半乳糖凝集素-3在大鼠肝纤维化组织中的表达及意义

目的研究半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)、a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义。方法雄性SD大鼠随机分为健康对照组6只,肝纤维化模型组24只,采用二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备肝纤维化模型。分别在造模后2、4、6、8周门静脉采血检测血清ALT、AST、Alb,采用HE及Masson染色观察肝组织学变化,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间点肝脏galectin-3 mRNA的表达。结果正常肝组织中有galectin-3低表达,2周即升高,4周达高峰,6周下降,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,galectin-3水平与TGF-β1、a-SMA呈正相关(r=0.882～0.963,P<0.01)。结论 Galectin-3可能与肝纤维化的发生发展过程密切相关。

kielin／chordin样蛋白在肝纤维化模型中的动态表达及骨形成蛋白-7干预后的表达变化

目的观察kielin／chordin样蛋白（kcp）在肝纤维化小鼠模型中的动态表达及骨形成蛋白-7（BMP-7）干预对其表达的影响，探讨治疗肝纤维化的新靶点。方法健康雄性ICR小鼠50只，分为正常对照组（10只）、模型组（30只）和BMP-7干预组（10只），模型组再按造模不同时间点分4、8、12周3个亚组，每组10只。模型组小鼠皮下注射四氯化碳制备肝纤维化小鼠模型，BMP-7干预组在造模后第8周开始腹腔注射人重组BMP-7，持续4周。造模后各组小鼠下腔静脉采血测定血清ALT、AST和Alb；肝组织经HE和Masson染色后光学显微镜下观察各组病理变化；采用RT-PCR、免疫组织化学和Western印迹法分别检测各组kcpmRNA及蛋白表达情况。各组间均数比较采用单因素方差分析。结果模型组血清AI。T、AST升高，Alb降低，12周时达峰值，BMP-7干预组有所缓解，各组间比较，差异有统计学意义（F值=23．501、34．600、16．244，均P〈0．05）。正常对照组kcpmRNA和蛋白表达很低，模型组则逐渐升高，BMP-7干预组有所缓解，差异有统计学意义（F值=30．362、10．727，P〈0．01或0．05）。kcpmRNA表达水平与转化生长因子81（TGF-131）、BMP-7mRNA表达水平均呈正相关（r=0．760、0．769，均P〈0．05）。结论BMP-7能改善小鼠肝纤维化；kcp可能参与肝纤维化发生发展过程，有望成为肝纤维化治疗的新靶点。

骨成形蛋白7对大鼠肝星状细胞增殖的抑制作用

目的研究骨成形蛋白7（BMP7）对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖的抑制作用。方法体外培养HSC—T6细胞，分为对照组、TGFβ1组、TGFβ1＋BMP7组和TGFβ1＋BMP7＋Noggin组。RT—PCR法检测果蝇蛋白质1（smadl）、α-平滑肌肌动蛋白（mSMA）、gremlin和纤维连接蛋白（FN）mRNA的表达，Western印迹法检测磷酸化smadl／5／8（P-smadl／5／8）、α-SMA、gremlin蛋白的表达。采用单因素方差分析、LSD检验、Dunnett T3检验和Pearson直线相关分析进行统计学处理。结果对照组HSC—T6细胞中可见P—smadl／5／8、α-SMA、gremlin及FN的表达，TGFβ1刺激后表达量明显增加，差异有统计学意义（均P〈0．05）。与TGFβ1组比较，TGFβ1＋BMP7组α—SMA、gremlin及FN表达下调，但P—smadl／5／8蛋白表达增加（1．613±0．031比2．503±0．014±34．89，P〈0．05）。TGFβ1＋BMP7＋Noggin组α-SMA、gremlin及FN表达较TGFβ1＋BMP7组增加，而P-smadl／5／8蛋白表达下调（t=34．05，P〈0．05）。smad1mRNA在各组表达均无显著变化。结论BMP7对α—SMA、gremlin和FN均有较强的抑制作用。