创新型艾滋病黏膜疫苗之研究进展

人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）及其导致的艾滋病（acquiredimmunede．ficiencysyndrome，AIDS）已成为全球公共卫生的最重大挑战之一，严重危害了社会进步与经济增长。世界卫生组织（WHO）和联合国艾滋病规划署（UNAIDS）在2011年底公布，目前全球HIV感染者总人数约为3400万，已经死亡的艾滋病患者累计超过了3000万名，其中亚洲和东欧已经成为艾滋病病毒传播最为迅速的地区[1]。

云南省长期不进展HIV感染者病毒载量和CD4^+T淋巴细胞计数与中和抗体活性相关性分析

目的分析云南省长期不进展HIV感染者CD4+T淋巴细胞计数和病毒载量与中和抗体活性的相关性。方法选择云南省病程长期不进展(≥10年)的全部HIV感染者为研究对象,取得知情同意后,抽取10m L静脉血进行病毒载量测定、CD4+T淋巴细胞计数检测和HIV-1假病毒的中和实验。使用Excel建立数据库,并使用SPSS19.0进行数据处理和统计分析。结果长期不进展者血清对假病毒SF162,JRLF,CNE5,CNE11,CNE15均有一定的抑制作用;长期不进展者血清对假病毒CNE5的中和抑制率与病毒载量呈正相关(r=0.249,P=0.01);同时对假病毒JRLF(r=-0.211,P=0.021),CNE5(r=-0.281,P=0.002),CNE11(r=-0.191,P=0.036),CNE15(r=-0.202,P=0.027)的中和抑制率与最近一次CD4^+T淋巴细胞计数呈负相关。结论云南省长期不进展HIV感染者血清对不同传播途径感染的病毒具有广谱中和活性;中和抗体活性与病毒载量呈正相关,与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关。

抗人类免疫缺陷病毒广谱中和抗体与疫苗设计

自发现人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)30年来,科学家们不断探索有效的HIV-1疫苗,但至今效果不理想。由于"精英患者"的广谱中和血清能起到有效的抗病毒作用,研究人员希望通过对体液保护免疫机制的研究,推动疫苗的设计和优化,为尽早研发成功HIV疫苗提供关键理论和技术支撑。近几年来,由于技术的突破和改进,从HIV感染者中分离获得广谱中和抗体的概率和数量大大提高。本文针对近几年来分离的有代表性的广谱中和抗体,根据其不同的识别位点分为四大类进行详细介绍,并总结了从研究广谱中和抗体中所获得的疫苗设计创新思路与启示。

在华非洲黑种人艾滋病传播风险分析

目的了解在华非洲黑种人艾滋病的传播风险。方法采用问卷调查的方式对在华非洲黑种人进行面对面的调查,收集其对艾滋病的认知、高危性行为以及与当地居民的社会交往信息,以描述分析其艾滋病的传播风险。结果在艾滋病的认知方面,16.3%(17/104)的非洲黑种人不知道艾滋病会通过母亲怀孕传染给胎儿,15.5%(16/103)的人不清楚使用安全套能预防艾滋病,22.3%(23/103)的人不知道只与一个性伙伴发生性行为可以减少艾滋病传播。在高危性行为方面,过去6个月内发生性行为的非洲黑种人中,37.5%(9/24)的人性行为对象非配偶或情侣,41.7%(10/24)的人性伴数不止一个。30.8%(32/104)的非洲黑种人从来不使用安全套,1.0%(1/104)的人发生过男男性行为,4.8%(5/104)的人有过吸毒行为。在社会交往方面,55.3%(57/103)的非洲黑种人经常参加中国人的活动,34.0%(35/103)的人在居住地以外的城市居住过(3个月以上),平均每个非洲黑种人的中国朋友数为5名,67.3%(70/104)的非洲黑种人空闲时间与朋友聚会。结论在华非洲黑种人对艾滋病认知混杂,性伴多样,无保护性行为普遍存在,加强对在华非洲黑种人艾滋病防治和干预新模式的探索,对减少艾滋病的传播风险显得尤为重要。

