结合外周血微RNA-181b表达水平探讨急性脑梗死病人侧支循环形成的影响因素

目的 结合外周血微RNA(miR)-181b表达水平探讨急性脑梗死病人侧支循环形成的影响因素。方法 选择2015年6月至2019年5月在深圳市龙华区中心医院住院治疗的ACI病人175例,采用计算机产生随机数按3∶1的比例将纳入病人分为训练集(129例)和测试集(46例),其中129例训练集病人根据侧支循环形成情况分为两组,其中侧支循环良好组病人90例,侧支循环不良组病人39例,采用定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测血清miR-181b表达水平,采用Spearman相关法分析ACI病人血清miR-181b表达与侧支循环形成的相关性,采用logistic回归法分析ACI病人侧支循环形成不良的影响因素,并建立预测模型。结果 侧支循环良好组病人血清miR-181b表达1.92±0.19显著高于侧支循环形成不良组1.48±0.26(P<0.05),Spearman相关性分析结果表明,血清miR-181b表达与侧支循环形成呈显著正相关关系(r=0.77,P<0.001)。logistic回归分析结果表明高血压病史高血压史、血同型半胱氨酸(Hcy)、后循环病变均为ACI病人侧支循环形成不良的独立危险因素(P<0.05);miR-181b表达水平和脑血管狭窄程度为侧支循环形成不良的保护因素(P<0.05)。基于侧支循环形成不良的影响因素构建预测模型:预测值=EXP[0.491-1.914(高血压史)-1.409(Hcy)+2.145(miR-181b相对表达量)-1.286(后循环病变)+0.594(脑血管狭窄程度)]/1+EXP[0.491-1.914(高血压史)-1.409(Hcy)+2.145(miR-181b相对表达量)-1.286(后循环病变)-0.594(脑血管狭窄)]。结论侧支循环良好ACI病人外周血血清miR-181b表达水平较高,脑血管狭窄程度轻和高水平miR-181b为侧支循环形成不良的保护因素,而高血压史、Hcy、后循环病变均为ACI病人侧支循环形成不良的独立危险因素。

基于双层光刻技术制备神经血管单元三细胞共培养微流控芯片

目的:应用双层软光刻技术和微流控芯片技术,制备以星形胶质细胞为桥梁,神经元-星形胶质细胞-脑微血管内皮细胞在同一立体空间或平面内肩并肩生长的微流控芯片.方法:(1)设计一种贯通三通道神经血管单元的体外共培养微流控芯片模型.(2)基于双层光刻技术制备芯片模板及神经血管单元共培养微流控芯片.(3)测算不同通道进样流速比.(4)在芯片内培养神经血管单元3种要素细胞.结果:(1)芯片内3个主流道的长度均为1cm,高度均为45μm,中间主流道的宽度为570μm,两侧主流道的宽度均为500μm.设计流道间孔径的长度均为30μm,宽度和高度均为10μm,孔径的间距均为15μm.(2)甩两层光刻胶,第1层结构高度为10μm、第2层结构高度为35~40μm、总高度约为45μm的芯片模板进行后续试验.(3)A、B、C三通道进样流速比为5∶6∶5.(4)明场下神经元、星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞在微流控芯片内以星形胶质细胞为桥梁背靠背生长.结论:本研究设计一种神经血管单元三细胞共培养微流控芯片,使3种要素细胞以星形胶质细胞为桥梁在同一平面肩并肩生长,能更好地模拟体内细胞所处的微环境,有助于细胞间相互作用、信号传导和信息交流的研究.

