蝙蝠蛾幼虫肠道真菌复合体中的多菌种与中国被毛孢分生孢子联合侵染蝙蝠蛾幼虫提高侵染效能

摘要：应用真菌特异性引物PCR测序、克隆测序和SNP质谱基因分型法，鉴定2株蝙蝠蛾幼虫活体肠道的真菌分离株（CHl和CH2）中的多种菌物。应用这2株分离株与中国被毛孢分生孢子联合侵染蝙蝠蛾幼虫，观察其协同侵染活性。结果表明这2株分离株呈现中国被毛孢的体外培养生长和显微形态特征。通用引物ITS4／5和蝙蝠蛾拟青霉特异性引物Pp4／5扩增子测序检出蝙蝠蛾拟青霉和中国被毛孢ITS序列。扩增子克隆一测序和SNP基因分型法证实多种转换和颠换点突变基因型在2株分离株中共存。反复固体、液体培养证实蝙蝠蛾拟青霉和中国被毛孢ITS序列共存，并非真菌间DNA片段漂移。应用子囊孢子或中国被毛孢侵染4～5龄蝙蝠蛾幼虫，幼虫染菌率为1．37％～3．52％，幼虫变僵时间为35～50d。应用2株分离株与中国被毛孢分生孢子联合侵染，幼虫变僵时间为5—8d，染菌率达55．2％（P〈0．001），侵染效能提高15～39倍。蝙蝠蛾拟青霉和多种点突变基因型冬虫夏草菌（包括中国被毛孢）在蝙蝠蛾幼虫肠道以天然真菌复合体形式共存；多种菌物组成的侵染源联合侵染蝙蝠蛾幼虫大幅度提高侵染效能，呈现多菌协同侵染的共生关系。

中药冬虫夏草和所含多种冬虫夏草菌拉丁名混用的历史和现状

中药冬虫夏草是冬虫夏草菌和蝠蛾科幼虫尸体的物种混合体。但冬虫夏草和冬虫夏草菌使用同一拉丁名Ophiocordyceps sinensis(≡Cordyceps sinensis),导致特指概念不清和争议,甚至影响政府的政策法规的制订和大众的市场消费心理。该文综述了冬虫夏草(虫菌复合体)和冬虫夏草菌拉丁名混用的历史考证和现状,以及文献中有关天然冬虫夏草更名的建议。有学者建议O.sinensis用于多种冬虫夏草菌,而中药冬虫夏草改用Chinese cordyceps,不设拉丁名。另有学者建议中药冬虫夏草更名为Ophiocordyceps&Hepialidae。这些建议有待学界达成共识。该文也分析2011年世界菌物学会IMA颁布《阿姆斯特丹宣言》以来学界在争议中实施"One Fungus=One Name",进一步加剧了拉丁名特指概念的混乱。IMA为解决争议设立了争议解决机制。解决这一拉丁名的混用和争议需要菌物、动物和中药分类学家通力合作,共同努力。

天然冬虫夏草多菌共存生物体分子异质性的检验与讨论

中药冬虫夏草数百年来用于滋补保健、疾病防治和病后康复,但有关冬虫夏草菌的学术争议一直没有停止。中国被毛孢是冬虫夏草菌的无性世代学说较为流行,然而学界尚未获得证实这一学说的直接证据。部分间接证据来自于分子系统学微观和宏观研究。该文回顾了冬虫夏草分子系统学文献,讨论了微观研究和宏观研究的实验方法、数据分析方法及其结果。冬虫夏草分子生物学微观研究不断获得新证据,证明天然冬虫夏草基因组DNA的多元异质性,揭示冬虫夏草中含有的多种真菌和多种突变基因型冬虫夏草菌,证明冬虫夏草是多种真菌与蝙蝠蛾幼虫尸体构成的复杂的菌虫物种复合体。随着冬虫夏草的成熟,在僵虫体和子座中多种菌物的差异存在巨大的、非同步的动态变化。宏观分子系统学研究的丰度加权算法揭示在僵虫体、子座和子囊果中分子标记多态性的高度差异及其在冬虫夏草成熟过程中的动态变化。这些分子系统学研究结果支持冬虫夏草是"一个统一微生态系统"的学说。