应用σ度量对深圳市龙华区三家综合医院临床生化检验结果互认的评价研究

目的探讨σ度量在深圳市龙华区三家综合医院临床生化检验结果互认中的应用价值。方法收集三家医院2019年广东省临检中心常规化学,特殊蛋白前两次的室间质评(EQA)样本,经混匀并分割成比对样本送至各评价实验室进行检测;以卫生部临检中心(NCCL)标准和生物学变异导出的允许总误差(TEa%)为质量规范,通过加权法计算出各项目2019年1~6月期间室内质控在控数据的不精密度,以2018年参加卫生部室间质评(EQA)数据作为偏倚(bias%)来源,计算三家医院29个检验项目的σ度量值并进行性能评价,利用质量目标指数(QGI)提出改善方法;将评价项目的σ度量值与直接比对试验进行比较,通过统计分析确定σ截断值(cut-off)。结果①三家医院29个生化项目的性能并不一致,将项目中、高值的σ值进行配对t检验,其t值分别为2.28,3.01和0.74,按α=0.05水准判断得出医院A与B,医院A与C间的性能差异有统计学意义,医院B与C间的性能差异无统计学意义,医院A项目性能要优于B,C医院。评估的87个项目中有53项σ平均值<6,根据QGI判断,3个项目需优先改善准确度,10个项目需同步改善准确度和精密度,另40个项目需优先改善精密度。②对医院间项目比对通过率进行配对χ^2检验,其χ^2分别为5.33,6.25和2.5,按α=0.05水准判断,B与A医院比对通过率低于C与A医院、C与B医院,差异有统计学意义;C与A医院比对通过率跟C与B医院差异无统计学意义。③将σ度量值与直接比对试验进行比较,经配对χ^2检验,当σcut-off值取≥2σ,≥3σ,≥4σ,≥5σ和≥6σ时,其χ^2分别为7.20,0.00,9.09,15.06和16.06,按χ^20.05,1=3.84,α=0.05水准判断,当σcut-off值取≥3σ时,两种比对方法的差异无统计学意义。结论σ度量值可以单独用于评价医院间生化检验结果的互认,在判断项目是否具有可比性时,可考虑将σcut-off值设为≥3σ。

深圳市无偿献血人群人类嗜T淋巴细胞病毒感染现状及认知情况调查

了解深圳市无偿献血人群人类嗜T淋巴细胞病毒(Human T lymphotropic virus,HTLV)感染现状,为该地区血液制品的安全筛查策略制定提供参考。方法 随机收集2019年3月~2023年5月深圳无偿献血人群10925名,采用ELISA法筛查血清中HTLV-I/II抗体,初筛结果阳性者以蛋白印迹法(Western blot,WB)和巢式PCR法确证,并随机从中抽出1562名无偿献血者开展HTLV认知情况问卷调查,对检测及问卷结果进行统计分析。结果 10925名无偿献血者ELISA法检出HTLV携带者3例,经平行孔复查仍为阳性,初筛阳性率为0.03%,其中男性2例,阳性率为0.03%,略高于女性的0.02%,但差异不明显(X2=0.821,P>0.05)。经WB和巢式PCR核酸检测确认,确诊HTLV感染率为0。1562名无偿献血者对HTLV毫无认知(0分)的1309名,占83.80%,明显高于对HTLV有所了解(10~100分)的16.20%,差异明显(X2=34.096,p<0.01)。医务献血者对HTLV认知率为100%,且以80~100分为主,占96.70%,明显高于非医务献血者的11.01%,差异明显(X2=21.834,p<0.01),且非医务献血者对HTLV认知得分以10~30分主,占10.33%。结论 深圳市无偿献血人群中HTLV初筛阳性率处于较低水平,但为了输血安全,应加强HTLV初筛检查;非医务献血者对HTLV的认知极为匮乏,亟待加强HTLV知识宣传及采取相应的防控措施。

