大鼠肥大细胞的法医学实验研究──过氧化物酶活性变化、脱颗粒超微结构改变及分布

采用植物血凝素（PHA）致敏S、D大鼠，2周后处死，灌洗腹腔，用阿拉伯胶分离液分离肥大细胞（MC），将PHA与MC在37C水治中孵育，攻击MC使之受损伤，于伤后5、10、15、20、30和60分钟，分别吸取孵有液作聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳，分离MC过氧化物酶；用抗坏血酸-联苯胺染色显带，并计算酶的相对活性。另取20分钟时孵育液，常规固定，包埋，切片及染色后用透射电镜观察MC脱颗粒叶的形态。用常规石蜡切片，甲苯胺蓝染色，对SD大鼠的35种组织中MC的分布进行光镜观察。结果发现；（1）大鼠腹腔MC显示-条过氧化物酶电泳区带；（2）MC经PHA攻击受损伤10分钟内，过氧化物酶相对活性升高不明显；15、ZO、3O分钟时实验组酶活性升高，与对照组的差异明显；到60分钟时两组酶活性无显著差异；（3）MC与PHA孵育20分钟时，脱颗粒率为76％，MC浆内可见有膜性和无膜性两种类型的空泡．对照组大鼠MC脱颗粒仅为16％；（4）大鼠皮肤、肺、呼吸道、消化道、骨髓及胸腺MC含量较多；泌尿生殖道次之；心、肝、脾、肾等组织较少；脑、脊髓、脑垂体、肾上腺及睾丸等组织中未见MC，从而为法医损伤时间的推测提供方法与依据。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠心肌损伤的防护作用

目的:研究银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠心肌的防护作用。方法:用光镜和透射电镜观察EGb对糖尿病大鼠心肌的形态学改变,并测定心肌组织内超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、结构型一氧化氮合酶(cNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量。结果:糖尿病大鼠心肌光镜下主要表现为心肌细胞空泡变性及心肌纤维局灶性溶解;电镜下主要表现为心肌线粒体肿胀,嵴变短,肌原纤维溶解;SOD活性下降,NOS、iNOS活性及MDA、NO含量增高。EGb治疗组病变明显减轻,EGb治疗组心肌组织内SOD活性明显高于糖尿病组,NOS、iNOS活性及MDA、NO含量低于糖尿病组。结论:EGb可能通过抗脂质过氧化作用和降低NO水平而对糖尿病心肌产生保护作用。

实验性糖尿病大鼠巨噬细胞内酶活性及吞噬功能的研究

目的研究实验性糖尿病大鼠巨噬细胞内酶活性及其吞噬功能。方法用四氧嘧啶腹腔注射复制 SD大鼠糖尿病动物模型 ,测定大鼠肺泡及腹腔巨噬细胞内酸性磷酸酶 ,精氨酸酶 ,乳酸脱氢酶及异柠檬酸脱氢酶的活性并测定腹腔及肺泡巨噬细胞对中性红的吞噬能力。结果糖尿病大鼠肺泡及腹腔巨噬细胞内 4种酶活性均高于对照组 ,其对中性红的吞噬能力也大于对照组。结论糖尿病时巨噬细胞处于激活状态 ,此激活的巨噬细胞可能参与糖尿病并发症之发生。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠膈肌的保护作用

目的 :研究银杏叶提取物 (EGb)对糖尿病大鼠膈肌的保护作用。方法 :用光镜和透射电镜观察EGb对糖尿病大鼠膈肌的形态学改变 ,并测定膈肌线粒体琥珀酸脱氢酶 (SDH)、超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性 ,一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)的含量。结果 :糖尿病大鼠膈肌线粒体SDH、SOD活性下降 ,NOS活性及MDA、NO含量增高 ;电镜下主要表现为膈肌线粒体扩张 ,嵴变短 ,空泡化。EGb治疗组病变明显减轻。与糖尿病组比较 ,膈肌线粒体SDH、SOD活性升高 ,NOS活性及NO、MDA含量下降。结论 :EGb通过减轻自由基和过量一氧化氮对膈肌线粒体造成损伤 ,提高SDH活性 ,改善线粒体呼吸链的功能 ,从而对糖尿病大鼠膈肌起到保护作。

