普伐他汀对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞增殖和氧化应激的影响

目的:探讨普伐他汀对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖和氧化应激的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞株,分对照组、高糖组和普伐他汀组,采用CCK-8细胞计数法测定系膜细胞增殖,比色法检测细胞培养液中的超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量的变化。结果:与对照组比较,高糖组出现系膜细胞增殖增加,上清液中SOD活性、GSH含量下降,MDA含量增加;与高糖组相比,普伐他汀组系膜细胞增殖减少,GSH含量、SOD活性上调,MDA含量下降。结论:普伐他汀能抑制高糖环境下的系膜细胞增殖,并显著减少高糖诱导的氧化应激水平。

川芎嗪对高糖环境大鼠肾小球系膜细胞增殖及其细胞外基质含量的影响

目的:探讨川芎嗪对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖及其细胞外基质含量的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞株,分对照组、高糖组、TMP组,分别培养12h、24h、48h,CASY细胞计数仪计数细胞存活率;以CCK-8法检测细胞增殖;以ELISA法检测细胞上清液细胞外基质ColIV及FN的含量。结果:各TMP浓度组之间存活率无统计学差异(P>0.05);与对照组比较,高糖下培养24h、48hMCs增殖显著增快(P<0.01),分泌的ColIV及FN含量增多(P<0.05);与高糖组比较,TMP各组MCs增殖显著减慢(P<0.01),分泌ColIV及FN减少(P<0.01或P<0.05)。结论:川芎嗪可以有效抑制高糖的促增殖作用并能减少系膜细胞外基质的增加。

甲状腺眼病与 CTLA-4基因外显子1第17密码子49位点 A/G 多态性的关系

目的：对 Graves 病伴眼病与不伴眼病患者 CTLA-4基因外显子1第17密码子49位点 A/G 多态 性进行研究，以期探讨 Graves 病惠者伴发眼病的原因。方法：应用 PCR 技术并采用限制性内切酶 BbvI 来 测定107例 Graves 病患者(其中伴突眼的50例，不伴眼病的57例)及57例健康对照者外周血单个核细 胞 CTLA-4基因外显子1第17密码子49位点 A/G 多态性。分析其基因表型、基因频率与眼病的关系。结 果：无眼病 GD 组 GG 基因型的频率及等位基因 G 的频率与健康对照组相比差异均无显著性。而伴眼病 GD 组其 GG 基因型的频率及等位基因 G 的频率明显高于无眼病 GD 组及健康对照组。结论：CTLA-4外显子1第 17密码子49位点 A/G 二态性 GG 基因表型可能是 GD 患者伴发突眼的重要因素。

连续性血液净化在脓毒症并多脏器功能不全治疗中的应用

目的：探讨连续性血液净化(CBP)治疗在脓毒症并多脏器功能不全综合征(MODS)患者中的疗效。方法：15例脓毒症并MODS[平均功能不全脏器(3.87±1.06)个]的患者,予以连续性血液净化治疗,以连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)为主,根据病情需要加做血浆置换(PE)等。连续性血液净化治疗期间监测血压、心率、中心静脉压、呼吸等,定时复查体温、血气、血常规、血清电解质、肾功能、血糖等,治疗前后查肝功能等项目。结果：15例患者在连续性血液净化治疗期间,血压稳定,治疗后血尿素氮、肌酐等及APACHE Ⅱ、MODS、SOFA评分均有改善。15例患者中痊愈6例,自动出院6例,死亡3例。结论：连续性血液净化是较好的治疗脓毒症并多脏器功能不全综合征的血液净化方法。

CRRT对MODS患者血浆细胞因子的清除作用

目的:探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)对多脏器功能不全综合征(MODS)患者血浆细胞因子的清除作用。方法:12例MODS患者进行CRRT,采用前稀释连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)。于开始前和开始后4、12、24、48h采血标本和超滤液ELISA法测定细胞因子TNFα、IL1β、IL6、IL10的浓度;于开始前和开始后4、24、48h进行血气、血电解质、肾功能、血常规等检查。结果:12例患者CRRT后血浆TNFα、IL1β、IL6、IL10呈下降趋势,其中TNFα在治疗开始后4h略有升高,12、24、48h时下降;IL1β在治疗后有下降;IL6在治疗开始后4h有升高,12、24、48h下降;IL10在治疗开始后4、48h有升高,12、24h下降。12例患者治疗后APACHEII评分不同时间点均有改善,四种细胞因子在超滤液中未能检出。结论:CRRT能减少MODS患者血浆中的多种细胞因子,可改善患者病情。