丁苯酞软胶囊治疗缺血性脑卒中患者的疗效及对侧支循环血流、神经功能的影响

目的探讨丁苯酞软胶囊对缺血性脑卒中(CIS)患者的临床疗效及对侧支循环血流、神经功能的影响。方法125例CIS患者,随机分为参照组(62例)和研究组(63例)。两组患者入院后均立即采取对症支持治疗,参照组采取阿司匹林肠溶片+阿托伐他汀+血栓通注射液治疗,研究组在参照组基础上增加丁苯酞软胶囊进行治疗。比较两组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及临床疗效,侧支循环血流情况(侧支循环开放支数、平均血流速度、血流分级)。结果研究组患者的NIHSS评分(3.08±1.92)分低于参照组的(5.29±2.56)分,差异具有统计学意义(t=5.466,P=0.000<0.05)。研究组患者的总有效率96.83%高于参照组的83.87%,差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组侧支循环开放支数(3.31±0.87)支多于参照组的(2.47±1.07)支,差异具有统计学意义(t=4.819,P=0.000<0.05)。研究组大脑前动脉(ACA)、大脑中动脉(MCA)、大脑后动脉(PCA)平均血流速度均高于参照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组椎动脉(VA)、基底动脉(BA)平均血流速度对比差异无统计学意义(P>0.05)。研究组侧支循环血流分级改善率84.13%高于参照组的43.55%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞软胶囊能促进CIS患者侧支循环开放,提高侧支循环血流速度和分级,显著改善神经功能缺损症状,疗效显著,值得应用。

瘦素在神经退行性疾病所起作用研究进展

瘦素（leptin）是一种新近发现的由肥胖基因（OB）合成的蛋白质类激素，分子量为16KDa，其主要由白色脂肪组织或细胞分泌，通过作用于下丘脑弓状核的瘦素受体（leptin receptor，lepR）而调节能量平衡。而研究E4-53已经证实lep R在外周皮层、海马、脑干和小脑等脑区均有非常广泛的表达，提示瘦素生理作用广泛。

神经介入治疗缺血性脑血管疾病的近远期疗效及并发症观察分析

目的研究在缺血性脑血管疾病患者的具体治疗当中,患者接受神经介入治疗的近远期效果及出现并发症的情况。方法选择在2015年6月~2017年2月期间在本院接受治疗的96例缺血性脑血管疾病患者作为探讨研究对象,根据患者治疗方式的差异将其随机均分成常规组与介入组,常规组的患者仅需要接受临床常规方法的治疗,介入组患者则需要在上述治疗基础之上联合接受神经介入治疗,对两组患者治疗前后的神经功能缺损情况进行分析,并对比双方患者的并发症发生情况。结果介入组患者治疗后的神经功能缺损情况明显弱于常规组,且发生并发症的例数明显较少,两组患者的相关数据在比较之后存在显著统计学差异(P<0.05)。结论在缺血性脑血管疾病患者的具体治疗当中,患者接受神经介入治疗的效果较好,此疗法值得应用。

GSTP1通过调节JNK通路抑制癫痫大鼠海马区星形胶质细胞炎性激活

目的明确谷胱甘肽硫转移酶P1(GSTP1)对星形胶质细胞炎性激活的影响及相关分子机制。方法10周龄雄性SD大鼠采用腹腔注射氯化锂建立癫痫模型(n=8)并收集海马区脑组织。大鼠原代星形胶质细胞给予不同浓度脂多糖(0μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml)诱导处理48 h。利用蛋白质印迹检测组织与细胞中GSTP1、JNK、p-JNK蛋白表达水平,以酶联免疫吸附试验检测TNF-α、IL-1β、IL-6浓度,以高效液相色谱测定谷氨酸(Glu)浓度。将GSTP1过表达载体瞬时转染至脂多糖诱导星形胶质细胞,并给予茴香霉素处理,观察星形胶质细胞炎性激活情况。结果癫痫大鼠海马区脑组织中GSTP1蛋白表达水平低于正常大鼠,而p-JNK蛋白表达水平与TNF-α、IL-1β、IL-6、Glu浓度高于正常大鼠(P<0.05)。GSTP1与p-JNK蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。脂多糖诱导星形胶质细胞炎性激活,表现为GSTP1蛋白表达水平呈剂量依耐性降低,而p-JNK蛋白表达水平与TNF-α、IL-1β、IL-6、Glu浓度呈剂量依耐性升高(P<0.05)。过表达GSTP1抑制脂多糖诱导星形胶质细胞炎性激活,而茴香霉素可以部分逆转GSTP1的抑制作用。结论GSTP1对癫痫大鼠海马区星形胶质细胞炎性激活具有抑制作用,其分子机制与抑制JNK通路激活相关。

