基于TLR4/MAPK/NF-κB信号通路探讨萝卜硫素抗甲状腺乳头状癌的作用

目的探讨萝卜硫素对裸鼠人乳头瘤状甲状腺癌移植瘤的作用及机制。方法采用皮下注射TPC-1细胞的方法构建裸鼠人乳头瘤状甲状腺癌移植瘤模型,随后将模型小鼠随机分为模型组、萝卜硫素低剂量组和萝卜硫素高剂量组,每组10只。萝卜硫素低、高剂量组分别灌胃给予5 mg/kg和20 mg/kg萝卜硫素,模型组灌胃给予等量生理盐水,1次/d,连续25 d。每5天测量肿瘤生长情况;取材后称量肿瘤质量,计算肿瘤抑制率;TUNNEL法观察肿瘤组织细胞凋亡情况;ELISA法检测血清炎症因子和氧化应激指标水平;流式细胞仪检测血液CD4^(+)/CD8^(+)淋巴细胞亚群比值;Western blot法检测肿瘤组织TLR4、P38和p-NF-κB蛋白的表达水平。结果与模型组比较,萝卜硫素给药组的肿瘤生长速度均明显被抑制(P<0.01),肿瘤质量明显减轻(P<0.01),肿瘤抑制率明显升高(P<0.01),肿瘤细胞凋亡阳性率明显升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显降低(P<0.01),血清GSH-Px和SOD水平均明显升高(P<0.01),而MDA水平明显降低(P<0.01),血液CD4^(+)/CD8^(+)淋巴细胞亚群比值明显升高(P<0.01),肿瘤组织TLR4、P38、p-NF-κB蛋白相对表达量明显降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。结论萝卜硫素具有抗甲状腺乳头状癌的作用,其机制主要与调控TLR4/MAPK/NF-κB信号通路、抗炎和氧化应激以及免疫调节有关。

基于Notch1/ROR-γt信号通路研究芹菜素对自身免疫性甲状腺炎小鼠的保护作用

目的探讨芹菜素对自身免疫性甲状腺炎小鼠的保护作用及机制。方法50只雌性BALB/c小鼠采用皮下多点注射猪甲状腺球蛋白联合高碘水的方法构建小鼠自身免疫性甲状腺炎模型,随后将模型小鼠随机均分为模型组(0.9%NaCl溶液)、雷公藤多苷片组[5 mg/(kg·d)]、芹菜素低剂量组[15 mg/(kg·d)]、芹菜素中剂量组[30 mg/(kg·d)]和芹菜素高剂量组[60 mg/(kg·d)],另设空白对照组10只,空白对照组和模型组给予等体积生理盐水,药物干预14 d。检测各组小鼠血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、TNF-α和IL-1β的水平、SOD活性和MDA含量,HE染色法观察甲状腺组织病理学变化;Western blot法检测Bcl-2、Bax、Notch1和ROR-γt蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,模型组的血清TGAb、TPOAb、TNF-α、IL-1β和MDA的含量明显升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01),甲状腺组织可见大量的炎症细胞浸润。甲状腺组织Bax、Notch1和R O R-γt蛋白表达水平明显上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平明显下调(P<0.01)。与模型组比较,芹菜素给药组的血清TGAb、TPOAb、TNF-α、IL-1β和MDA的含量明显降低(P<0.05),SOD活性明显升高(P<0.05),甲状腺组织炎症细胞浸润减少。甲状腺组织Bax、Notch1和ROR-γt蛋白表达水平明显下调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平明显上调(P<0.05),呈浓度依赖性。结论芹菜素通过抑制炎症、降低氧化应激水平和抑制甲状腺细胞的凋亡,对自身免疫性甲状腺炎小鼠具有一定的保护作用。

