应用σ度量对深圳市龙华区三家综合医院临床生化检验结果互认的评价研究

目的探讨σ度量在深圳市龙华区三家综合医院临床生化检验结果互认中的应用价值。方法收集三家医院2019年广东省临检中心常规化学,特殊蛋白前两次的室间质评(EQA)样本,经混匀并分割成比对样本送至各评价实验室进行检测;以卫生部临检中心(NCCL)标准和生物学变异导出的允许总误差(TEa%)为质量规范,通过加权法计算出各项目2019年1~6月期间室内质控在控数据的不精密度,以2018年参加卫生部室间质评(EQA)数据作为偏倚(bias%)来源,计算三家医院29个检验项目的σ度量值并进行性能评价,利用质量目标指数(QGI)提出改善方法;将评价项目的σ度量值与直接比对试验进行比较,通过统计分析确定σ截断值(cut-off)。结果①三家医院29个生化项目的性能并不一致,将项目中、高值的σ值进行配对t检验,其t值分别为2.28,3.01和0.74,按α=0.05水准判断得出医院A与B,医院A与C间的性能差异有统计学意义,医院B与C间的性能差异无统计学意义,医院A项目性能要优于B,C医院。评估的87个项目中有53项σ平均值<6,根据QGI判断,3个项目需优先改善准确度,10个项目需同步改善准确度和精密度,另40个项目需优先改善精密度。②对医院间项目比对通过率进行配对χ^2检验,其χ^2分别为5.33,6.25和2.5,按α=0.05水准判断,B与A医院比对通过率低于C与A医院、C与B医院,差异有统计学意义;C与A医院比对通过率跟C与B医院差异无统计学意义。③将σ度量值与直接比对试验进行比较,经配对χ^2检验,当σcut-off值取≥2σ,≥3σ,≥4σ,≥5σ和≥6σ时,其χ^2分别为7.20,0.00,9.09,15.06和16.06,按χ^20.05,1=3.84,α=0.05水准判断,当σcut-off值取≥3σ时,两种比对方法的差异无统计学意义。结论σ度量值可以单独用于评价医院间生化检验结果的互认,在判断项目是否具有可比性时,可考虑将σcut-off值设为≥3σ。

CENPK基因过表达对乳腺癌细胞增殖及迁移能力的影响

目的探究着丝粒蛋白基因K(CENPK)过表达对乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖及迁移能力的影响。方法查阅癌症基因组图谱(TCGA)数据库,分析CENPK基因在乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测乳腺癌细胞、正常乳腺上皮细胞内CENPK基因的表达水平;向MCF-7细胞中转染CENPK过表达质粒,qRT-PCR验证转染效率,CCK8法(CCK8)、Transwell实验分别检测MCF-7细胞体外增殖和迁移变化情况。采用Western Blot检测AKT/MDM2/TP53信号通路相关蛋白表达以探究CENPK基因表达水平影响乳腺癌细胞增殖和迁移的相关机制。结果CENPK在乳腺癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05),乳腺癌MCF-7细胞内的CENPK基因的表达明显高于正常乳腺上皮细胞系MCF-10A细胞(P<0.05)。与空白对照组(vector)相比,转染了CENPK过表达质粒的CENPK组的CENPK基因表达显著上调(P<0.05),过表达CENPK显著诱导了乳腺癌MCF-7细胞的增殖(P<0.05),促进了乳腺癌MCF-7细胞的迁移(P<0.05);且过表达CENPK激活了AKT和MDM2的磷酸化,抑制了TP53的磷酸化。结论CENPK在乳腺癌组织和细胞中高表达,CENPK可能通过调控AKT/MDM2/TP53信号通路诱导乳腺癌细胞体外增殖和迁移。

miR-129-5p通过BDNF调控多发性骨髓瘤细胞增殖及分泌的机制

目的探究miR-129-5p对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖及分泌的影响及其机制。方法收集56例多发性骨髓瘤患者与56例健康者骨髓组织,RT-qPCR及Western blot检测组织中miR-129-5p、BDNF表达水平,Pearson分析miR-129-5p与BDNF的相关性。将RPMI8226细胞分为空白组、mimic-NC组和miR-129-5p mimic组。MTT法及平板克隆实验检测细胞增殖与克隆形成率,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,ELISA实验检测细胞IL-6、TNF-α、IL-1β及VEGF的水平,Western blot检测细胞VEGF蛋白表达水平。生物信息学网站与双荧光素酶报告实验检测miR-129-5p与BDNF的靶向关系。结果与健康者相比,MM患者骨髓组织中miR-129-5p的表达水平明显降低,BDNF的mRNA和蛋白水平都明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且miR-129-5p与BDNF呈负相关(r=-0.601)。与mimic-NC组比较,miR-129-5p mimic组的RPMI8226细胞增殖抑制,细胞周期进程阻滞,细胞凋亡增加,细胞分泌IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶切报告实验得出miR-129-5p mimic+BDNF-WT组的荧光素酶信号较mimic-NC+BDNF-WT组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),miR-129-5p mimic+BDNF-MUT组与mimic-NC+BDNF-MUT组的荧光素酶信号对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-129-5p能直接靶向负调控多发性骨髓瘤中的BDNF表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,并抑制IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF的分泌,发挥对MM的抑癌作用。