乳腺癌细胞凋亡、增殖与相关基因表达、突变的关系

目的 :研究乳腺癌细胞凋亡、细胞增殖及相关基因表达、突变的关系 ,为乳腺癌细胞凋亡、细胞增殖失衡的基因调控机制提供依据。方法 :分别应用TUNEL法、免疫组化S -P法和PCR -SSCP法检测 5 4例乳腺癌标本凋亡指数 (AI)和增殖指数 (MI) ,Bcl- 2、p5 3、c -erbB - 2、PCNA、Ki6 7、TopoⅡ蛋白表达和p5 3基因突变。结果 :5 4例乳腺癌AI平均 9 4 0± 3 78,MI平均 5 96± 2 36 ,AI与MI呈显著正相关 (r=0 4 6 ,P <0 0 1)。Bcl- 2、PCNA、Ki6 7、TopoⅡ表达与AI、MI均呈显著正相关 (P <0 0 1)。p5 3表达、c-erbB - 2表达、p5 3突变与MI呈显著正相关 (P <0 0 1)。p5 3基因突变类型与AI呈显著相关 (P <0 0 5 )。结论 :乳腺癌细胞凋亡、增殖失衡与相关基因异常表达、突变有关。

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠膈肌收缩能力的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对2型糖尿病大鼠膈肌收缩能力和能量代谢酶活性的影响。方法:40只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组10只,造模组30只。应用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱发2型糖尿病大鼠模型。随机选取造模成功大鼠20只平均分成2组:糖尿病组、GbE治疗组。GbE治疗组按8mg/(kg.d)剂量腹腔注射GbE,持续8周。测定各组大鼠膈肌单收缩张力(Pt)、最大强直张力(P0)、疲劳指数(FI)的水平;检测膈肌组织中的细胞色素氧化酶(CCO)、乳酸脱氢酶(LDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性,并观察其超微结构的变化。结果:与对照组比较,糖尿病组大鼠膈肌Pt、P0、FI水平降低(P<0.01);CCO、LDH、SDH活性下降(P<0.01);电镜下主要表现为膈肌线粒体扩张,嵴变短,空泡化。GbE治疗组上述变化明显减轻。结论:GbE增强2型糖尿病大鼠膈肌有氧氧化和糖酵解能力,改善线粒体呼吸链功能,能提高2型糖尿病大鼠膈肌的收缩能力。

P53,Fas,Bcl-2蛋白在尖锐湿疣组织中的检出及其与HPV感染的相关性

目的 探讨P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白在尖锐湿疣 (CA)组织中的检出情况及其与人乳头瘤病毒 (HPV)感染的关系。方法 采用标准免疫组化法检测了 2 4例CA、46例宫颈癌和 2 8例正常宫颈组织P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白 ,用PCR技术对各组织标本的HPV DNA进行检测和 6,11,16,18分型。结果 P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白在CA组的阳性率显著高于正常对照组 (P <0 .0 0 1) ;CA组和宫颈癌组之间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。综合分析 ,蛋白阳性率与HPV感染率密切相关 (P <0 .0 5 ) ,但CA组或宫颈癌组的蛋白阳性率与HPV 6/11型或 16/18型的检出与否无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 P5 3 ,Fas ,Bcl 2蛋白与尖锐湿疣的发病有密切关系 。

