医学微生物学与免疫学理论教学改革初探

医学微生物学与免疫学知识量大、内容繁杂、系统性不强,难于记忆。目前教学内容繁冗、教学方法单一。只有对教学内容以及教学方法进行改革,才能减轻学生学习负担,提高教学效果。该文对医学微生物学和免疫学理论教学内容、教学方法的改革谈点个人看法。

关于医学微生物学实验教学改革的几点思考

微生物学是现代生命科学及其相关专业的一门必修课,具有很强应用性和实践性,传统的微生物学实验教学模式难以适应创新型人才培养的要求,要对其进行改革。该文结合教研室的近年来实验教改经验,对实验课教改在教学内容、形式等方面进行初步探讨。

关于医学微生物学开放性实验的几点思考

医学微生物学开放性实验课教学能很好地弥补传统的实验教学的不足,对于全面培养学生的科学作风、创新意识和实践能力等具有重要的作用。

关于建立医学微生物学多媒体教学资料库的探讨

分析建立微生物学专业多媒体教学资料库的必要性,讨论微生物学专业多媒体教学资料库的组成、特点,并探讨建设微生物学专业学科多媒体教学资料库时应注意和把握的几个方面。

微生物学双语教学的实践与体会

实行双语教学是当前我国高等教育教学改革的方向之一,也是培养面向未来的新型社会主义现代化建设高素质人才的必然趋势。该文结合近年本科生双语教学改革实践,就师资队伍、学生外语水平和双语教学环境等方面,对双语教学实践进行粗浅总结和分析。

浅谈留学生微生物理论教学的体会

医学微生物学是一门重要的基础医学课程,在教学过程中,对教学语言、教学内容和教学方法等方面进行改进,取得了很好的教学效果。

去细胞全肾生物支架的制备与鉴定

目的通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架,并对该生物支架进行鉴定。方法健康成年SD大鼠20只,取肾,行肾动脉留置针插管,灌注压3.6mmHg,恒温37℃依次浸泡灌注肝素化PBS溶液、0.05%胰蛋白酶溶液、1%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、1%Trition X-100溶液以及含青、链霉素的PBS溶液。处理后,行DNA定量与定性分析,透射电镜、HE染色及免疫荧光观察残留细胞核成分,进一步丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸型观察肾内血管分布情况。结果去细胞组DNA含量较对照组下降了97%,琼脂糖凝胶电泳未见明显DNA条带;透射电镜、HE染色及免疫荧光观察去细胞组保留了大量细胞外基质,未见明显细胞核成分残留;铸型标本显示去细胞组血管较稀疏,分支完整、清晰。结论联合酶消化法与去垢剂洗涤法,经灌注加浸泡法处理的全肾,可有效清除肾内所有细胞成分,较好地保留细胞外基质支架和血管网络结构,是一种简单易行且较为理想的制备组织工程肾生物支架的方法。

前列腺素E_2对大鼠急性胰腺炎IL-10抗TNF-α、IL-1β的免疫干预作用

目的 :探讨前列腺素E2 (PGE2 )免疫干预对急性胰腺炎大鼠血清抗炎因子IL 10与前炎症因子TNF α及IL 1β的平衡调控作用。 方法 :将SD大鼠 91只随机分 4组 :假手术组 (n =7) ,ANP组 ,PGE2 前干预和PGE2 后干预组 (每组n =2 8) ;后三组又随机分 1h、3h、6h以及 12h时段组 (每组n =7) ,大鼠ANP模型用 5 %牛磺胆酸钠诱导 ,PGE2 前干预组在ANP模型制作前 2h肌肉注射 15 0 μg·kg-1PGE2 ,PGE2 后干预组在ANP模型完成时即刻肌肉注射 15 0 μg·kg-1PGE2 。采用ELISA检测各组各时段大鼠血清的IL 10、TNF α与IL 1β含量。结果 :PGE2 前干预组和后干预组所有时段 (1h、3h、6h以及 12h)的TNF α和IL 1β含量均比ANP组降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1) ;PGE2 前干预组 3h时段IL 10值比后干预组相应时段升高 ,而 6h时段IL 10含量比后干预组低 ,差异均有显著性 (P <0 .0 0 1)。本实验结果显示 ,大鼠血清IL 10的上升幅度因PGE2 的给药时间不同而不同 ,TNF α和IL 1β随IL 10上升而下降。ANP组血清IL 10与TNF α呈正相关 (r=0 .5 85 ,P <0 .0 1) ;PGE2 前、后干预组呈负相关 (r=- 0 .0 4 5 ,P <0 .0 1;r =- 0 .14 3,P <0 .0 1)。结论 :无论是前干预还是后干预 ,PGE2 均能上调大鼠血清抗炎症性因子IL 10 。

