直接清除法测定高密度脂蛋白胆固醇研究探讨

目的建立一种测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的直接清除方法。方法血清中乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白在试剂Ⅰ中反应促进剂作用下形成可溶性复合物,表层游离的胆固醇在胆固醇氧化酶(CHOD)、过氧化物酶(POD)等作用下被消除。在试剂Ⅱ中特殊选择性表面活性剂作用下,高密度脂蛋白颗粒释放的胆固醇在CHOD、胆固醇酯酶(CHER)、POD、4-氨基安替比林(4-AAP)等作用下发生颜色反应,HDL-C的浓度与呈色的深浅呈正比,应用美国临床实验室标准化委员会评估方案对该法进行评价。结果该法的线性可达5mmol/L(r=0.998 2),批内变异系数(CV)为1.8%～2.6%,批间CV为2.4%～3.4%,回收率为98.9%～102.4%。在胆红素小于400μmol/L、三酰甘油小于12 mmol/L、血红蛋白小于10 g/L的情况下,对测定结果无显著影响,与日本第一化学药品株式会社试剂相关性良好。结论该方法设计合理,灵敏度高,操作简便,线性、精密度好,抗干扰能力强,符合临床使用要求,是一种值得广泛推广应用的方法。

三项生化指标联合甲胎蛋白诊断原发性肝癌的研究

目的探讨α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)三项生化指标联合甲胎蛋白(AFP)检测对提高原发性肝癌(PHC)检出率和早期诊断的价值。方法对50例原发性肝癌患者、30例肝硬化(LC)患者及30例健康人以AFP的检测为主体,配合GGT、AFU、TBA进行检测,优化组合,分析联检的结果。结果AFP、AFU、GGT、TBA四项指标对PHC的阳性检出率分别为74%,82%,70%,76%,AFP+AFU+GGT+TBA检测总阳性率达到98.85%,PHC组AFU、AFP与LC组和正常对照组均差异有显著性(P<0.05),LC组AFU、AFP、GGT、TBA与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论应用AFU、AFP、GGT、TBA联合检测与AFP单项检测相比,PHC的诊断率明显提高。

乳胶增强比浊法胱抑素C检测试剂的临床试验研究

目的：评价伊利康公司研制的乳胶增强比浊法胱抑素C试剂性能及验证与已批准上市的胱抑素C试剂的是否具有等效性,并对其参考区间进行确认,以及探讨胱抑素C在2型糖尿病肾病中的临床价值.方法：通过对伊利康公司研制的乳胶增强比浊法胱抑素C试剂盒进行准确度、测量精密度、线性范围等指标进行评价以及与已批准上市的胱抑素C试剂进行248例随机样本的比对试验,根据试验结果确定其参考区间,同时,依据尿白蛋白排泄率（UAER）将68例2型糖尿病患者分为正常蛋白尿组（NA）、微量蛋白尿组（MA）和临床蛋白尿组（CDN）,再选取健康人作为对照组,分别测定各组血清胱抑素C（Cys-c）、空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）及血肌酐和尿肌酐,根据公式计算内生肌酐清除率Ccr,比较各组间各指标的差异,并对各指标进行相关性分析.结果：所研究产品的准确度≤8%、测量精密度≤4%、线性范围达8mg/L,均符合设计要求,与已批准上市的胱抑素C试剂盒进行对照试验,经配对t检验和相关性分析表明两试剂无显著性差异,相关性良好,r2=0.9979;统计的100例健康受检者的血清胱抑素C浓度与性别无关,受检者的血清胱抑素C浓度95%的可信区间为0.00～1.02mg/L;随着UAER增加,Cys-C水平亦增高,CDN组与其他3组比较,差异均有显著意义,MA组Cys-C与NA组和对照组比较,差异有显著意义.Cys-C与Ccr呈负相关、与UAER呈正相关.结论：伊利康公司研制的胱抑素C试剂与已批准上市的胱抑素C在临床应用上具有等效性,参考区间为0.00～1.02mg/L,检测Cys-C在2型DN各期中的变化很好的评估肾小球滤过率,UAER结合Cys-C检测,对判断DN病情进展程度可提供更全面的实验室数据.

PCR—ELISA检测TB—DNA方法学建立及临床应用评价

目的 建立PCR－ELISA检测TB－DNA的方法学，探讨其最佳实验条件及优化组合，结合涂片法、培养法和PCR电泳法评价其临床应用价值。方法 常规PCR引物用地高辛标记，使扩增产物带有地高辛标记成分，再通过亲和素－生物素系统把生物素标记探针包被在固相聚丙乙烯微孔中，通过固相探针与TB－DNA扩增产物进行杂交与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应，经NPP显色后测其A405nm值的大小，与同样操作处理的不同浓度标准菌株A值比较，推出样品中TB－DNA含量。结果 建立该法的最佳实验条件为PCR循环次数为35次，杂交温度为42℃，杂交时间为1h，探针浓度为0.2uM，包被浓度为10μg/ml。经北京胸部肿瘤结核病医院、北京胸科医院及中国人民解放军第309医院三家医院621例临床标本验证，其中结核组464例，该法检出率为57．3％（266／464），而涂片法仅为31．7％（147／464），培养法为35．8％（166／298），PCR电泳法检出率为45．7％（212／464），各法比较存在显著差异（P＜0．01）。结论 本法作为结核病的一项免疫学和分子生物学检测指标，具有较高的临床推广应用价值。

应用水溶型胆固醇校准液测定总胆固醇

目的开发一种方便、稳定、价廉的水溶型胆固醇校准品.方法利用去氧胆酸钠可将胆固醇溶解于水的特性,取不等量的结晶胆固醇加入到含有去氧胆酸钠的生理盐水中(150g去氧胆酸钠溶解于1L0.9%的生理盐水),应用于胆固醇氧化酶法测定中.结果以去氧胆酸钠作溶解剂的水溶型胆固醇校准品,与罗氏公司、日本第一化学药品株式会社的血清型胆固醇校准品比较,具有良好的相关性;溶液10d内测定的日间差异很小,体积质量为8.00g/L时仍保持良好的线性;溶液的粘度相似于血清;该溶液贮于室温1a仍保持稳定.结论以去氧胆酸钠作溶解剂的水溶型胆固醇校准品具有良好的稳定性,适用于酶法测定胆固醇含量.