某基层医院骨科患者术后手术部位感染的病原菌分布特点及其影响因素

目的探讨某基层医院骨科引发患者术后手术部位感染的病原菌分布特点、药物敏感性及其影响因素。方法回顾性分析2018年12月至2020年12月本院骨科收治的、发生术后手术部位感染患者的临床资料,统计其切口分泌物检出的感染病原菌种类及数量,将检出的感染病原菌菌种分为革兰氏阳性菌感染组和革兰氏阴性菌感染组,分析其分布特点及对抗菌药物的敏感性,最后对病原菌菌种类型的影响因素进行单因素分析,并对独立影响因素进行主效应分析及多重分析。结果统计了62例骨科术后手术部位感染患者,首次检出感染病原菌62株,其中革兰氏阳性菌20株,革兰氏阴性菌42株;多数革兰氏阳性菌对青霉素、苯唑青霉素、头孢唑林耐药率较高,对红霉素、克林霉素耐药率中等,对利福平、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、庆大霉素、万古霉素、利奈唑胺等敏感;多数革兰氏阴性菌对头孢唑林、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐药率较高,对头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、左氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星较为敏感。经单因素分析发现,创伤部位及术前预防用抗菌药物品种是患者术后手术部位感染病原菌菌种类型的独立影响因素;经主效应分析发现,创伤部位及预防用抗菌药物无交互作用;经多重分析后发现头孢唑林、头孢呋辛对术后手术部位感染病原菌菌种类型影响无显著差异,其他类抗菌药物分别与头孢唑林、头孢呋辛比较,显示对病原菌菌种类型影响具有显著性差异。结论引发骨科患者术后手术部位感染的病原菌菌种分布具有一定差异性,主要受创伤部位及预防用抗菌药物品种的影响,临床需在围手术期应结合患者手术部位及本院细菌耐药性选择合适的预防性用抗菌药物。

深圳市某健康驿站14例新冠病毒肺炎病例的感染来源分析

目的分析探讨健康驿站新冠病毒肺炎病例感染来源,评估驿站站内感染风险,规范驿站管理,降低感染风险。方法对驿站2022年2月21日—3月9日全部14例新冠肺炎病例自入境到报告进行全链条风险分析。结果14例病例为7批次不同时间入住,其中病例1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、13共12例病例入境后即确诊,病例11入住5天(其共同入境、同住人员病例10,入境后即确诊)确诊、病例14入住10天发病确诊,其余病例均未呈现感染发病时间特异性,未呈现入境后交叉感染时间特异性,未见入住后空间、通风系统、排污系统交集,未见交叉感染情况。结论该驿站目前报告新冠肺炎病例均有相关旅居史,主要在香港本土感染。13名病例大概率均在香港感染,入境隔离时发病确诊,其中病例1、2、3、4,病例6、7、8,病例10、11是3起呈现家庭聚集性感染发病,病例5、9是独立个案,病例14需要进一步排除,驿站未规范管理会导致误报及进一步扩大站内感染风险。

深圳市龙华区3106例妊娠妇女地中海贫血基因突变类型分析

目的了解深圳市龙华区妊娠妇女地中海贫血(Thalassaemia)基因突变类型及分布情况,为该地区预防地中海贫血患儿出生提供科学依据。方法选择2017年9月~2020年5月在深圳市龙华区中心医院产科进行产检的妊娠妇女3106例,检测血常规,对红细胞平均体积(MCV)<80fl和/或红细胞平均血红蛋白含量(MCH)<27 pg的标本做红细胞(RBC)脆性和血红蛋白(Hb)电泳等地中海贫血初筛试验,同时对地中海贫血初筛阳性标本进行α、β地中海贫血基因检测。结果3106例妊娠妇女地中海贫血初筛阳性1071例,阳性率为34.48%,经基因确诊地中海贫血374例,阳性率为12.04%。其中α-地中海贫血206例,阳性率为6.63%,β-地中海贫血135例,阳性率为4.35%,α合并β地中海贫血33例,阳性率为1.06%,α-地中海贫血阳性率明显高于其它地中海贫血,不同类型地中海贫血发病率差异有统计学意义(P<0.01);206例α-地中海贫血检出6种基因缺失型,其中东南亚型缺失--SEA/αα阳性率最高,占60.19%,其次为-α3.7/αα和-α4.2/αα,阳性率分别为22.82%和9.22%,--SEA/αα基因阳性率明显高于其它基因突变型,不同基因缺失型构成比差异有统计学意义(P<0.001);135例β-地中海贫血检出8种基因缺失型,其中CD41-42基因突变检出率最高,占37.78%,其次为IVS-Ⅱ-654和CD28,分别21.48%和12.59%,CD41-42基因突变检出率明显高于其它基因突变型,不同基因突变类型检出率差异有统计学意义(P<0.01);33例α合并β地中海贫血检出12种基因突变型,以--SEA/αα+CD41-42,--SEA/αα+CD28,-α3.7/αα+IVS-Ⅱ-654及--SEA/αα+IVS-Ⅱ-654联合突变为主,阳性率分别为24.24%,18.18%,12.12%和9.09%,还发现1例罕见的-α-4.2/--SEA合并β基因βE位点突变。结论深圳市龙华区妊娠妇女地中海贫血有一定的发病率,基因突变类型十分复杂,且杂合基因突变率呈上升趋势。因此,加强妊娠妇女地中海贫血筛查和基因检查,对杜绝或降低重度地中海贫血患儿的出生具有重要意义。