萝卜硫素对自身免疫性甲状腺炎小鼠的作用及机制

目的 研究萝卜硫素对自身免疫性甲状腺炎小鼠的药效及机制。方法 采用皮下多点注射猪甲状腺球蛋白联合高碘水的方法构建小鼠自身免疫性甲状腺炎模型,随后将模型小鼠随机分为模型组及给药组(雷公藤多苷片组、萝卜硫素低、中、高剂量组),每组10只。空白对照组和模型组采用灌胃方式给予等体积生理盐水,雷公藤多苷片组以及萝卜硫素低、中、高剂量组的灌胃剂量分别为5、5、10、20 mg/(kg·d),给药干预4周。取材后检测各组小鼠血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、IL-6、IL-17和IL-23的水平,HE染色法观察甲状腺组织病理学变化;Western blot法检测甲状腺组织表皮生长因子受体(EGFR)和转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)蛋白的表达水平。结果 与空白对照组比较,模型组的血清TGAb、TPOAb、IL-6、IL-17和IL-23的含量明显升高(P<0.01),甲状腺组织中可见大量炎症细胞浸润。甲状腺组织EGFR蛋白表达水平明显上调(P<0.01),Nrf2蛋白的表达水平明显下调(P<0.01)。与模型组比较,萝卜硫素给药组明显降低血清TGAb、TPOAb、IL-6、IL-17和IL-23的含量(P<0.05),减轻甲状腺组织炎症细胞的浸润程度,下调甲状腺组织EGFR蛋白的表达水平,上调Nrf2蛋白的表达水平。结论 萝卜硫素通过降低促炎症因子水平,同时下调甲状腺组织EGFR蛋白的表达水平,上调Nrf2蛋白的表达水平,从而改善甲状腺功能。

超声刀在甲状腺肿瘤手术中的应用效果及安全性评价

目的探讨超声刀在甲状腺肿瘤手术中的应用效果及安全性评价。方法选择2015年6月至2018年6月手术治疗的甲状腺瘤手术患者100例为研究对象,按随机数字表法分为超声刀组和电刀组,每组患者各50例。电刀组给予常规的高频电刀切除,超声刀组患者给予超声刀手术切除。以SPSS 22.0进行数据处理与分析,组间术中术后各项指标、TSH、 PTH、 PCT水平等计量资料以■表示,独立t检验;并发症发生率采用χ~2检验,当P<0.05时差异有统计学意义。结果①超声刀组患者的手术时间、术中失血量、术后引流量、术后住院时间均低于电刀组(P<0.05)。②术前两组患者的血清促甲状腺激素(TSH)、血清甲状旁腺激素(PTH)、血清降钙素原(PCT)水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后超声刀组患者的TSH、PTH水平均高于电刀组,而PCT水平则低于电刀组(P<0.05)。③超声刀组患者术后并发症发生率为6.0%(3/50),低于电刀组患者22.0%(11/50),差异有统计学意义(P<0.05)。结论与常规电切术相比,超声刀手术切除甲状腺肿瘤的效果更为显著,能够降低患者术中出血量、缩短手术时间,术后恢复快,且手术并发症少,安全性高,可在临床上进一步推广应用。

HIF-1a/PDK1通路活化促进化疗后残存乳腺癌组织癌干细胞生成

目的:探讨新辅助化疗后残存乳腺癌组织低氧诱导因子(hypoxia inducible factor 1a,HIF-1a)/丙酮酸脱氢酶激酶同工酶1(pyruvate dehydrogenase kinase isoenzyme 1,PDK1)信号通路活化是否促进乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)的生成。方法:实验分为化疗前乳腺癌组织组和化疗后残存乳腺癌组织组。免疫组织化学染色检测两组细胞中HIF-1a、PDK1及BCSCs标志物乙醛脱氢酶1A1(acetaldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)表达。通过无血清悬浮培养获得BCSCs微球体和观察微球体形态学;有限稀释法实验和Transwell体外侵袭实验分别检测微球体细胞单克隆形成能力和侵袭潜能;Western blot检测微球体细胞HIF-1a、PDK1及ALDH1A1蛋白表达水平。结果:免疫组化结果显示化疗后残存乳腺癌组织较化疗前乳腺癌组织高表达HIF-1a、PDK1及ALDH1A1蛋白,差异有统计学意义(P<0.05),ALDH1A1与HIF-1a和PDK1的表达相关。无血清悬浮培养获得BCSCs微球体为后续实验奠定基础,有限稀释法检测显示化疗后残存乳腺癌组织中BCSCs含量是化疗前2.5倍,同时微球体细胞侵袭能力明显增强。Western blot结果显示BCSCs微球体细胞高表达HIF-1a、PDK1及ALDH1A1蛋白,与化疗前乳腺癌组织相比,表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新辅助化疗促进残存乳腺癌组织中BCSCs微球体细胞富集,其可能通过激活HIF-1a/PDK1信号通路并促进ALDH1A1表达,从而获得癌干细胞潜能。