微生物转化法生产睾酮的发酵工艺改进

原发酵条件中的底物浓度过低,致使发酵液中的产物浓度不高,就提高底物浓度后的其它发酵条件进行了调整,通过正交实验,获得了最佳的发酵培养基配方,最后通过50 L放大发酵获得了成功,发酵液中产物浓度可达3 619 mg/L。

珍珠质水溶性基质蛋白的分离纯化及其对碳酸钙结晶的影响

珍珠质是由大于95 %的碳酸钙晶体与少量有机大分子组成的生物矿化产物 ,其中含量小于5%的基质蛋白 (matrixprotein)对碳酸钙晶体的形成进行严格控制。为深入研究珍珠质基质蛋白对碳酸钙结晶的调控作用 ,本研究利用水提法从合浦珠母贝 (Pinctadafucata)珍珠质中提取出水溶性基质 (WaterSolubleMatrix,WSM) ,并利用反相HPLC分离得到3个主要蛋白组分(FI-III)。氨基酸组成分析表明 ,WSM及其3种组分富含甘氨酸、天冬氨酸、丙氨酸与亮氨酸。体外饱和碳酸钙溶液结晶实验表明 ,WSM能显著影响体外碳酸钙晶体的形成 ;其3种组分对碳酸钙晶体形成的作用并不相同 :组分FI和组分FII加速晶体的形成 ,而组分III则抑制晶体的形成。本研究首次发现在珍珠质中同时存在抑制和促进晶体形成的两种蛋白质因子 ,推测珍珠质致密有序结构的形成是正。

合浦珠母贝β-肌动蛋白基因的克隆和序列分析

为进一步研究珍珠质基质蛋白外排机制,同时为今后合浦珠母贝(Pinctada fucata)不同组织的基因表达研究提供阳性对照,根据大鼠(Rattus norvegicus)胞质型肌动蛋白β-actin设计引物,通过RT-PCR方法克隆鉴定了合浦珠母贝肌动蛋白同源基因片段。序列分析表明,该片段编码的氨基酸序列与相应同源片段具有较高的保守性。合浦珠母贝β-肌动蛋白有多个特有的氨基酸残基。合浦珠母贝可能是在系统进化上较早分出的一支。

LPS和IL-2对合浦珠母贝血细胞iNOS活性的影响

建立了一种合浦珠母贝血细胞原代培养方法,为贝类免疫学研究提供实验平台。通过台盼兰染色法检测细胞活力,结果显示:7d内细胞生长状态稳定,并且培养基中的FBS对细胞生长活力没有显著影响。以细胞中iNOS活性为检测指标,详细研究了LPS和IL-2对合浦珠母贝血细胞的激活作用。结果表明:LPS和IL-2对iNOS活性的诱导作用表现出浓度和时间依赖的特征。刺激后36h左右iNOS活性达到最大,LPS和IL-2的最佳诱导剂量范围分别为1～10g/mL和10～100ng/mL,并且IL-2对iNOS活性的激活作用较LPS快。

河豚毒素的分布及动物对它的拮抗作用

综述了河豚毒素在各种脊椎动物、无脊椎动物(体内或体表)和微生物中的分布,分析了不同动物对河豚毒素的拮抗作用的方式和机理,并提出了进一步研究的一些建议。