深圳地区类风湿关节炎患者IL-17A基因rs2275913位点多态性与血清中IL-17A,IL-38水平表达的相关性研究

目的了解深圳地区类风湿关节炎(Hieumatord arthritis,RA)患者IL-17A基因rs2275913位点多态性与血清中IL-17A,IL-38水平表达的相关性。方法选择103例RA患者作为RA组,另选取116例非RA健康人群作为对照组。分别检测IL-17A,IL-38及类风湿因子(rheumatoid factors,RF)水平,同时对IL-17A基因rs2275913位点多态性进行分析。结果RA组IL-17A和RF水平(54.06±1.87 pg/ml和29.65±4.02 IU/ml)明显高于对照组(33.29±1.42 pg/ml和5.27±1.38 IU/ml),而IL-38水平(40.92±8.67 pg/ml)明显低于对照组(53.78±12.04 pg/ml),两组差异有统计学意义(t=7.2065,18.2972,5.0197,均P<0.05)。RA组随着病情活动度的加重IL-17A和RF水平明显升高,而IL-38水平明显降低,不同活动度之间差异均有统计学意义(F=12.5271,7.9351,9.2702,均P<0.05)。RA组IL-17A基因rs2275913位点AA基因型和A等位基因检出率(47.57%和63.11%)明显高于对照组(15.52%和30.60%),两组差异有统计学意义(χ^(2)=5.9256,4.0272,均P<0.05)。RA组AA基因型IL-17A水平比AG和GG基因型明显升高,而IL-38水平明显降低,不同基因型之间差异有统计学意义(F=7.0625,5.1873,P均<0.05),但不同基因型RF水平差异无统计学意义(F=1.0961,P=0.1205)。经Spearman相关性分析,RA组IL-17A水平与RF水平呈正相关,而与IL-38水平呈负相关(r=0.5012,-0.6924,均P<0.05)。结论RA组IL-17A水平明显升高,且随病情活动度加重而升高。同时IL-17A基因rs2275913位点多态性与深圳地区RA发病的易感性相关,其中AA基因型可能是RA发病的易感危险基因之一。

缺氧诱导因子-1α基因G1790A多态性与慢性牙周炎易感性分析

目的 了解深圳地区不同分度慢性牙周炎(CP)患者缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、25-羟基维生素D[25-(OH)VitD]水平及HIF-1α基因(HIF-1α)G1790A位点多态性,并探讨其与牙周临床指标的相关性。方法 选择2020年3月至2022年5月CP确诊者137例(CP组),其中男性81例,年龄16~58岁,平均年龄31.89岁;女性56例,年龄17~56岁,平均年龄32.04岁;疾病程度,轻度79例,中度31例,重度27例。同期非CP健康体检人群115例(对照组),其中男性69例,年龄15~57岁,平均年龄30.28岁;女性46例,年龄16~59岁,平均年龄32.86岁。采用酶联免疫吸附分析法检测HIF-1α和VEGF水平,并运用C8000化学发光分析仪检测25-(OH)VitD水平,同时采用限制性片段长度多态性-聚合酶链式反应分析HIF-1α G1790A位点多态性。结果 CP组HIF-1α、VEGF水平(31.37 pg/mL±7.56 pg/mL,102.35 pg/mL±29.68 pg/mL)明显高于对照组(5.62 pg/mL±1.32 pg/mL,37.06 pg/mL±9.21 pg/mL),而25-(OH)VitD水平(23.54 mmol/L±7.82 mmol/L)明显低于对照组(48.09 mmol/L±5.76 mmol/L),差异有统计学意义(P <0.05)。HIF-1α、VEGF水平重度(79.49 pg/mL±7.58 pg/mL,203.95 pg/mL±26.34 pg/mL)>中度(32.50 pg/mL±3.17 pg/mL,103.64 pg/mL±20.78 pg/mL)>轻度(14.48 pg/mL±2.95 pg/mL,67.12 pg/mL±18.59 pg/mL),而25-(OH)VitD水平重度(7.65 mmol/L±4.02 mmol/L)<中度(18.09 mmol/L±8.35 mmol/L)<轻度(31.11 mmol/L±6.37 mmol/L),差异有显著统计学意义(P <0.001)。牙周袋深度(PD)、附着丧失(AL)、出血指数(BI)及菌斑指数(PLI)值重度>中度>轻度,差异有统计学意义(P <0.05)。经Pearson相关分析,CP组HIF-1α、VEGF水平与PD、BI、AL、PLI呈正相关,而25-(OH)VitD水平呈负相关(P <0.05)。CP组AA基因型和A等位基因频率(55.47%、65.69%)明显高于对照组(21.74%、31.30%),而GG基因型和G等位基因频率(24.09%、34.31%)明显低于对照组(59.13%、68.70%),差异有统计学意义(P <0.05),但GA基因型频率差异不明显,不同分度CP患者HIF-1α G1790A位点GG、GA、AA基因型及G、A等位基因频率差异无统计学意义(P> 0.05)。AA基因型CP患者HIF-1α水平(37.82 pg/mL)明显高于GA和GG基因型(24.03 pg/mL、22.74 pg/mL),差异有统计学意义(P <0.05),但GA和GG基因型差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 CP组HIF-1α、VEGF及25-(OH)VitD水平与牙周临床指标密切相关;同时CP组HIF-1α G1790A位点呈多态性分布,其中AA基因型CP患者HIF-1α水平升高尤为突出,可能与深圳地区CP发病存在一定易感性。