视频宣教的临床护理干预在支气管哮喘患者中的应用效果分析

目的:分析视频宣教的临床护理干预在支气管哮喘患者中的应用效果。方法:选取2020年1月—2022年6月深圳市龙华区中心医院神经内科收治的150例患有支气管哮喘的患者,按随机数字表法分成观察组(n=75例)与对照组(n=75例)。对照组采用常规的护理方式。观察组采用视频宣教的临床护理干预。比较两组护理质量,焦虑情绪、依从性、生活质量,以及两组护理满意度。结果:干预后,两组服务质量和操作能力、沟通能力均提高,且观察组服务质量和操作能力、沟通能力优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,观察组患者的焦虑情绪评分低于对照组,依从性和生活质量水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的护理满意度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:视频宣教的临床护理干预可以有效地增加临床治疗中患者的服药依从性,提高治疗质量,提升患者的满意度,值得临床应用。

TCD发泡试验在隐源性缺血性卒中诊断中的应用价值

目的:探究经颅多普勒(TCD)发泡试验在隐源性缺血性卒中诊断中的应用价值。方法:回顾性分析2021年1月-2022年12月深圳大学总医院收治的不明原因缺血性脑卒中患者60例的临床资料,均进行TCD发泡试验检查、经食管超声心动图检查,比较两种方法的检查结果。结果:TCD发泡试验对卵圆孔未闭检出率与经食管超声心动图比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。经绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析,TCD发泡试验诊断卵圆孔未闭相关缺血性脑卒中的曲线下面积0.911(95%CI 0.824~0.998),灵敏度85.19%,特异度96.97%。TCD发泡试验诊断卵圆孔未闭右向左分流半定量分级与经食管超声心动图的一致性良好(Kappa值=0.751)。结论:PFO是临床常见的隐源性缺血性卒中的致病因素,TCD发泡试验和经食道超声在筛查PFO有很高的一致性,TCD发泡试验是筛查PFO相关性卒中的关键检查。

“一站式”杂交手术在Stanford A型主动脉夹层患者治疗中的应用价值

目的研究"一站式"杂交手术在Stanford A型主动脉夹层患者治疗中的应用价值。方法选取2015年至2018年期间到北京大学深圳医院就诊的200例Stanford A型主动脉夹层患者进行研究,按数字表法随机分为研究组及常规组,每组100例。结果研究组患者addition EuroSCORE>7%以及Logistics EuroSCORE>6%的比例明显高于常规组,差异有统计学意义(66.0%vs. 36.0%,P<0.001;74.0%vs. 39.0%,P<0.001)。研究组患者比常规组患者具有更高的手术风险,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者体外循环时间以及主动脉阻断时间比常规组均明显缩短,术后重症监护病房初次停留时间比常规组明显长,差异有统计学意义(P<0.001)。两组患者围术期死亡及术后30 d主要复合不良事件、脑卒中、截瘫、肾功能不全需血液透析辅助治疗的发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 "一站式"杂交手术在Stanford A型主动脉夹层患者治疗能够缩减体外循环时间及主动脉阻断时间、降低患者手术创伤、提高手术安全。

轻型急性缺血性卒中rt-PA静脉溶栓的疗效和安全性研究

目的探讨轻型急性缺血性卒中rt-PA静脉溶栓的疗效和安全性及预后不良的危险因素。方法前瞻性分析从2016年1月～2018年5月在深圳市6个卒中中心接受rt-PA静脉溶栓的急性缺血性卒中患者临床资料共224例,将美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)≤5分定义为轻型卒中(minor stroke,MS),共116例,NIHSS> 5分为非轻型卒中(non-minor stroke,NMS),共108例。比较两组基线资料、两组治疗后90 d改良Rankin评分(mRS)、治疗后7 d内症状性颅内出血(symptomatic intracerebral hemorrhage,s ICH)及早期神经功能恶化(early neurological deterioration,END)发生率、90 d死亡率的差异。运用单因素及多因素logistic回归分析探讨影响rt-PA静脉溶栓的MS患者预后不良的危险因素。结果两组基线资料中,与NMS组相比,MS组心源性栓塞型卒中比例更低(7. 8%vs 17. 6%,P=0. 026),而小动脉闭塞型卒中比例明显更高(41. 4%vs24. 1%,P=0. 006)。疗效性上,MS组90 d预后良好(mRS≤2分)比例明显高于NMS组(87. 9%vs 63%,OR6. 099,95%CI 2. 650～14. 040,P <0. 001)。安全性上,MS组7 d内END发生率高于NMS组(5. 2%vs 4. 6%); 7 d内s ICH发生率低于NMS组(4. 3%vs 6. 5%); 90 d内死亡率低于NMS组(1. 7%vs 7. 4%),校正前后差异均无统计学意义。单因素Logistic回归分析提示即使接受静脉溶栓治疗,大动脉粥样硬化型卒中、END、既往缺血性脑卒中病史、既往接受抗血小板治疗与MS患者预后不良相关,而多因素logistic回归分析提示只有END与预后不良相关。结论与NMS相比,MS患者接受rt-PA静脉溶栓有助于改善90 d的神经功能预后,安全性与NMS相似。即使接受rt-PA静脉溶栓治疗,END仍然是MS患者预后不良的独立危险因素。