蔡氏扶正消癥汤抑制胃癌转移的机制研究

目的:探索蔡氏扶正消汤抑制胃癌转移的机制研究。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法检测蔡氏扶正消汤对人胃癌细胞SGC-7901、对内皮细胞体外增殖的影响;以琼脂糖刮除法检测其对内皮细胞迁移的影响;用免疫组化S-P法检测其对肿瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。结果:蔡氏扶正消汤能明显抑制内皮细胞的增殖,与对SGC-7901细胞比较差异有显著性;蔡氏扶正消汤能抑制内皮细胞的迁移;蔡氏扶正消汤浓度为1.1mg/ml时其平均吸光度分别为(0.096±0.004),与空白对照组平均吸光度(0.125±0.025)差异有显著性(P<0.01),并且VEGF平均吸光度随蔡氏扶正消汤浓度增加而降低,说明蔡氏扶正消汤能抑制VEGF的表达。结论:抑制内皮细胞的增殖、迁移和对VEGF表达的抑制是蔡氏扶正消汤抑制胃癌转移的机制之一。

流式细胞术CD45/SSC设门在检测骨髓标本时的意义

目的 :探讨用流式细胞术进行白血病免疫分型的最佳设门方法 ,以确保分析结果的准确性和可靠性。方法 :根据骨髓中原始细胞的CD4 5表达强度较正常淋巴细胞及单核细胞低的特征 ,使用三色荧光标记骨髓细胞 ,采用CD4 5PerCP/SSC(对数 )进行分析。结果 :正常骨髓细胞分为 6群 ,原始细胞的CD4 5表达低且SSC较小。白血病骨髓中在原始细胞部位出现异常增高的原始细胞群 ,其位置与其他正常细胞几无重叠。结论 :采用CD4 5PerCP/SSC(对数 )对白血病患者骨髓细胞进行分类可以明显提高免疫分型结果的准确性和重复性 。

CTLA-4基因多态性与Graves病预后关系的研究

目的:对Graves病(GD)患者CTLA-4基因外显子1第17密码子49位点A/G多态性与GD患者的临床特点及其对抗甲状腺药物的疗效关系进行研究,为临床治疗的决策提供依据。方法:根据Graves病患者服用抗甲状腺药物的效果及其停药后是否复发分为A组(治疗效果较好、预后好组)与B组(难治性或易复发组)。应用PCR技术并采用限制性内切酶BbvI来测定其外周血单个核细胞CTLA-4基因外显子1第17密码子49位点A/G多态性。分析其基因表型、基因频率与临床表现及预后的关系。结果:难治性或易复发的GD患者GG基因型及等位基因G频率明显高于治疗效果较好、预后好的GD患者,而AG基因型及等位基因A频率则明显低于治疗效果较好、预后好的GD患者。结论:CTLA-4基因外显子1第17密码子49位点表现为GG基因型可能是Graves病患者对抗甲状腺药疗效差及甲亢易复发的重要原因。

Fhit基因异常表达在原发性喉癌中的意义

背景与目的:研究原发性喉癌组织中的Fhit基因的失活情况,并在RNA水平揭示Fhit基因失活与喉癌生物学行为之间的联系,及环境因素对Fhit基因影响。材料与方法:采用RT-PCR技术检测29例喉癌组织Fhit表达情况,并对异常表达进行测序。比较喉癌组织和非癌组织,及不同临床病理分级间的Fhit异常表达,同时观察环境因素(包括吸烟、饮酒)对Fhit表达的影响。结果:29例喉癌组织中22例Fhit异常表达,其中4例Fhit基因未表达,18例转录本异常。喉癌组织和非癌组织中Fhit异常表达率差异有统计学意义(P<0.01),各临床病理分级之间的Fhit异常表达情况差异无统计学意义(P>0.05),吸烟组和非吸烟组Fhit异常差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Fhit基因异常表达在喉癌中频繁发生。Fhit基因改变可能作用于喉癌的发生过程,并不随肿瘤发展而进一步增强。过度吸烟可能通过改变Fhit基因的结构从而诱导喉肿瘤的形成。