CENPK基因过表达对乳腺癌细胞增殖及迁移能力的影响

目的探究着丝粒蛋白基因K(CENPK)过表达对乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖及迁移能力的影响。方法查阅癌症基因组图谱(TCGA)数据库,分析CENPK基因在乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测乳腺癌细胞、正常乳腺上皮细胞内CENPK基因的表达水平;向MCF-7细胞中转染CENPK过表达质粒,qRT-PCR验证转染效率,CCK8法(CCK8)、Transwell实验分别检测MCF-7细胞体外增殖和迁移变化情况。采用Western Blot检测AKT/MDM2/TP53信号通路相关蛋白表达以探究CENPK基因表达水平影响乳腺癌细胞增殖和迁移的相关机制。结果CENPK在乳腺癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05),乳腺癌MCF-7细胞内的CENPK基因的表达明显高于正常乳腺上皮细胞系MCF-10A细胞(P<0.05)。与空白对照组(vector)相比,转染了CENPK过表达质粒的CENPK组的CENPK基因表达显著上调(P<0.05),过表达CENPK显著诱导了乳腺癌MCF-7细胞的增殖(P<0.05),促进了乳腺癌MCF-7细胞的迁移(P<0.05);且过表达CENPK激活了AKT和MDM2的磷酸化,抑制了TP53的磷酸化。结论CENPK在乳腺癌组织和细胞中高表达,CENPK可能通过调控AKT/MDM2/TP53信号通路诱导乳腺癌细胞体外增殖和迁移。

血清AMH联合Vaspin在诊断多囊卵巢综合征中的应用

目的探讨抗苗勒管激素(AMH)联合内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)对多囊卵巢综合征(PCOS)的诊断价值。方法选择2018年3-9月在南方医科大学附属深圳市妇幼保健院初次就诊的237例PCOS患者作为病例组,同期的203名体检健康者为对照组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清Vaspin,化学发光法对2组血清行AMH、雌二醇(E2)、睾酮(Testo)、黄体生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)测定。采用SPSS19.0软件对2组受试者的各项指标进行统计学分析。结果病例组血清Vaspin、AMH、Testo及LH明显高于对照组(P<0.05),而2组的E2与FSH差异无统计学意义(P>0.05)。AMH、Vaspin与LH的最佳诊断临界值分别为6.29ng/mL、3.40ng/mL和6.29IU/L。AMH与Vaspin联合检测的受试者工作特征曲线下面积最大(0.917)。病例组中,AMH联合Vaspin对PCOS的检出率(81.01%)高于AMH、Vaspin、LH单独检测(67.09%、68.35%、75.52%,χ^2=15.283,P<0.01);在最佳诊断临界值时,与AMH、Vaspin、LH单独检测比较(93.06%、80.79%、61.58%),AMH与Vaspin联合诊断PCOS的特异度最高(94.58%,χ^2=100.407,P<0.01)。结论测定血清AMH和Vaspin是诊断PCOS的新方法,其联合检测可以作为PCOS的诊断指标。