后交通动脉类型与急性缺血性脑卒中静脉溶栓早期疗效的相关性

目的探讨后交通动脉(PCoA)类型及开放与否与急性缺血性脑卒中(AIS)患者经重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗后早期疗效的相关性。方法经rt-PA静脉溶栓治疗的AIS患者67例,筛选出43例。CT血管成像(CTA)或头部核磁共振血管显像(MRA)作为评估PCoA是否开放的标准,静脉溶栓后14 d美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分作为疗效评价。结果 PCoA开放的AIS患者静脉溶栓治疗后14 d NIHSS评分明显低于未开放者(P<0.05)。结论 PCoA开放的AIS患者经rt-PA静脉溶栓治疗较未开放患者早期疗效明显改善。

急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块特性与血浆正五聚蛋白3、超敏C反应蛋白的相关性研究

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者颈动脉粥样硬化斑块特性与血浆正五聚蛋白3(PTX3)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的相关性。方法将120例ACI患者根据颈动脉彩超检查结果分为不稳定斑块组(USP组,n=40)、稳定斑块组(SP组,n=42)和无斑块组(NP组,n=38)。另外选取同时期40例健康体检者为对照组。检测所有研究对象血浆PTX3、hs-CRP水平,并行颈动脉彩超检查,测量颈动脉内膜中层厚度(CIMT)。比较各组血浆PTX3、hs-CRP水平和CIMT。采用Pearson相关性分析探讨血浆PTX3、hs-CRP水平与CIMT的相关性,多因素Logistics回归分析探讨ACI发病和ACI患者颈动脉粥样硬化斑块发生的相关因素。结果USP组、SP组、NP组血浆PTX3、hs-CRP水平及CIMT高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血浆PTX3、hs-CRP水平在USP组、SP组、NP组均呈逐渐降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血浆PTX3、hs-CRP水平与CIMT呈正相关(P<0.05);多因素Logistics回归分析显示,PTX3和hs-CRP为ACI发病和ACI患者颈动脉不稳定斑块的独立影响因素(P<0.05)。结论ACI患者血浆PTX3、hs-CRP水平明显提升,且与颈动脉粥样硬化斑块稳定性有密切关系,因此早期监测有助于预测ACI发生。

