCR是检测11q23/MLL基因易位重排所产生的融合基因类型简便可行的方法;有11q23/MLL基因易位重排的AL患者临床症状凶险,预后差。

PML/RARa融合基因阴性急性早幼粒细胞白血病的治疗

目的探讨PML/RARa融合基因阴性急性早幼粒细胞白血病(APL)治疗。方法4例患者用亚砷酸诱导治疗,完全缓解后,3例用亚砷酸联合化疗巩固治疗,1例行自体造血干细胞移植治疗。1例用维甲酸诱导治疗,缓解后,用维甲酸联合亚砷酸和化疗交替巩固治疗。结果5例患者均于诱导治疗1疗程获得完全缓解。1例于完全缓解后半年接受自体造血干细胞移植过程中死于心力衰竭,其余4例处于完全缓解状态。结论PML/RARa融合基因阴性的APL对亚砷酸或维甲酸(少数患者)诱导治疗是敏感的,亚砷酸或(和)维甲酸联用化疗巩固治疗有较好疗效。

复发或难治性急性非淋巴细胞白血病细胞周期及P-糖蛋白临床测定

目的 探讨复发或难治性白血病细胞增殖状况与多药耐药基因产物P -糖蛋白的表达对化疗的影响。方法 应用流式细胞术对 15例复发或难治性白血病骨髓单个核细胞进行DNA含量和P -糖蛋白 (P -gp)测定 ,以 10例缺铁性贫血、原发性血小板减少性紫癜作为对照。结果 复发或难治疗性白血病细胞G0 /G1期比例低于对照组 ,S -G2 M期比例高于对照组。P -gp测定均为阴性。化疗完全缓解率 3 0 %。结论 复发或难治性白血病细胞多处于增殖期 。

急性非淋巴细胞白血病Th1/Th2极化改变

目的探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者Th1/Th2极化改变的临床意义。方法采用流式细胞仪检测26例ANLL患者起病时及治疗缓解后外周血CD3+CD8-细胞内IFN-γ和IL-4水平,并与同期28例对照组比较。结果ANLL患者治疗前Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较对照组显著降低(P<0.01),Th2细胞升高(P<0.05),治疗后Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较治疗前显著增高(P<0.01),Th2减低(P<0.05)。结论ANLL的发病可能与Th1/Th2失调有关。