1种人类血小板抗原1～17及Cab等位基因全血直接检测方法的建立

目的结合靶序列富集多重聚合酶链反应(TEM-PCR)、荧光探针溶解曲线SNP分型和血液直接PCR技术,建立一种方便、准确的人类血小板抗原(HPA)等位基因分型方法。方法 TEM-PCR方法设计HPA1~17、Cab这18种HPA亚型等位基因的引物及荧光探针,使用血液直接PCR酶同时扩增血液标本中的18个等位基因目标片段,并利用荧光探针的溶解温度变化区分不同SNP位点。结果 TEM-PCR可同时扩增18个等位基因的目标片段,并通过溶解峰的Tm值变化区分SNP位点,结果与序列特异性引物聚合酶链反应位点相比较有相同的准确度,且操作更为简便,无需提取血液基因组DNA,无PCR后续电泳步骤,减少污染风险。结论成功建立了1种基于TEM-PCR,血液直接PCR和荧光探针溶解曲线分析技术检测HPA1~17,Cab等位基因。

血气分析仪与干化学生化分析仪及全自动血球分析仪相同项目检测结果对比分析

目的:比较分析RAPIDPoint 500血气分析仪(以下简称“R500分析仪”)与Vitros 5600干化学生化分析仪(以下简称“V5600分析仪”)及XN-9000全自动血球分析仪(以下简称“XN分析仪”)相同项目检测结果的差异性及相关性,为临床提供准确结果。方法:采用R500分析仪与V5600分析仪和XN分析仪同时检测64例患者动脉血和静脉血中K^+、Na^+、Cl^-、HCO3^-、血糖(Glu)、血红蛋白(HGB)及红细胞压积(HCT),并对检测结果进行统计学分析,分析不同仪器检测动、静脉血中相同项目结果的差异性和相关性。结果:R500分析仪检测的K+和HCO3-浓度低于V5600分析仪,Glu浓度高于V5600分析仪,差异均有统计学意义(P<0.05),而Na+和Cl-浓度2种分析仪间差异无统计学意义(P>0.05);R500分析仪检测动脉血和XN分析仪检测静脉血中的HGB和HCT浓度比较,差异无统计学意义(t=0.7602~0.9163,P>0.05);R500分析仪检测动脉血与V5600分析仪及XN分析仪检测静脉血中相同项目的检测结果进行相关性分析,动、静脉血中K^+、Na^+、Cl^-、HCO3^-、Glu、HGB及HCT浓度相关系数r值分别为0.9889、0.9924、0.9956、0.9744、0.9953、0.9725及0.9873。结论:R500分析仪检测的Na^+、Cl^-、HGB及HCT浓度与V5600分析仪及XN分析仪检测的浓度基本一致,可直接供临床参考,而K+、HCO3-和Glu浓度之间具有一定的差异,但呈明显的正相关性,要校正后才能供临床参考。

2型糖尿病患者25-羟基维生素D与叶酸、同型半胱氨酸的相关性

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者25-羟基维生素D[25(OH)D]与叶酸(FA)、同型半胱氨酸(Hcy)的相关性。方法分别测定124例T2DM患者(T2DM组)及40名体检健康者(正常对照组)血浆Hcy、FA及25(OH)D水平。根据25(OH)D水平将T2DM患者分成4组:Q1组20例,25(OH)D<10 ng/m L;Q2组59例,25(OH)D水平为10~<20 ng/m L;Q3组31例,25(OH)D水平为20~<30 ng/m L;Q4组14例,25(OH)D≥30 ng/m L。25(OH)D与FA、Hcy的相关性采用Pearson线性相关分析。结果 T2DM组25(OH)D、FA水平明显低于正常对照组(P<0.05),而Hcy明显高于正常对照组(P<0.05)。在T2DM患者中,Q1、Q2、Q3、Q4组之间FA及Hcy水平差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,25(OH)D与Hcy呈负相关(r=-0.213,P<0.05),与FA呈正相关(r=0.325,P<0.05)。结论 T2DM患者存在25(OH)D、FA缺乏及Hcy升高,且25(OH)D与Hcy、FA明显相关。