靶向细胞表面DcR3适配体促进肺鳞癌细胞凋亡的研究

目的探讨靶向细胞表面DcR3适配体对肺鳞癌细胞SK-MES-1、NCI-H520增殖凋亡的影响。方法采用聚合酶链反应、凝胶电泳对SK-MES-1、NCI-H520细胞DcR3 mRNA表达水平进行检测,应用MTT法检测靶向细胞表面DcR3适配体对细胞增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞周期分布,采用Western blot法分析FAS的表达变化。结果SK-MES-1细胞DcR3 mRNA相对表达水平为(1.134±0.115),靶向细胞表面DcR3适配体与细胞共孵育后DcR3 mRNA相对表达水平为(0.497±0.062),差异具有统计学意义(t=7.026,P<0.001);NCI-H520细胞DcR3 mRNA相对表达水平为(1.036±0.078),靶向细胞表面DcR3适配体与细胞共孵育后DcR3 mRNA相对表达水平为(0.419±0.028),差异具有统计学意义(t=7.193,P<0.001)。经靶向细胞表面DcR3适配体处理的G 0/G 1、S期SK-MES-1、NCI-H520细胞与未经处理的空白对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05),其中G 0/G 1期细胞显著高于未经处理的空白对照组(P<0.05),S期细胞显著低于未经处理的空白对照组(P<0.05)。SK-MES-1、NCI-H520细胞经靶向细胞表面DcR3适配体处理后FAS蛋白表达量降低,且随着靶向细胞表面DcR3适配体浓度的加大而减低,差异具有统计学意义(F分别为8.024、12.419,<0.001)。结论DcR3可能参与肺鳞癌细胞的生长、增殖,为其治疗提供了新的靶点。

伴系统性红斑狼疮的MDS-5q-1例报道

骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)是一组起源于造血干细胞的异质性髓系克隆性疾病,其特点是髓系细胞发育异常,表现为无效造血、难治性血细胞减少,具有MDS相关染色体核型异常,高风险向急性髓系白血病转化。2016年世界卫生组织最新修订的标准将MDS分为以下几个类型:MDS伴单系发育异常(MDS with single lineage dysplasia,MDS-SLD)、MDS伴环形铁粒幼细胞(MDS with ring sideroblasts,MDSRS)、MDS伴环形铁粒幼细胞和单系发育异常(MDS-RS and single lineage dysplasia,MDSRS-SLD)、MDS伴环形铁粒细胞和多系发育异常(MDS-RS and multilineage dysplasia,MDSRS-MLD).

宫颈癌患者解脲脲原体培养和耐药性分析

目的 了解宫颈癌患者非淋球菌性泌尿生殖道感染中解脲脲原体(Uu)的感染及其耐药情况。方法 对70例宫颈癌非淋球菌性泌尿生殖道感染标本进行支原体培养鉴定、计数和药敏试验。结果 70例标本中共检出解脲脲原体阳性36例,阳性率为51.4%,其中,青年女性占比60.0%(24/40),中年女性占比40.0%(12/30),两者差异具有统计学意义(P <0.05);药敏结果显示,敏感性前三位的是强力霉素(95.18%)、美满霉素(92.05%)和交沙霉素(90.05%),耐药率前三位的是环丙沙星(70.54%)、氧氟沙星(75.32%)和罗红霉素(52.15%)。结论 解脲脲原体是宫颈癌患者宫颈感染的主要病原菌之一,培养解脲脲原体和监测其耐药性对指导其合理用药具有重要作用,防止滥用抗生素的发生;目前强力霉素、美满霉素和交沙霉素等药物敏感性较高,可作为治疗解脲脲原体感染的第一选择。

miR-125b-5p靶向STAT3调节JAK抑制骨髓增生异常综合征细胞增殖

目的探究miR-125b-5p对骨髓增生异常综合征细胞增殖的作用及可能机制。方法qRTPCR检测骨髓增生异常综合征患者骨髓组织miR-125b-5p表达;将miR-125b-5p模拟物转染骨髓增生异常综合征SKM-1细胞,CCK-8和Edu实验检测细胞增殖;qRT-PCR检测STAT3、JAK1和JAK2 mRNA表达;Western blot检测STAT3、JAK1和JAK2蛋白表达;生物信息学预测STAT33’非翻译区miR-125b-5p潜在结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证。结果miR-125b-5p在骨髓增生异常综合征患者骨髓组织中表达上调。上调miR-125b-5p抑制SKM-1细胞增殖,抑制SKM-1细胞STAT3、JAK1和JAK2表达。miR-125b-5p靶向结合STAT3。结论miR-125b-5p通过靶向抑制STAT3表达调节JAK抑制骨髓增生异常综合征细胞增殖。