G蛋白α亚基q类蛋白p.R183Q杂合突变对脑微血管内皮细胞增殖与氧化应激的影响

目的探讨脑面血管瘤病致病基因G蛋白α亚基q类蛋白(GNAQ)p.R183Q杂合突变对人脑微血管内皮细胞(HBMEC)增殖、氧化应激及内皮间充质转化(EndMT)的影响及机制。方法将HBMEC分为对照组、野生型组、突变型组及联合型组(n=3),分别转染空白载体、GNAQ过表达载体、GNAQ p.R183Q突变过表达载体及GNAQ过表达载体+GNAQ p.R183Q突变过表达载体。采用酶联免疫吸附试验检查丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。实时荧光定量PCR检测平滑肌肌动蛋白α2(ACTA2)、波形蛋白(VIM)、E钙黏蛋白(CDH1)mRNA表达,蛋白质印迹检测GNAQ、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)p65及磷酸化核因子抑制蛋白(p-IκBa)蛋白表达。结果野生型组、突变型组及联合型组GNAQ蛋白表达较对照组明显升高(5.27±0.43,5.60±0.51,5.15±0.39 vs 1.00±0.08,P<0.05)。与对照组比较,野生型组细胞增殖能力、SOD、GSH-Px、CDH1 mRNA明显升高,而活性氧、超氧阴离子自由基及丙二醛水平明显降低,ACTA2 mRNA、VIM mRNA、p-p38 MAPK、p-NF-κB p65、p-IκBa蛋白表达明显下调(P<0.05)。与野生型组比较,突变型组和联合型组细胞增殖能力、SOD、GSH-Px、CDH1 mRNA表达明显降低,活性氧、超氧阴离子自由基、丙二醛水平明显升高,ACTA2 mRNA、VIM mRNA、p-p38 MAPK、p-NF-κB p65及p-IκBa蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论GNAQ p.R183Q杂合突变发挥显性负效应抑制HBMEC细胞增殖、促进氧化应激与EndMT,机制可能与丝裂原活化蛋白激酶与NF-κB通路激活有关。

Nrf2调控小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除中的作用机制

目的探讨核因子红系相关因子2(Nrf2)介导的小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除和功能恢复中的作用机制。方法通过注射Ⅳ型胶原酶复制小鼠脑出血模型。C57BL/6小鼠34只,随机分为对照组、脑出血组、脑出血+红曲素组、脑出血+血脂康组;雄性Nrf2基因敲除小鼠(Nrf2^(-/-))C57BL/6小鼠8只,为脑出血+Nrf2^(-/-)组。采用改良Garcia评分评价神经功能;检测血红蛋白水平;采用Western blotting测定Nrf2、CD80、CD206、促炎因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、髓样细胞上表达的Ⅰ型受体(Trem1)和抗炎因子脑源性神经营养因子(BDNF)、髓样细胞上表达的Ⅱ型受体(Trem2)表达,采用免疫荧光测定Nrf2、CD80、CD206、Trem1和Trem2;采用Pearson法对Trem1、Trem2与改良Garcia评分,Trem2与血红蛋白进行相关性分析。结果与脑出血组比较,脑出血+红曲素组及脑出血+血脂康组的血红蛋白水平降低(P<0.05),改良Garcia评分增加(P<0.05),Trem2、CD206、BDNF相对表达量增加(P<0.05),Trem1、CD80、TNF-α相对表达量下降(P<0.05);脑出血+Nrf2^(-/-)组血红蛋白水平升高(P<0.05),改良Garcia评分降低(P<0.05),Trem2、CD206、BDNF相对表达量降低(P<0.05),Trem1、CD80、TNF-α相对表达量升高(P<0.05)。Trem1蛋白表达与改良Garcia评分呈负相关(r=-0.956,P<0.05),Trem2蛋白表达与改良Garcia评分呈正相关(r=0.936,P<0.05)。Trem2蛋白表达与血红蛋白呈负相关(r=-0.473,P<0.05)。结论Nrf2可通过调控小胶质细胞的功能转化,影响脑出血后血肿清除;Nrf2激动剂——红曲素及血脂康可通过上调Trem2、CD206、BDNF的表达强化小胶质细胞的吞噬功能,促进血肿产物的清除并促进神经修复;同时可下调Trem1及CD80、TNF-α的表达,抑制小胶质细胞的炎症反应,减轻出血后血肿及神经毒性而发挥神经保护作用。

急性脑梗死患者血清淀粉样蛋白A水平与脑卒中关系的Meta分析

脑卒中分为出血性脑卒中和缺血性脑卒中,出血性脑卒中俗称脑出血,缺血性脑卒中即脑梗塞。脑卒中的定义十分广泛,其中包含了脑梗死,其根本的危险因素在于血管。患者通常伴有严重的基础性疾病,其血管弹性下降,动脉硬化或血管畸形继而引发脑卒中。血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)属于急性时相反应蛋白(acute phase reaction protein,APRP),对高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)的活性可产生一定的影响,其通过参与胆甾醇的运输过程,加速脂类物质的集聚,促进动脉纤维斑块的形成[1-3]。既往研究结果显示SAA对评估冠心病的严重性十分关键,但尚未明确能否评估急性脑梗死。为探讨急性脑梗死患者SAA水平与脑卒中的关系,笔者纳入了关于急性脑梗死患者SAA水平与脑卒中关系的文献进行Meta分析,报告如下。