利用Westgard 6σ规则建立生化28个检测项目的个性化质控方案

目的 利用韦斯特加氏六西格玛(Westgard 6σ)规则建立生化实验室检测项目的个性化质控方案.方法 将实验室2017年参加原卫生部临检中心(NCCL)室间质评的28个项目回报数据进行汇总,通过线性回归计算偏倚(Bias);通过加权法获得2017年全年实验室内28个项目的变异系数(CV);根据公式σ=[允许总误差(%)-|Bias(%)|]/[CV(%)],计算出各个检测项目中、高值浓度的σ值,利用Westgard 6σ规则来确定28个项目及中、高值质控品的质控规则.结果 28个检验项目中、高值浓度控制处的σ值参差不齐.高值≥6σ的项目15个(53.57%),5σ~<6σ的项目4个(14.29%),4σ~<5σ的项目2个(7.14%),3σ~<4σ的项目6个(21.43%),<3σ的项目1个(3.57%);中值≥6σ的项目11个(39.29%),5σ~<6σ的项目7个(21.00%),4σ~<5σ的项目1个(3.57%),3σ~<4σ的项目5个(32.14%),<3σ的项目4个(14.29%).结论 不同检测项目、同一项目不同浓度控制处应根据其σ值采取相对应的质控方案;<3σ的项目必须查找和分析原因并采取纠正措施,确保满足性能要求;Westgard 6σ规则是实验室制订个性化的质控方案的便捷途径.

血清hsCRP、MCP-1、CTRP9、APN、Lp-PLA2、Fractalkine和RANTES因子水平与无症状冠状动脉粥样硬化的关系

目的:探讨血清超敏C反应蛋白(hsCRP)、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)、脂联素(APN)、脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)、Fractalkine (即趋化因子CX3C)、调节T细胞正常表达和分泌的细胞因子(RANTES)水平与无症状冠状动脉粥样硬化(ACAS)之间的关系。方法:选择我院2015年12月～2016年12月收治的50例ACAS患者作为ACAS组,另选同期50例正常体检者作为正常对照组。检测比较两组血清hsCRP、MCP-1、RANTES、CTRP9、APN、Lp-PLA2、Fractalkine水平。结果:与正常对照组比较,ACAS组血清CTRP9 [(3.70±1.20)×10-2 mg/L比(3.19±1.11)×10-2 mg/L]和APN [(3.85±1.15)mg/L比(3.28±1.01)mg/L]水平显著降低,hsCRP [(32.55±1.55)mg/L比(110.47±1.53)mg/L]、MCP-1 [(480.22±5.38)pg/ml比(600.47±5.43)pg/ml]、RANTES [(2.80±0.20)μg/ml比(4.19±0.22)μg/ml]、Lp-PLA2[(165.88±5.32)mg/L比(199.55±5.35)mg/L]和Fractalkine [(322.40±5.60)pg/ml比(500.64±5.66)pg/ml]水平显著升高,P<0.05或<0.01。结论:与正常对照组比较,无症状冠状动脉粥样硬化患者血清CTRP9和APN水平显著降低,血清hsCRP、MCP-1、RANTES、Lp-PLA2、Fractalkine水平显著升高。检测上述指标可为早期诊断及干预提供有力的科学依据。

痛风性关节炎患者血清IL-1β,TNF-ɑ,hs-CRP水平及与IL-1β基因启动子区rs2853550 A/G位点多态性相关性分析

目的分析深圳地区痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)患者血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-ɑ)、超敏-C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)水平及与IL-1β基因启动子区rs2853550 A/G位点多态性相关性。方法收集GA确诊患者216例作为GA组,同时选取153例健康体检人群作为对照组。分别检测血清IL-1β,TNF-ɑ及hs-CRP水平,同时检测IL-1β基因rs2853550 A/G多态性。结果GA组IL-1β,TNF-ɑ及hs-CRP水平分别为5.16±1.02pg/ml,21.84±6.49pg/ml和17.03±5.61mg/L,明显高于对照组(3.94±0.87pg/ml,3.50±1.16pg/ml及2.14±0.73mg/L),差异均有统计学意义(t=4.2173,20.5104,23.2745,均P<0.05)。GA组IL-1β基因rs2853550 A/G位点GG基因型和G等位基因频率(75.93%和83.56%)明显高于对照组(51.63%和60.13%),差异有统计学意义(χ^(2)=5.6419,5.0372,均P<0.05)。GG基因型和G等位基因患GA的相对风险明显增加(OR=7.092,95%CI:5.681~10.526和OR=5.914,95%CI:3.514~8.029),而AA基因型和A等位基因患GA的相对风险明显降低(OR=0.731,95%CI:0.576~0.918和OR=0.584,95%CI:0.437~0.753)。GA组GG基因型IL-1β水平(5.42±1.12pg/ml)明显高于GA基因型(4.51±0.67pg/ml),而GA基因型明显高于AA基因型(4.04±0.29pg/ml),不同基因型之间差异有统计学意义(F=8.0195,P=0.0236)。经Spearman相关性分析,GA组IL-1β与TNF-ɑ,hs-CRP水平呈正相关(r=0.7901,0.6847,均P<0.05)。结论GA患者IL-1β,TNF-ɑ及hs-CRP水平明显升高,且存在一定相关性。同时IL-1β基因启动子区rs2853550 A/G位点呈多态性,其中GG基因型可能与GA发病具有一定的相关性。