登革病毒抗原肽免疫小鼠诱导特异性CD4^+ T细胞反应

目的:探讨4条登革病毒抗原肽在不同遗传背景小鼠中的免疫原性。方法:4条登革病毒抗原肽(C45-57KLV-MAFIAFLRFL,E396-408SSIGKMFEATARG,NS323-35YRILQRGLLGRSQ和NS3141-155NREGKIVGLYGNGVV)中每条肽分别免疫BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠;3周后,处死小鼠并制备脾细胞悬液;不刺激或同样抗原肽刺激脾细胞后,采用细胞内细胞因子染色流式细胞术(ICS)检测小鼠脾细胞CD4+ T细胞中肽特异性产生IFN-γ或IL-4的CD4+ T细胞的百分比。结果:肽C45-57可诱导BALB/c小鼠产生特异性的IFN-γ+ CD4+ T细胞(0.72%±0.04% vs 0.04%±0.02%,P<0.05)而肽E396-408则诱导产生特异性的IL-4+ CD4+ T细胞(0.09%±0.01%vs0.01%±0.01%,P<0.05);肽E396-408、NS323-35和NS3141-155均可诱导C57BL/6小鼠产生特异性的IFN-γ+ CD4+ T细胞(分别为0.31%±0.03%vs0.02%±0.01%,P<0.05;0.21%±0.03% vs 0.04%±0.01%,P<0.05;0.44%±0.04% vs 0.02%±0.01%,P<0.05),而肽C45-57可诱导产生特异性的IL-4+ CD4+ T细胞(0.45%±0.05% vs 0.02%±0.02%,P<0.05)。结论:肽C45-57和E396-408在BALB/c小鼠中具有免疫原性而肽C45-57、E396-408、NS323-35和NS3141-155在C57BL/6小鼠中具有免疫原性。

热休克蛋白70,p53,Bcl-2在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨宫颈癌组织中热休克蛋白70(HSP70),p53,Bcl-2的表达及相关性研究。方法采用免疫组织化学SP法对46例宫颈癌组织和26例正常组织进行HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白检测。结果HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白在宫颈癌组织中的表达率显著高于正常对照组(P<0.01);HSP70和p53在宫颈癌组织中的表达呈显著正相关(rS=0.659,P=0.000);HSP70和Bcl-2及p53和Bcl-2在宫颈癌中的表达显著无相关(rS=0.100,P=0.508;rS=0.184,P=0.221)。结论HSP70,p53和Bcl-2的表达与宫颈癌的发病有密切关系,HSP70蛋白和p53蛋白与宫颈癌生物学行为有关,具有显著的相互协同作用。

丙型肝炎病毒CTL表位的HLA-A2限制性及其免疫学效应研究

目的研究前期鉴定的5条丙型肝炎病毒（HCV）特异忡细胞毒性T细胞（CTL）表位的HLA—A2限制性及其免疫学效应。方法基于1、2细胞株，采用MHC-肽复合物稳定性试验研究前期鉴定的HCV特异性CTL表位与HLA—A2分子的亲和力；采用细胞内细胞因子染色（intracellular cytokine staining，ICS）和ELISPOT研究上述HLA—A2限制性CTL表位体外刺激HLA—A2阳性外周血单个核细胞（PBMC）产生肽特异性CTL的效应；采坩CTL杀伤试验研究上述肽特异性CTL杀伤靶细胞（负载相同肽的T2细胞）的效应。结果前期研究鉴定的5条CTL表位肽中，NSdb_78（SMMAF-SAAL）和NS5a_367（TVSSALAEL）与HLA—A2分子有高亲和力（FI〉1）；ELISPOT结果显示NS4b_78（SMMAFSAAL）和NS5a_367（TVSSALAEL）可诱导高水平的分泌IFN-γ的效应细胞[分别为（60±6）SFC／10^4 PBMCvs（4±1）SFC／10^4 PBMC，P〈0．001：（10±3）SFC／10^4 PBMC vs （2±1）SFC／10^4 PBMC，P〈0．001]；ICS结果证实这两条肽刺激HLA—A2阳性PBMC后，在CD8^＋T细胞中产生了高百分比的CD8^＋ IFN-γ^＋ T[分别为（2．33±0．22）％vs（0．05±0．01）％，P〈0．001；（0．36±0．06）％vs（0．03±0．01）％，P〈0．001]；并且，肽特异性CTL可特异性杀伤负载相同肽的T2细胞。结论NS4b_78（SMMAFSAAL）和NS5a_367（TVSSALAEL）受HLA—A2限制，并具有较好的免疫原性。