流式细胞仪检测血小板表面膜蛋白

目的 :探讨对流式细胞仪检测血小板表面膜蛋白中可能出现的问题。方法 :试管中加入抗血小板表面膜蛋白相应抗体及富血小板血浆 (PlateletRichPlasma ,PRP)孵育洗涤后上机测定。结果 :血小板表面膜蛋白测定受样品采集、抗凝剂选择、试剂种类、正确设计及图像分析等因素的影响。结论 :为保证测定结果的准确性 ,应尽快按质控要求完善保证措施 ,建立本单位参考值 。

蔡氏扶正消癥汤对胃癌细胞体外生长的影响

目的:探讨蔡氏扶正消癥汤对人低分化胃癌细胞BGC-823体外生长的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法检测蔡氏扶正消癥汤对BGC-823生长的影响,并观察蔡氏扶正消癥汤对BGC-823细胞形态的影响。结果:蔡氏扶正消癥汤生药能抑制BGC-823的生长。在实验浓度范围内,随着剂量的增加, 抑制作用更加明显;同一剂量下,72 h内药物作用时间越长,抑制作用越明显。结论:蔡氏扶正消癥汤能够抑制低分化胃癌细胞BGC-823的生长。

前列腺组织中细菌16SrRNA基因和IgA的表达

目的:探讨慢性前列腺炎(CP)的细菌学病因。方法:前列腺标本取自140例意外死于非前列腺疾病的器官捐献者,年龄20～35岁。取前列腺周围带组织,分成两块,一块做常规病理检查和抗IgA抗体组化染色,另一块用PCR方法检测细菌16SrRNA基因(16SrDNA)。结果:32.9%(46/140)的组织病理呈CP,其中轻度灶性间质炎42例,轻度灶性间质伴腺体周围炎3例,轻度灶性腺体周围炎1例。16SrDNA阳性率为19.3%(27/140)。其中前列腺炎标本阳性率为48.9%(22/46),非前列腺炎标本阳性率为5.3%(5/94),前列腺炎标本阳性率高于非前列腺炎标本(x2=36.910,P<0.01)。在CP标本中,16SrDNA阳性组IgA表达高于16SrDNA阴性组(Z=-3.85,P<0.001)。结论:细菌感染可能是引起CP的重要原因。

血清、尿Ⅳ型胶原与2型糖尿病肾病的关系

目的 :研究血清、尿液Ⅳ型胶原 (T4C)水平与 2型糖尿病肾病 (DN)的关系。方法 :2型糖尿病(DM)患者 182例 ,分为正常蛋白尿组 (DMN组 ) ,微量蛋白尿组 (DMMA组 ) ,大量蛋白尿组 (DMP组 ) ;对照组(C组 ) 31例 ,检测血清T4C ,尿液T4C、Cr。结果 :①血清T4C在DMN组与C组区别无显著性 ,在DMMA组高于C组和DMN组 (P <0 .0 1) ,DMP组高于C组、DMN组 (P <0 .0 1)和DMMA组 (P <0 .0 5 ) ;尿T4C/Cr在DMN组与C组差异无显著性 ,在DMMA组、DMP组明显高于C组 (P <0 .0 1) ,DMP组较DMN组明显升高 (P <0 .0 5 ) ,但与DMMA组差异无显著性。②相关分析显示 :DM患者尿Alb/Cr与尿T4C/Cr(r=0 .2 35 ,P <0 .0 1)、血清T4C(r=0 .376 ,P <0 .0 1)均呈显著的正相关。结论 :2型DM患者血、尿T4C与尿Alb排出有一致性升高的趋势。尿T4C是晚期DN指标 ;血清T4C既是DM早期肾病的指标 ,也是晚期DN指标。