子痫前期孕妇HIF-1a基因rs11549467G/A位点多态性和血清HIF-1a及VEGF水平表达与病情严重程度的相关性分析

目的了解子痫前期(preeclampsia,PE)孕妇缺氧诱导因子1a(hypoxia inducible factor-1a,HIF-1a)基因rs11549467 G/A位点多态性和血清HIF-1a及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平表达与病情严重程度的相关性。方法选取2020年1月~2021年3月深圳市龙华区中心医院和深圳市龙华区人民医院103例PE孕妇作为PE组,非PE健康孕妇120例作为对照组。分别检测血清HIF-1a和VEGF水平,同时对HIF-1a基因rs11549467 G/A位点多态性进行分析。结果PE组HIF-1a水平(23.92±5.06pg/ml)明显高于对照组(4.98±1.32pg/ml),而VEGF水平(86.37±20.64pg/ml)明显低于对照组(195.18±35.21pg/ml),差异有统计学意义(t=13.0542,9.1475,均P<0.05)。重度PE孕妇HIF-1a水平(40.86±6.25pg/ml)明显高于轻度PE孕妇(12.06±2.93pg/ml),而VEGF水平(132.84±27.52pg/ml)明显低于轻度PE孕妇(285.72±41.37pg/ml),不同程度PE差异有统计学意义(t=10.6315,7.1943,均P<0.05)。PE组HIF-1a基因rs11549467 G/A位点AA基因型和A等位基因频率(36.89%和49.03%)明显高于对照组(17.50%和30.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.3745,4.8267,均P<0.05)。重度PE孕妇HIF-1a基因rs11549467G/A位点AA基因型和A等位基因频率(45.24%和57.14%)明显高于轻度PE孕妇(31.15%和43.44%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.2086,4.6197,均P<0.05)。AA基因型PE孕妇HIF-1a水平(37.96±8.13Pg/ml)明显高于GG和GA基因型孕妇(15.29±2.45pg/ml,16.38±2.93pg/ml),差异均有统计学意义(t=6.9042,6.1576,均P<0.05),而GG和GA基因型比较差异无统计学意义(t=0.9145,P=0.0718)。经Pearson相关性分析,HIF-1a水平与病情严重程度呈正相关(r=0.6174,P=0.0359),而VEGF水平与病情严重程度呈负相关(r=-0.6913,P=0.0311)。结论PE孕妇HIF-1a水平明显升高,而VEGF水平明显降低,且与病情严重程度有关。同时HIF-1a基因rs11549467G/A位点多态性与病情严重程度存在一定相关性,可能与PE发生和发展有密切关系。

三种不同仪器检测超敏C反应蛋白结果的一致性分析

目的 比较3种不同仪器检测超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)结果的一致性。方法 选择2018年3~7月来深圳龙华区人民医院门诊就诊的感染发烧患者156例,采用VITROS5600全自动干片生化免疫分析仪和AU5800生化分析仪检测血清中hs-CRP浓度,以及迈瑞BC5390血球-超敏一体机检测全血中hs-CRP。以参加卫生部室间质评的AU5800作为参考仪器,VITROS5600和5390作为对比仪器,分析3种不同仪器检测hs-CRP结果的一致性。结果156例患者血清中hs-CRP浓度参考仪器检测结果为93.64±79.74 mg/L,迈瑞5390全自动血球-超敏C反应蛋白一体机检测结果为87.98±76.57 mg/L,两者之间差异无统计学意义(t=0.9124,P>0.05),而VITROS5600干片生化分析仪检测结果为182.38±158.79 mg/L,明显高于参考仪器,差异有统计学意义(t=6.805 6,P<0.05)。3种仪器检测hs-CRP浓度之间均呈正相关,5390与AU5800E和VITROS5600与AU5800之间相关系数(r^2)分别为0.968 5和0.953 0。结论 5390血球-超敏C反应蛋白一体机和AU5800生化分析仪检测hs-CRP结果具有良好的一致性,而VITROS5600干片生化免疫分析仪检测的结果明显偏高,但3种不同仪器检测hs-CRP具有良好的正相关。