糖尿病大鼠巨噬细胞CD36基因表达水平

目的:研究糖尿病大鼠巨噬细胞CD36基因表达水平。方法:观察6周STZ-糖尿病大鼠血清胆固醇、甘油三酯含量及肺泡巨噬细胞和腹腔巨噬细胞内总胆固醇、游离胆固醇、胆固醇酯含量,并应用RT-PCR技术检测肺泡巨噬细胞和腹腔巨噬细胞CD36基因表达水平。结果:糖尿病大鼠血清胆固醇、甘油三酯含量明显高于正常对照组,巨噬细胞内总胆固醇、游离胆固醇、胆固醇酯含量与正常对照组无明显差异,CD36基因表达水平显著高于正常对照组。结论:糖尿病大鼠巨噬细胞CD36基因表达水平升高,可能参与糖尿病动脉粥样硬化的发生发展。

慢性低O_2高CO_2对大鼠脑组织的损伤作用及川芎嗪对其影响的研究

目的 :探讨慢性低O2 高CO2 条件下脑烯醇化酶 (NSE)、蛋白S10 0、超微结构等改变及川芎嗪对其影响。方法 :将SD大鼠分为正常对照组 (A组 ) ,低O2 高CO2 组 (B组 ) ,低O2 高CO2 +川芎嗪组 (C组 ) ,采用免疫组织化学、透射电镜方法 ,观察平均肺动脉压 (mPAP)、颈动脉压 (mCAP)、血清NO浓度、脑NSE、S10 0变化及脑超微结构等改变。结果 :①B组mPAP明显高于A组 ,C组低于B组 ,三组间mCAP无明显差异。②B组血清NO浓度低于A组 (P <0 .0 1) ,C组血清NO浓度高于B组 (P <0 .0 1)。③B组比A组NSE、S10 0吸光度值降低 ,C组比B组NSE、S10 0吸光度值增高。④B组神经元、神经胶质细胞水肿 ,C组神经细胞损害明显减轻。结论 :慢性低O2 高CO2 脑NSE、S10 0降低 ,川芎嗪对脑损害有保护作用。

香菇多糖对糖尿病大鼠脑组织损伤的影响

目的研究香菇多糖(LNT)对糖尿病大鼠脑组织的保护作用。方法SD大鼠分3组:正常对照组、糖尿病组、LNT治疗组。用光镜和透射电镜观察LNT治疗前后糖尿病大鼠脑组织的形态学改变,并测定脑组织内超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量。结果镜下可见脑水肿、脑软化、白质脱髓鞘;透射电镜下见到神经元及神经胶质细胞内线粒体肿胀、嵴变短、神经纤维脱髓鞘,血脑屏障受损;脑组织内SOD活性下降,NOS活性及MDA、NO含量增高。LNT治疗后病变明显减轻,脑组织内SOD活性明显升高,NOS活性及NO、MDA含量明显下降。结论LNT能清除自由基和降低一氧化氮水平,从而对糖尿病大鼠脑组织起到保护作用。

慢性低O_2高CO_2大鼠神经细胞凋亡与脑MDA、NOS的水平变化

目的 :探讨慢性低O2 高CO2 脑神经细胞凋亡与MDA、NOS关系。方法 :将SD大鼠分为正常对照组(C组 )和低O2 高CO2 4周组 (E组 ) ,采用原位末端标记 (TUNEL)、流式细胞技术检测凋亡细胞 ,并测脑组织MDA、NOS水平。结果 :①E组脑MDA、NOS水平高于C组 (P <0 .0 1) ;②E组大脑皮质、海马、丘脑等部位见神经细胞凋亡 ;神经细胞凋亡百分率为 11.5 1% ,并与MDA和NOS水平呈正相关 (r =0 .6 5 2 ,P <0 .0 5和r=0 .716 ,P <0 .0 5 )。结论 :慢性低O2 高CO2

