男性人乳头瘤病毒检测方法的建立及临床应用

目的:建立一种适合临床男性人乳头瘤病毒(HPV)基因亚型检测的新方法,并通过检测棉拭子采集男性尿道口分泌物来验证该方法的临床检测效果。方法:通过计算机辅助,参考经典通用引物(MY09/11)和加以改进的PGMY09/11设计23种HPV基因亚型的PCR扩增引物,根据GenBank中的HPV的型特异性序列设计及合成探针,制备可同时对18种高危型:HPV-16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,83,MM4和5种低危型:6,11,42,43,44进行分型检测的特定纸质膜芯片,并且对112例采用棉拭子采集的男性尿道口分泌物进行检测加以验证,同时,对单一阳性标本进行测序验证,对标准品进行灵敏度检测。结果:112例男性尿道口分泌物中检测出25例HPV阳性标本,其中单一HPV亚型感染13例,多重感染12例,检测出的男性HPV基因亚型有:HPV-6,11,16,18,33,35,43,56和73型九种。灵敏度可达10个拷贝HPVDNA分子。结论:该方法适用于临床进行男性HPV感染的诊断以及为开展相应的流行病、病因学调查提供切实可行的检测手段。

深圳计划生育门诊中男性人乳头状瘤病毒感染状况

目的了解深圳计划生育门诊中男性HPV感染的流行型别和分布状况。方法采用基因分型芯片方法检测23种基因亚型,高危型18种:HPV-16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,83,MM4和低危型5种:HPV-6,11,42,43,44。结果112例临床标本中25例阳性,深圳男性HPV检测阳性率是22.3%,最常见的HPV基因亚型是6、16和73型。就诊的男性以31～40岁的年龄组最多,其次是21～30岁年龄组,但发现年龄与男性HPV的感染无相关性。多重HPV感染中,以双重感染33/73型感染最多,高危型和低危型混合感染最常见。结论本次检测可知深圳计划生育门诊中男性HPV最常见的HPV基因亚型是6、16和73型,同时,发现年龄与男性HPV的感染无相关性。

采用男性尿道分泌物、精液及尿液检测人乳头瘤病毒感染的比较

目的选择一种易于采集、提高男性HPV阳性检出率、适合基因膜芯片法的标本类型。方法参考改进的PGMY09/11和β-球蛋白引物PC03/GH20设计PCR扩增引物,根据Genbank中的HPV型特异性序列设计及合成探针,制备可同时对18种高危型(HPV-16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,83,MM4)和5种低危型(6,11,42,43,44)进行基因分型检测的特定PCR-膜芯片,通过杂交,进行男性HPV基因亚型检测,以此来比较男性尿道分泌物、精液及尿液3种类型标本的检出率。并对检测结果进行统计学分析。结果初筛2004年5月—2007年5月191位男性患者中42例HPV阳性标本平行检测尿道分泌物、精液及尿液3种类型标本后发现,尿道分泌物的阳性率最高,32例阳性(32/42,76.2%)。尿液标本最不敏感,仅有16例阳性(16/42,38.1%)。精液居中,27例阳性(27/42,64.3%)。尿道分泌物和尿液检测具有明显差异(P<0.05)。结论临床常规检测男性HPV感染采用尿道分泌物作为采集部位和标本是具有较高的敏感性的,并且在3种标本中采样相对简单些,是切实可行的。