临床中药炮制“火力火候”的掌握

临床用火炮制药材的方法主要的是炒法,即将净选或切制后的药材,置于加热容器内连续加热,并不断搅拌或翻动至一定程度的炮制方法。目前,炒法有人工操作和机器操作。临床临方炮制多采用人工炒制。《本草纲目》有"须识火候,不可太过不及"的记载。炒制时必须掌握好火候,做到"制药贵在适中",而火候是影响炮制品质量的要素。火候,从本草的历史考证看,"火"是中药炮制时火的运用,有微、文、中、武火之分(强、弱、温度高低、加热时间长短等);"候"药物在受热过程中内外出现的变化特征或附加判别特征(如滴水、糊纸、辅料变化等);两者间有直接联系。其变化特征根据传统经验,一般可从形、色、气味、质等方面观察判断。

马钱苷在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制

目的探究马钱苷对脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护效果及作用机制。方法采用线栓法构建SD大鼠CIRI模型,分为假手术组、CIRI组、CIRI+马钱苷低剂量(5 mg/kg)组、CIRI+马钱苷中剂量(10 mg/kg)组、CIRI+马钱苷高剂量(15 mg/kg)组,其中假手术组仅分离颈总动脉、颈外动脉,不进行栓塞。CIRI+马钱苷低、中、高剂量组分别给予不同剂量马钱苷,假手术组与CIRI组给予0.9%氯化钠溶液,连续给药7 d。TTC法、Tunel染色法观察大鼠脑组织梗死率和神经细胞凋亡情况;ELISA法测定大鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量。采用氧糖剥夺/复氧(OGD/R)法构建神经瘤母细胞(N2a)CIRI模型,分为正常对照组、OGD/R组、OGD/R+马钱苷低剂量(10μmol/L)组、OGD/R+马钱苷中剂量(20μmol/L)组和OGD/R+马钱苷高剂量(30μmol/L)组,干预24 h。乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞LDH释放率,流式细胞术测定细胞凋亡情况。qRT-PCR法分别测定各组大鼠脑组织和各组N2a中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X基因(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达水平,Western blot法分别测定各组大鼠脑组织和各组N2a中NF-κB、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38/p38)、活化Caspase-3/Caspase-3(cleaved-Caspase-3/Caspase-3)蛋白表达水平。结果与假手术组相比,CIRI组大鼠脑梗死率和神经细胞凋亡率升高(均P<0.01),血清IL-1β、IL-6和TNF-α质量浓度均升高(均P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平降低(P<0.01),Bax、Caspase-3 mRNA和NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均升高(均P<0.01);相比CIRI组,CIRI+马钱苷中、高剂量组大鼠脑梗死率和神经细胞凋亡率均下降(均P<0.05),血清IL-1β、IL-6和TNF-α质量浓度均降低(均P<0.05),NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达均降低(均P<0.05);CIRI+马钱苷低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达水平均升高(均P<0.05),Bax、Caspase-3 mRNA表达水平均降低(均P<0.05)。与正常对照组相比,OGD/R组细胞LDH释放率和凋亡率均增加(均P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平降低(P<0.05),Bax、Caspase-3 mRNA和NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均升高(均P<0.01);相比OGD/R组,OGD/R+马钱苷中、高剂量组细胞LDH释放率和凋亡率均降低(均P<0.01),NF-κB、p-p38/p38、cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平均降低(均P<0.05);OGD/R+马钱苷低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达水平均升高(均P<0.05),Bax、Caspase-3 mRNA表达水平均降低(均P<0.05)。结论马钱苷可通过调控p38/NF-κB信号通路抑制炎症反应,减少神经细胞凋亡来改善体内外CIRI。

小檗碱对人非小细胞肺腺癌细胞迁徙转移的影响及其分子机制的研究

目的:观察低剂量的小檗碱的抗肿瘤活性,并探讨其抑制肿瘤细胞增殖及肿瘤转移的分子机制。方法:以人非小细胞肺腺癌A549为模型,用0、5、10、20、30μmol/L的小檗碱处理处于对数期增长的A549细胞24小时或者30μmol/L的小檗碱处理细胞不同时间。侵袭小室以及基质凝胶转移实验检测A549细胞的侵袭与迁移能力;免疫印迹方法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、上皮钙黏素(E-Cadherin,N-Cadherin)以及细胞信号转导分子(Stat3)的表达。结果:20、30μmol/L小檗碱孵育A549细胞48h后,其迁移与侵袭率显著降低;免疫印迹结果显示小檗碱能显著抑制Stat3转移到细胞核内;此外,抑制Stat3表达后,能显著抑制MMP以及N-Cadherin而增强E-Cadherin的表达。结论:小檗碱通过抑制Stat3转移到细胞核从而调节MMP的表达和A549细胞转移和迁徙。