NF-κBp50、p53、Bcl-2在子宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系

目的探讨子宫颈癌组织中NF-κBp50、p53、B cl-2的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法采用免疫组织化学S-P法对46例子宫颈癌、26例正常子宫颈组织进行NF-κBp50、p53、B cl-2蛋白检测;用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行了检测。结果NFκ-Bp50、p53、B cl-2蛋白在子宫颈癌组织中的表达率显著高于正常对照组(P<0.01)。NF-κBp50与p53或B cl-2之间的表达具有相关性(P<0.05),p53与B cl-2之间无相关意义(P>0.05)。在HPV-DNA阳性子宫颈癌组织中NF-κBp50的阳性率显著高于阴性组(P<0.05)。p53、B cl-2的阳性率在HPV-DNA阳性和阴性组之间差异无显著性(P>0.05)。结论NFκ-Bp50、p53、B cl-2的表达与子宫颈癌的发病有密切关系,HPV感染与NF-κBp50活化有关。

PGE_2对大鼠急性胰腺炎肺超微结构与TNF-α、IL-10水平的影响

目的 :探讨前列腺素E2 (PGE2 )免疫干预对急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肿瘤坏死因子 (TNF α)和白介素 10 (IL 10 )与肺组织超微结构改变的影响。方法 :SD大鼠 91只分成 4组 :手术对照组 (n =7)、ANP组、PGE2 前干预组和PGE2 后干预组 (每组n =2 8) ,后 3组又随机分 1h、3h、6h、12h时段 ,每时段 7只。大鼠ANP模型用 5 %牛磺胆酸钠诱导制作 ,PGE2 前干预组和后干预组分别在ANP模型制作前 2h和模型完成时肌肉注射 15 0 μg/kg和 15 0 μg/kgPGE2 。采用ELISA检测各时段大鼠血清的TNF α与IL 10含量 ,观察PGE2 前干预、后干预对大鼠血清TNF α与IL 10含量动态变化 ,同时随机取NAP组和PGE2 干预组 6h和 12h时段肺组织 ,电镜下观察超微结构改变。结果 :PGE2 前、后干预组IL 10含量峰值分别在 3h和 6h时段 ,比ANP组显著升高 (P <0 .0 0 1) ,所有时段 (1h、3h、6h、12h)TNF α均比ANP组大鼠显著降低 (P <0 .0 0 1) ,IL 10上升幅度随PGE2 给予的早晚而不同 ,TNF α亦随IL 10上升而下降。PGE2 免疫干预组与ANP组相比 ,6h时段的肺组织病变有所减轻 ,12h时段明显改善。结论 :PGE2 在上调大鼠血清IL 10、降低TNF α含量的同时 。

宫颈癌与HPV疫苗

宫颈癌(CaCx)是国内外危及女性生命的高发肿瘤之一,仅次于乳腺癌,人乳头瘤病毒(HPV)是由核酸和衣壳蛋白组成的DNA病毒,高危型HPV的感染是CaCx发生发展的重要因素,防止HPV16持续性感染的疫苗可从根本上减少CaCx的发病率。但因HPV不能经细胞培养增殖,故HPV基因工程疫苗的研制成为近年来研究热点。就HPV疫苗种类、研制等方面进行综述。