氨氯地平对高胆固醇大鼠心肌缺血再灌注时一氧化氮合酶的影响

目的 :探讨高胆固醇血症大鼠心肌缺血 再灌注损伤时氨氯地平对内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在冠脉血管内皮表达的影响。方法 :雄性Wistar大鼠分 4组 :单纯高胆固醇血症组 ;氨氯地平组 ;氨氯地平 +N 甲基亚硝基左旋精氨酸甲酯组 ;氨氯地平 +假手术组。大鼠经高胆固醇喂养 6周后 ,开胸结扎左冠状动脉 ,缺血30min后 ,行再灌注 2 0min、2h。分别用免疫组织化学ABC法检测冠脉血管内皮eNOS和iNOS的表达水平。结果 :缺血前 ,氨氯地平可显著降低冠脉血管内皮iNOS表达 (P <0 .0 1)。缺血 30min ,高胆固醇血症组eNOS、iNOS表达明显减少 (P <0 .0 1) ,氨氯地平组eNOS表达上调 (P <0 .0 1) ,iNOS下调 ;再灌注 2 0min时 ,高胆固醇血症组冠脉血管内皮表达iNOS增多 ,氨氯地平组eNOS、iNOS表达明显下调 ;再灌注 2h时 ,氨氯地平组NO水平及eNOS、iNOS表达较高胆固醇血症组轻度降低。各时相点L NAME均可部分阻断氨氯地平对eNOS、iNOS的效应。结论 :在高胆固醇血症时、缺血期及再灌注早期 ,氨氯地平可调节eNOS、iNOS表达 ,减少心肌缺血 再灌注损伤。

抗CD20阳性淋巴瘤单抗真核表达载体的包装及增殖

在我国,恶性淋巴瘤在儿童和青年中所占比例较高。大部分恶性B细胞淋巴瘤呈CD20高表达状态,利妥昔单抗是针对CD20抗原的单克隆抗体药物,能准确地识别并与之结合，并通过人体免疫清除这些肿瘤细胞，然而该药物单独治疗B细胞淋马瘤的效率仅达到48%。本实验用包装细胞对抗CD20阳性淋马瘤单抗真核表达载体PLNCX/anti-CD20-scFv-Fc-￡进行包装，并通过测定病毒滴度的方法来检测其增殖情况，报告如下。

肝脂酶基因-514C/T变异对血脂的影响

目的:探讨肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T变异是否影响血脂水平。方法:选入符合录用标准者322例作血脂测定,从全血中用DNA试剂盒提取DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片断多态性方法检测HL基因多态性。结果:在调整年龄和体重指数(BMI)后,HL-514C/T基因型对血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平影响有统计学意义(P<0.01),其高低是T/T+T/C>C/C,这种效应与男性关系明显(P<0.01),但与女性关系不明显。结论:肝脂酶基因-514C/T变异可影响血脂水平,且存在男女性别差异,各HL基因型的分布无性别差异。

猪胆酸对体外缺血再灌注大鼠脑微血管内皮细胞ICAM-1的影响

目的观察大鼠脑微血管内皮细胞缺血再灌注损伤细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨清开灵有效组分猪胆酸阻抑脑缺血炎症反应的作用途径。方法体外培养大鼠脑微血管内皮细胞,氧糖剥夺法模拟缺血再灌注损伤,采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法半定量检测ICAM-1蛋白和mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组ICAM-1蛋白和mRNA的表达明显增高(P<0.01);与模型组比,猪胆酸显著降低ICAM-1的表达(P<0.05)。结论猪胆酸可能通过干预ICAM-1表达而阻抑脑缺血损伤炎症反应。

葛根素抗ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的炎症机制研究

目的:观察葛根素对ApoE基因敲除小鼠炎症因子的影响,探讨其是否能抗AS炎症反应;方法:将24只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、葛根素组、辛伐他汀组,每组8只,另取8只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。采用高脂喂养16周的方式建立AS模型,分别以胸主动脉与主动脉窦部位切片观察主动脉斑块形态,荧光定量PCR法检测小鼠主动脉斑块内IL-2、IL-6、TNF-α、hsCRP等炎症因子mRNA表达;结果:与正常对照组相比,模型组小鼠血脂与炎症因子mRNA水平明显增高,主动脉内有纤维斑块形成;辛伐他汀(5mg/kg)与葛根素(65mg/kg)均能明显降低炎症因子mRNA表达,并且能抑制斑块形成,葛根素效果更佳。结论:葛根素能降低AS斑块炎症因子的表达,抗炎机制可能是其抗AS的其中一个药理机制。