卫氏并殖吸虫后尾蚴的透射电镜观察

应用透射电镜首次观察了卫氏并殖吸虫后尾蚴的超微结构。虫体由体被、实质组织、肠腔及排泄囊所构成。体被由皮层、肌层、皮层细胞组成。皮层为一合体层,包括外质膜、皮层细胞质和基质膜。皮层表面见许多指状突起,突起有多级分枝。皮层基质内有皮棘,其根部位于基质膜,顶端突出于皮层表面但被外质膜覆盖,横切面上可见网格样结晶,基质内遍布球形、杆状两型分泌小体。皮层细胞位于肌层深部,细胞核位于其内,浆内可见两型特征性分泌小体,皮层细胞发生多条胞质小管穿过肌层及基底膜与皮层相连。结果提示皮层是后尾蚴吸收营养物质的主要部位。

P53、Fas、Bcl-2基因在尖锐湿疣和宫颈癌组织中的表达

目的 :探讨P5 3、Fas、Bcl 2基因蛋白表达与尖锐湿疣和宫颈癌发病的关系。方法 :采用标准免疫组化技术 ,分别检测 2 4例尖锐湿疣、4 6例宫颈癌、2 2例宫颈糜烂和 2 8例正常宫颈组织P5 3、Fas和Bcl 2基因产物。结果 :三种基因蛋白在尖锐湿疣组和宫颈癌组的表达程度和表达率均显著高于宫颈糜烂组和正常对照组 (P <0 .0 0 1)。尖锐湿疣组和宫颈癌组之间在P5 3的表达程度上差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :P5 3、Fas、Bcl 2基因表达与尖锐湿疣和宫颈癌的发病均有密切关系。

香菇多糖对大鼠肺泡巨噬细胞活性的影响

本实验观察香菇多糖对大鼠肺泡巨噬细胞活性的影响。实验组每日按4mg/kg 剂量腹腔注射香菇多糖,连续给药1个月,对照组未作任何处理,用生理盐水分别灌洗两组大鼠的肺泡巨噬细胞,生化方法测定巨噬细胞内酸性磷酸酶、精氮酸酶及乳酸脱氢酶的活性,结果发现实验组巨噬细胞内三种酶的活性均高于对照组,且有显著性差异(P<0.05～0.001),提示香菇多糖对大鼠肺泡巨噬细胞有激活作用。

青蒿琥酯治疗家犬卫氏并殖吸虫感染的效果观察

目的探讨青蒿琥酯(Art)对双倍体卫氏并殖吸虫病的治疗作用。方法1)卫氏并殖吸虫成虫用含不同浓度Art的RPMI 1640培养基体外培养后作电镜观察;2)实验犬常规感染卫氏并殖吸虫囊蚴,76 d后用青蒿琥酯50和80mg/kg灌胃治疗,103 d解剖犬,作常规病理检查,取出的虫体作电镜观察。结果1)5 mg/kg组体外培养24 h后,虫体萎缩,扫描电镜观察部分体棘消失、倒伏、絮状物附着;透射电镜显示皮层水肿、细胞器及分泌颗粒减少,卵黄腺萎缩,卵巢卵细胞胞浆空泡变等;2)两治疗犬体内虫体萎缩,厚壁囊肿数分别为28和35个,对照犬为16个,差异有显著性(P<0.05);透射电镜显示成虫变化与体外培养试验相似。结论青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫有损伤作用。

脑挫裂伤后脑水肿CT表现及其与受伤时间的相关研究

分析120例脑挫裂伤后脑水肿的CT表现及其两者形成时间的关系，提出脑水肿的分级和分型，以Ⅰ-Ⅱ组脑水肿和“O”型脑水肿多见，Ⅰ级脑水肿形成时间平均17小时，Ⅱ级形成时间平均30小时，Ⅲ-Ⅳ级形成时间平均72～73／小时，受伤时间与R值呈正相关（r=0．431），P＜0．001．回归方程Y=6658＋79．152x，受伤时间与D值也呈正相关（r=0．429）P＜0．001，回归方程Y=39．362－32．335x。并首次指出这时间变化规律可作为脑挫裂伤受伤时间的推断依据。