前列腺素E_2对重症急性胰腺炎大鼠血清IL-10和IL-1β的影响

目的 :探讨前列腺素E2 (PGE2 )对重症急性胰腺炎大鼠血清IL 1β和IL 10调节作用。 方法 :SD大鼠 91只随机分为 4组 :假手术组 (n =7) ,ANP组 ,PGE2 前、后干预组 (后三组每组 2 8只 ,分别随机分为 1h、3h、6h、12h时段组 ,n =7)。大鼠ANP模型用 5 %牛磺胆酸钠制备。前干预组在ANP诱导前 2h肌肉注射 15 0μg·kg-1PGE2 ,后干预组在ANP模型完成时即刻肌肉注射 15 0 μg·kg-1PGE2 。采用ELISA检测各组不同时段大鼠血清IL 10与IL 1β含量 ,观察PGE2 前、后干预对大鼠血清IL 10与IL 1β的调节作用。 结果 :PGE2 前、后干预组大鼠血清IL 10峰值分别位于 3h和 6h时段 ,均显著高于ASP组 (P <0 .0 0 1) ;前、后干预组所有时段大鼠血清IL 1β均比ASP组降低 (P <0 .0 0 1) ,差异有显著性 ;前干预组 3h时段IL 10峰值 (2 31pg/ml)比后干预组IL 10相应时段 (2 0 9pg/ml)高 (P <0 .0 1) ,差异有显著性 ;6h时段IL 10 (5 4.0 7pg/ml )比后干预组 (118.2 6pg/ml)低 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。前干预组 1～ 6h时段大鼠血清IL 1β均显著低于后干预组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1)。结论 :PGE2 能上调大鼠血清IL 10 ,并降低IL 1β含量。

论中医调治亚健康状态的优势

从脏腑阴阳气血失调、体质学说、形神学说等方面论述中医学对亚健康状态病因病机的认识,从饮食调节、形体锻炼、辨证施治等方面论述中医药调治亚健康状态方法,认为中医药调治亚健康状态具有一定的优势。

EICU高龄患者呼吸系统感染情况分析

目的探讨EICU高龄患者呼吸系统感染细菌分布特征及耐药性。方法对2011年1～12月本院EICU年龄超过70周岁住院患者的痰液标本进行菌株鉴定和药敏实验。结果 2011年本院EICU共收治高龄患者184例,发生医院感染27例,感染率14.67%;共培养出病原菌65株,以铜绿假单胞菌最多,占29.23%,其次是白色假丝酵母菌,占23.08%,肺炎克雷伯菌占12.31%,鲍曼不动杆菌占10.77%。结论呼吸道为EICU高龄患者发生医院感染的主要部位,感染病原以革兰阴性菌及真菌较为常见。根据细菌培养及药物敏感实验合理选用抗菌药物,是防止抗生素滥用、控制院内感染病原传播的关键。

温州地区62例HCV感染者的基因型特征研究

目的:探讨温州地区丙型肝炎病毒(HCV)感染者的HCV的基因型特征。方法:采用RT巢式-PCR法,对62例HCV-IgG阳性者进行HCV-RNA的检测及基因分型。结果:62例研究者中,HCV基因型1b单阳性率为35.48%,基因型2a单阳性率为3.23%,1b和2a双阳性率为61.29%,1b总阳性率为96.77%,2a总阳性率为50%。结论:温州地区HCV的基因型以1b型占优势,并且基因型1b和2a混合感染率较高。

人白细胞抗原-A＊0201限制性丙型肝炎病毒细胞毒性T淋巴细胞表位的鉴定

目的 鉴定人白细胞抗原（HLA）-A＊0201限制性HCV-CTL表位.方法 基于RANKpep和SYFPEITHI细胞表位预测软件预测结果,选择合成6条候选CTL表位.研究候选CTL表位肽与T2细胞表达的HLA-A＊0201分子的亲和力,进一步采用酶联免疫斑点实验（ELISPOT）和细胞内细胞因子染色（ICS）实验研究HLA-A＊0201高亲和力肽在HLA-A＊0201阳性HCV感染者的外周血单个核细胞（PBMC）中刺激CTL反应情况.结果 在6条候选CTL表位肽中,肽C_181（LLSCLTTPV）和NS2_172（VLQAGLIRV）与HLA-A＊0201分子有高亲和力,其亲和力随肽浓度增加而升高.在10例HLA-A＊0201阳性HCV-1b感染者每1×105PBMC中,肽C_181和NS2_172刺激后,特异性分泌IFN-γ细胞的斑点形成细胞数（SFC）分别为0～19和0～20.肽C_181和NS2_172特异性IFN-γ＋CD8＋T淋巴细胞占CD8＋T淋巴细胞的比例分别为0.006%～0.065%和0.005%～0.080%.结论 肽C_181（LLSCLTTPV）和NS2_172（VLQAGLIRV）为HLA-A＊0201 限制性HCV-CTL表位.