SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响

目的构建rAAV-SHH-N-EGFP载体并检测其对神经干细胞增殖相关基因影响。方法分离并培养大鼠脑室下区神经干细胞,提取RNA、反转录、PCR得到SHH-N的cDNA,克隆入pSNAV2.0-CMV-IRES-EGFP,包装得到腺相关病毒rAAV-SHH-N-EGFP,感染神经干细胞48 h后,采用实时定量PCR检测SHH信号通路下游相关基因的mRNA水平变化,并观察rAAV-SHH-N-EGFP载体在神经干细胞内的表达情况。结果 (1)克隆得到SHH-N基因,测序结果与NCBI报道序列一致。(2)成功构建pSNAV2.0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP表达载体并鉴定,包装得到rAAV-SHH-N-EGFP。(3)实时定量PCR分析rAAV-SHH-N-EGFP感染神经干细胞48 h后,rAAV-SHH-N-EGFP处理组较感染rAAV-EGFP的对照组,Gli1和Nmyc的mRNA水平上调。(4)rAAV-SHH-N-EGFP可有效感染神经干细胞,在感染14 d后稳定表达SHH-N。结论成功构建rAAV-SHH-N-EGFP过表达载体并使其在神经干细胞内稳定表达。过表达SHH-N可使神经干细胞内SHH信号通路相关基因Gli1转录水平上调,并使细胞增殖相关基因Nmyc转录水平上调。

三叉神经减压术治疗三叉神经痛继发抑郁症患者1例

我科收治1名三叉神经痛继发抑郁症的患者,采用三叉神经显微血管减压术,术后疼痛消失,同时抑郁症状显著缓解。 方法 1.一般资料男性,60岁,阵发性右侧面部疼痛30年。患者1980年无明显诱因出现发作性右侧面部刀割样疼痛,右鼻翼、颧部、下齿龈、下唇、下颌有扳机点,疼痛多于进食、洗脸、刷牙时诱发。发病以来口服卡马西平减轻疼痛。1990年行射频治疗1周后疼痛复发。疼痛发作时VAS评分为8分。