抗GM1抗体在格林-巴利综合征患者中的表达及与预后的关系研究

目的探讨抗GM1抗体在格林-巴利综合征患者中的表达及与预后的相关性。方法选取2016年5月至2019年5月疑诊周围神经病的患者106例,其中符合格林-巴利综合征诊断标准的患者57例,设为观察组;同期其他患者49例,设为对照组。采用酶联免疫吸附试验测定两组抗GM1、GM3、GD1b及GQ1b抗体阳性率;观察组所有患者均给予丙种球蛋白治疗干预,根据患者预后分为预后良好组与预后不良组;采用酶联免疫吸附试验测定不同预后下抗GM1、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平;采用全自动生化分析仪完成白细胞计数测定;采用Pearson相关性分析软件对抗GM1抗体阳性率与预后完成相关性分析。结果观察组患者抗GM1、GM3、GD1b及GQ1b抗体阳性率均高于对照组(P<0.05);两组炎症因子CRP、PCT、白细胞计数水平比较差异无统计学意义;57例患者轻度23例,中度20例,重度14例,轻度患者抗GM1、GM3、GD1b及GQ1b抗体阳性率低于中度和重度患者(P<0.05);中度患者抗GM1、GM3、GD1b及GQ1b抗体阳性率低于重度患者(P<0.05)。观察组均完成丙种球蛋白治疗,患者治疗后42例预后良好,占73.68%。格林-巴利综合征多有感染前驱症状,且抗GM1抗体阳性率以及炎症反应程度与其预后相关,预后良好组抗GM1抗体阳性率、CRP、PCT、白细胞计数水平均低于预后不良组(P<0.05);Pearson相关性分析结果表明:格林-巴利综合征患者抗GM1抗体阳性率与预后指标CRP、PCT、白细胞计数水平呈正相关性(P<0.05)。结论抗GM1抗体在格林-巴利综合征患者中阳性率较高,给予患者丙种球蛋白治疗预后良好,且与抗GM1抗体呈负相关性。

微小RNA-216a对体外氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡及自噬的影响

目的探讨微小RNA-216a(miR-216a)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、凋亡及自噬的影响。方法体外利用1、5、10、25及50 mg/L ox-LDL诱导HUVEC,采用实时荧光定量PCR检测miR-216a表达。在50 mg/L ox-LDL诱导的HUVEC中转染miR-216a拮抗剂(实验组)和拮抗剂阴性对照(对照组),并设计不给予任何处理的空白组。采用噻唑蓝比色法、Hoechst 33342染色及蛋白质印迹法检测细胞增殖、凋亡及自噬能力。结果随ox-LDL浓度增加,ox-LDL诱导的miR-216a表达呈剂量与时间依耐性上调(P<0.05)。实验组HUVEC中miR-216a表达较空白组和对照组明显降低(0.32±0.07 vs 1.00±0.16、1.04±0.21,P<0.05)。实验组HUVEC转染1、2及3 d吸光度值较空白组和对照组明显升高(P<0.05)。实验组HUVEC单个视野中凋亡细胞数较空白组和对照组明显减少(P<0.05)。实验组HUVEC中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达较空白组和对照组明显降低,Bcl-2、微管相关蛋白1轻链3B和自噬相关基因5表达较空白组和对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-216a在体外ox-LDL诱导的HUVEC中表达上调,干扰miR-216a促进HUVEC增殖和自噬,并抑制凋亡,提示miR-216a可能是ox-LDL相关血管内皮细胞损伤的潜在治疗靶点。

