贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性

目的建立一种简便有效的体外分离纯化及培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法。研究MSCs的生物学特性,为血管组织工程提供理想的种子细胞。方法贴壁培养法分离纯化大鼠MSCs体外培养和连续传代,在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化;利用MTT法测定MSCs的生长曲线;行免疫组化方法鉴定MSCs膜抗原;分别加成骨、成脂肪诱导剂后MSCs体外培养1到3周,分别做碱性磷酸酶(ALP)、VonKossa染色及油红O染色,观察细胞形态变化、成骨及成脂肪分化结果。结果MSCs体外培养生长状况良好,呈均一的成纤维细胞样,表达波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),不表达层粘连蛋白(Laminin)、CD34、VIII因子相关抗原(VIII)。经体外诱导后具有多向分化潜能。结论贴壁培养法能有效分离纯化大鼠MSCs,用此方法培养的细胞生长稳定,增殖能力活跃,具有MSCs的一般生物学特性,为其成为血管组织工程理想的种子细胞提供了进一步的支持。

组织工程血管种子细胞的研究进展

组织工程血管种子细胞的来源、制取、培养分化、验证及种植已成为组织工程血管研究的关键步骤。目前常用的种子细胞是血管内皮细胞,干细胞如内皮前体细胞、间充质干细胞、脂肪干细胞等,尤其是间充质干细胞及脂肪干细胞具有易于分离培养、增殖能力强和可定向分化为内皮细胞及平滑肌细胞的特点而成为热点研究的种子细胞,干细胞的研究进展将会促进组织工程血管的临床应用。

复杂重症先天性心脏病婴幼儿合并肺部感染的手术治疗

先天性心脏病（先心病）是婴幼儿重症肺炎的高危因素之一,先心病合并重症肺炎患儿的病死率较高[1-2].先天性心脏畸形婴幼儿因心内异常分流易导致反复的呼吸道感染,心肺功能均有不同程度的损害,一旦发生肺部感染,因患儿体质差或合并心功能不全,感染通常不易控制,易反复,且病情重,变化快[3].因此,复杂重症先心病合并肺部感染的治疗就更加困难.我们收治了19例复杂重症先心病合并术前肺部感染患儿,现将治疗经验报告如下.

小鼠心肌组织3种总RNA提取方法比较

目的:探索一种高效的心肌组织总RNA提取方法,对以后总RNA提取工作进行指导。方法:取小鼠心肌组织,分别采用剪刀剪碎法(剪碎法)、研钵加液氮研磨法(研磨法)、离心柱法(过柱法)对小鼠心肌组织进行总RNA提取,紫外分光光度计定量,聚丙烯酰胺凝胶电泳初步定性。结果与结论:研磨法提取出的总RNA量大,质量可靠,较适合于日常总RNA提取;剪碎法对于一些实验条件较差的地区仍然是一种可取的方法;过柱法对于小量心肌组织的提取较为适合。3种方法均能提取出总RNA。

血管组织工程的研究进展

血管组织工程是在体外构建有生理活性的血管移植物,为心血管外科临床提供新的血管替代物来源。介绍近年来血管组织工程所涉及的主要环节,包括支架材料、种子细胞及构建环境的新进展,显示该领域今后的发展方向。