构象锁定HIV-1融合抑制剂的合成及抗HIV-1活性研究

西夫韦肽(SFT)是一种有效抗HIV-1(Human Immunodeficiency Virus-1)融合抑制剂,它比已上市融合抑制药物T20拥有更高的药效及药代稳定性,目前已完成了IIb临床实验.以西夫韦肽为模板,通过构象锁定策略将多肽中原有的盐桥替换为共价键合成了SFT订书肽SFT-1和SFT-2.产物结构经圆二光谱确认形成了α-螺旋.对所有合成多肽进行了抗HIV-1活性检测,结果表明SFT订书肽对7个HIV-1假病毒株抑制活性均高于SFT,其中SFT-1对B'亚型和B'C重组亚型病毒株抑制活性最高,SFT-2对B、CRF01_AE和CRF08_BC亚型病毒株抑制活性最高.

HIV-1感染长期不进展者中env基因准种序列和中和活性相关性

目的分析1型艾滋病病毒(HIV-1)感染长期不进展者中病毒准种序列的特征和中和活性的相关性。方法选择云南省报告8年以上、未接受抗病毒治疗且CD4+T淋巴细胞计数>500个/μL的HIV-1感染者15例,通过假病毒中和实验对样品的中和活性进行分析,对三种不同基因型假病毒中和抑制率均>50%认为具有交叉中和活性,对env基因片段进行高通量测序和序列分析。结果5个样品具有交叉中和活性,另外10个样品无交叉中和活性。构成比>1%的准种在有交叉中和活性样品中的种类(15.80±0.86)多于无交叉中和活性样品中的种类(10.20±1.32)。构成比>1%的准种在有交叉中和活性样品中的合计构成比(0.4264±0.0401)小于无交叉中和活性样品中的合计构成比(0.6434±0.0227)。首位准种在有交叉中和活性样品中的比例(0.0823±0.0119)小于无交叉中和活性样品中的比例(0.2891±0.0307)。准种序列间在有交叉中和活性样品中的平均基因距离(0.0401±0.0023)大于无交叉中和活性样品中的平均基因距离(0.0173±0.0026)。结论HIV-1感染长期不进展者中准种序列的构成与中和活性有相关性,有交叉中和抗体活性的样品中优势准种在弱化,劣势准种得到增强,不同准种的频率差异减小,准种间的基因距离增加。

抗人CD4单克隆抗体制备及其抗HIV-1功能鉴定

目的制备具有抗HIV-1功能的抗人CD4单克隆抗体。方法构建人CD4真核表达质粒pcDNA3.1-hCD4,将该质粒DNA免疫BALB/c小鼠。免疫前血清作为阴性对照,通过HIV-1假病毒中和实验和ELISA方法检测多克隆抗体血清。通过杂交瘤技术制备鼠抗CD4单克隆抗体,HIV-1假病毒中和实验进行筛选。通过不同亚型假病毒中和实验和CD4D1D2蛋白ELISA方法分别检测腹水纯化单克隆抗体的中和活性和特异性结合力。结果 DNA免疫后第6周的多抗血清100倍稀释后对HIV-1假病毒的抑制率可达75%,第8周其抑制率可上升至95%。CD4D1D2蛋白ELISA结果显示,免疫后第4周多抗血清就显示出同CD4蛋白较强的特异性结合。共获得160余株对HIV-1假病毒B′、BC、AE亚型具有中和活性的单克隆抗体。选择其中中和活性较高的8株制备纯化腹水单抗,其中5株单抗IC50小于130μg/ml。ELISA检测结果显示腹水纯化单抗与CD4D1D2蛋白可以特异性结合。结论获得了具有抗HIV-1假病毒的抗CD4单克隆抗体。具有HIV-1广谱中和活性的抗CD4抗体可用于研发有效的被动免疫制剂,控制艾滋病传播。