NLRP3在巨噬细胞抗铜绿假单胞菌感染中的作用

目的阐明抗铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)感染人巨噬细胞后炎症小体激活的情况,并通过沉默炎症小体探讨其在PA感染过程中的作用与机制。方法分别用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)、Real-time PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测PA感染后白细胞介素-1β(IL-1β)、胱冬肽酶-1(caspase-1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)家族成员含热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)的表达情况;siRNA沉默NLRP3炎症小体后ELISA检测IL-1β和caspase-1的分泌,免疫荧光染色和激光共聚焦显微成像直观观察NLRP3炎症小体确定其激活情况,并用细菌平板计数法检测巨噬细胞对PA的杀伤;继而通过Real-time PCR、Griess reaction、流式细胞术、Western blot和免疫荧光实验从抗菌肽、一氧化氮(NO)、活性氧簇(ROS)和自噬4个方面探讨炎症小体影响PA杀伤的机制。结果 PA感染人巨噬细胞能够激活NLRP3炎症小体。沉默NLRP3炎症小体可促进巨噬细胞对PA的杀伤和自噬的发生,而对抗菌肽、NO和ROS无影响。结论 PA激活的NLRP3炎症小体通过促进自噬从而抑制巨噬细胞对PA的杀伤。

miR-129-5p通过BDNF调控多发性骨髓瘤细胞增殖及分泌的机制

目的探究miR-129-5p对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖及分泌的影响及其机制。方法收集56例多发性骨髓瘤患者与56例健康者骨髓组织,RT-qPCR及Western blot检测组织中miR-129-5p、BDNF表达水平,Pearson分析miR-129-5p与BDNF的相关性。将RPMI8226细胞分为空白组、mimic-NC组和miR-129-5p mimic组。MTT法及平板克隆实验检测细胞增殖与克隆形成率,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,ELISA实验检测细胞IL-6、TNF-α、IL-1β及VEGF的水平,Western blot检测细胞VEGF蛋白表达水平。生物信息学网站与双荧光素酶报告实验检测miR-129-5p与BDNF的靶向关系。结果与健康者相比,MM患者骨髓组织中miR-129-5p的表达水平明显降低,BDNF的mRNA和蛋白水平都明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且miR-129-5p与BDNF呈负相关(r=-0.601)。与mimic-NC组比较,miR-129-5p mimic组的RPMI8226细胞增殖抑制,细胞周期进程阻滞,细胞凋亡增加,细胞分泌IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶切报告实验得出miR-129-5p mimic+BDNF-WT组的荧光素酶信号较mimic-NC+BDNF-WT组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),miR-129-5p mimic+BDNF-MUT组与mimic-NC+BDNF-MUT组的荧光素酶信号对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-129-5p能直接靶向负调控多发性骨髓瘤中的BDNF表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,并抑制IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF的分泌,发挥对MM的抑癌作用。

iTRAQ多重标记串联质谱技术在乳腺癌细胞侵袭患者HGF表达中的应用

目的探讨iTRAQ多重标记串联质谱技术应用于检测乳腺癌细胞侵袭患者肝细胞生长因子(HGF)表达差异的临床价值。方法选择该院2014年1月至2016年10月收治的35例乳腺癌患者与30例健康者为研究对象,通过iTRAQ标记、质谱检测、搜库以及Scqffold软件分析不同临床分期乳腺癌患者与健康者血清HGF表达差异,并用Western blot验证HGF的差异表达。结果该研究血清样品中共鉴定出蛋白237个,达到严格定量标准的蛋白89个,乳腺癌患者与健康者共筛选出包括HGF在内的差异表达蛋白17个;iTRAQ多重标记串联质谱图谱显示,乳腺癌患者血清HGF表达水平显著高于健康者,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,不同临床分期HGF相对表达水平显著高于健康者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论iTRAQ多重标记串联质谱技术有助于发现乳腺癌患者癌细胞高表达HGF,对指导临床治疗乳腺癌具有重要意义。