鸢尾素对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的影响及机制研究

目的探讨鸢尾素对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)形成的影响及机制。方法选择8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠10只(空白对照组)和ApoE基因缺失(ApoE^(-/-))小鼠30只(按随机数字表法分为ApoE^(-/-)阴性对照组、ApoE^(-/-)AS模型组和鸢尾素治疗组,每组10只)。空白对照组及ApoE^(-/-)阴性对照组以普通饲料喂养;ApoE^(-/-)AS模型组与鸢尾素治疗组饲以高脂饲料,鸢尾素治疗组将200mg·kg-1(按照预实验结果)鸢尾素溶液灌胃给药,连续给药8周。利用ELASA试剂盒检测各组小鼠外周血生化指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(ApoA1)和载脂蛋白B(ApoB)],利用HE染色观察鸢尾素对AS的治疗效果,RT-PCR和免疫组织化学方法检测各组小鼠氧化应激信号通路中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果ApoE^(-/-)AS模型组与ApoE^(-/-)阴性对照组相比,TG、TC、HDL-C、LDL-C、ApoA1和ApoB差异均有统计学意义(均P<0.05),证明AS模型构建成功。与ApoE^(-/-)AS模型组比较,鸢尾素治疗组TG、TC、LDL-C明显降低,HDL-C明显增高(均P<0.05)。HE染色显微镜下观察,鸢尾素治疗组小鼠主动脉粥样硬化斑块面积百分比明显小于ApoE^(-/-)AS模型组(P<0.05)。RT-PCR和免疫组织化学显示,鸢尾素治疗组小鼠VEGF mRNA相对表达量和VEGF蛋白表达量明显低于ApoE^(-/-)AS模型组(P<0.05或P<0.01)。结论鸢尾素可明显降低外周血中TC、TG等水平,提高HDL-C水平,减小AS斑块的形成,减少ApoE^(-/-)小鼠动脉中VEGF的表达,通过氧化应激信号通路对AS的治疗及预防起着积极的作用。

采用阿托伐他汀治疗脑小血管病性认知功能障碍的有效性分析

目的探讨评价脑小血管病性认知功能障碍采用阿托伐他汀进行治疗的有效性,为同类研究提供参考借鉴。方法 156例脑小血管病性认知功能障碍患者,按照入科时间将其交错、单盲分为常规治疗组和阿托伐他汀组,每组78例。两组患者均给予控血压、控血糖、抗栓等治疗,在此基础上,常规治疗组患者使用尼莫地平治疗,阿托伐他汀组患者在常规治疗组基础上给予阿托伐他汀治疗。比较两组患者的临床疗效、血脂指标、日常生活能力量表(ADL)与蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分。结果阿托伐他汀组治疗总有效率为92.31%,明显高于常规治疗组的75.64%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者TG、TC、LDL-C、HDL-C水平均较本组治疗前改善,且阿托伐他汀组改善程度优于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者ADL、MoCA评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者ADL、MoCA评分均较本组治疗前显著提高,且阿托伐他汀组提高程度优于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论阿托伐他汀治疗脑小血管病性认知功能障碍的效果显著,改善了患者的血脂指标,提高了患者的认知能力,可以推广、应用。

血清miR-18b-5p和miR-613在急性缺血性脑卒中的表达及临床意义

目的 检测血清miR-18b-5p和miR-613在急性缺血性脑卒中(AIS)的表达水平,并分析其临床意义。方法 筛选2018年1月至2019年12月在深圳市龙华区中心医院入院治疗的131例AIS患者,同时招募131例年龄和性别相匹配的健康对照者,所有参与者采集肘静脉血,常规提取血清中RNA并行反转录反应,利用实时定量聚合酶链反应检测miR-18b-5p和miR-613表达水平。分析miR-18b-5p和miR-613表达水平与临床指标的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-18b-5p和miR-613的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度。结果 AIS患者血清中miR-18b-5p表达水平低于健康对照者(t=4.192,P <0.01),而miR-613表达水平高于健康对照者(t=3.746,P <0.05)。miR-18b-5p低表达组AIS患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分与血糖水平高于miR-18b-5p高表达组AIS患者(t=2.985、2.035,P <0.05),而miR-613高表达组AIS患者NIHSS评分高于miR-613低表达组AIS患者(t=1.886,P <0.05)。miR-18b-5p、miR-613及二者联合检测AIS的AUC分别为0.72、0.67和0.82、敏感度分别为65.22%、62.18%和74.50%,特异度分别为71.57%、70.01%和81.29%(P <0.01)。结论 AIS患者血清中miR-18b-5p表达下调,而miR-613表达上调,二者与NIHSS评分相关。血清miR-18b-5p与miR-613可协助检测AIS,当二者联合应用时效果更佳。