沉默核仁素可诱导大鼠神经干细胞的分化

目的探讨核仁素(nucleolin)对原代神经干细胞(NSCs)分化的影响及其相关机制。方法构建核仁素siRNA腺病毒表达载体,将经鉴定正确的重组腺病毒质粒转染HEK293A细胞,包装得到具有感染能力的nucleolin-siRNA重组腺病毒。病毒体外感染原代NSCs,采用Western blot检测nucleolin蛋白的表达情况,Nucleolin-siRNA对神经干细胞Nestin、Wnt3、β-catenin蛋白表达的影响;采用免疫细胞化学检测nucleolin-siRNA对神经干细胞分化的影响。结果经酶切和测序鉴定均证实nucleolinsiRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误。Western blot检测结果显示,转染nucleolin-siRNA2的细胞nucleolin表达明显受到抑制。siRNA+组NSCs分化为NSE阳性细胞和GFAP阳性细胞的分化率明显比CON组、siRNA-组增加,且差异具有统计学意义(P<0.01)。与阴性对照组相比,siRNA+组Nestin的表达明显减少,Wnt3表达明显增多,β-catenin入核明显增多,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论本研究成功地构建了针对nucleolin基因的siRNA重组腺病毒载体,沉默nucleolin可诱导神经干细胞的分化,其机制可能与Wnt信号转导通路的激活有关。

烟碱通过N1受体促进热应激对RAW264.7细胞HSP70的诱导表达

目的:本研究探讨在巨噬细胞中,低剂量烟碱联合温和热应激对热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)和热休克蛋白70(heat shock proteins70,HSP70)表达的影响,并揭示其受体机制。方法:用低剂量烟碱(浓度1 mmol/L)联合温和热应激(39℃)刺激RAW264.7巨噬细胞,采用Western-blot观察HSP70的表达,免疫荧光细胞化学观察HSF1的入核,凝胶滞留实验(EMSA)观察HSF1与热休克元件(heat shock element,HSE)的结合;接着用不同的阻断剂预处理RAW264.7巨噬细胞,再给予烟碱和热应激刺激,观察HSP70的表达及HSF1的入核。结果:单纯低剂量烟碱(浓度1 mmol/L)刺激不能诱导HSP70的表达,但HSF1入核明显增多,HSF1与HSE的结合增强;在39℃时,再加入烟碱能增强HSP70的表达、HSF1的入核、HSF1与HSE的结合;六烃季铵预处理,HSF1的入核较单纯烟碱处理明显减少,且能明显阻断烟碱在39℃时诱导的HSP70表达的作用。结论:低剂量烟碱(浓度1 mmol/L)刺激可以促进HSF1入核并与HSE结合,但不能诱导HSP70的表达;烟碱通过N1受体诱导HSF1入核并促进温和热应激(39℃)对RAW264.7巨噬细胞中HSP70的诱导表达。

改良一次性纸杯在小儿包皮环切术后护理中的应用

选取我院2012年2月-2013年3月收治的110例包皮环切术后的患儿,并将其随机分成对照组和观察组各55例。对照组患者术后进行常规护理,及消毒纱布的包扎,治疗组患者在常规护理的基础上应用一次性纸杯去底保护切口,观察两组患者术后切口出血、水肿等情况。结果治疗组患者术后出血及水肿的发生明显少于对照组,两组数据对比有统计学意义（P〈0.05）。应用一次性纸杯在小儿包皮环切术后护理,能明显减少出血、水肿等并发症的发生,提高切口愈合率,经济有效,值得在临床上广泛推广。

麦默通行乳腺微创旋切术围手术期的健康教育

目的探讨健康教育在麦默通行乳腺微创旋切术患者围手术期的作用。方法将整群选取的2014年1—12月该院收治的118例于超声引导下行麦默通乳腺微创旋切术的患者随机分为两组,观察组和对照组各59例,观察组进行围手术期的常规护理+健康宣教,对照组仅进行常规护理,比较两组患者满意度、舒适度、两组患者对乳腺疾病知识掌握情况,并对患者进行焦虑自评量表SAS、抑郁自评量表SDS进行心理测评。结果观察组患者满意度、舒适度与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,观察组患者乳腺疾病相关知识掌握程度有大幅度提高,焦虑、抑郁程度得到明显缓解(P<0.05)。结论麦默通行乳腺微创旋切术围手术期的健康教育可以确保手术的效果,减轻病人焦虑、抑郁心理,提高患者乳腺相关知识的掌握程度,促进手术的顺利完成和病人术后康复。

重组腺病毒Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖

目的观察重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用。方法构建重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA,鉴定后将质粒转染HEK293A细胞,得到Nucleoli-SiRNA重组腺病毒。病毒体外转染MCF-7细胞,采用Western Blot检测Nucleolin蛋白的表达情况。将细胞分正常细胞、表柔比星、Ad-SiRN-、Ad-NucleolinSiRNA、表柔比星+Ad-SiRN-、表柔比星+Ad-Nucleolin-SiRNA共6组,MTT法检测6组细胞的增殖能力。结果酶切和测序鉴定均证实重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA构建成功,插入序列正确无误。Western Blot检测结果显示,转染NucleolinSiRNA的MCF-7细胞核仁素表达明显受到抑制。与其他各组比较,应用Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星能明显抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.01)。结论重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA能增强表柔比星抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的能力。

腹横筋膜修补术治疗小儿巨大腹股沟疝

目的 探讨腹横筋膜修补术在小儿巨大腹股沟疝中的应用价值。方法 选择小儿巨大腹股沟疝、滑动性疝共25例,采用腹横筋膜修补术。结果 全组均治愈,无阴囊血肿、无切口感染、无尿潴留。随诊1～5年无复发。结论 腹横筋膜修补术是治疗小儿巨大腹股沟疝的有效方法,术后并发症少。

腹腔镜技术治疗小儿嵌顿性腹股沟斜疝的临床研究

通过临床对照试验,探讨腹腔镜手术与传统开刀手术治疗小儿嵌顿性腹股沟斜疝的优劣。方法 选取2016年1月至2022年1月期间广东省清远市妇幼保健院外科入院并确诊为小儿嵌顿性腹股沟斜疝而且最终需手术治疗的患儿99例做为研究对象,按患儿家属对手术方式的选择不同分为治疗组(62例)和对照组(37例)。治疗组采用腹腔镜手术方式治疗,对照组采用传统开刀手术方式治疗。比较两组的手术时间、术中出血量、平均住院日、平均住院费用以及术后并发症等指标。结果 治疗组的手术时间、术中出血量、平均住院日明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组的平均费用略高于对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。两组术后随诊均未发现有手术并发症。结论 相对于传统开刀手术治疗小儿嵌顿性腹股沟斜疝,腹腔镜手术创伤更小、恢复更快,不明显增加医疗费用。而且技术本身安全性高、操作简便、易于学习,值得推广。