加强组织学与胚胎学教学与临床的联系

组织学与胚胎学是一门内容繁杂抽象并与多门基础和临床医学课程紧密联系的基础形态学科,在理论教学上加强和临床病例的联系,可在一定程度上调动学生的学习兴趣,提高教学效果。

护理专业组织学与胚胎学教学体会

组织学与胚胎学是医学生必修的一门基础学科,为了培养学生的学习兴趣,提高教学效果,重点从组织学与胚胎学的理论教学与实验教学两方面探讨在护理专业中的教学体会。

组织学与胚胎学实验教学改革的几点尝试

为了培养具有创新精神和实践能力的医学人才，随着医学教育模式的转变，实验教学的地位显得越来越重要。通过对组织胚胎学实验课的教学方法进行改革，增加了学生学习积极性和主动性，取得了良好的教学效果。

组织学与胚胎学学导式实验教学实践与体会

学导式教学法是以学生为主体,充分调动学生的积极性和主动性,在教师的指导下,引导学生掌握科学的学习方法,培养和提高了学生的自学能力、表达能力、发现问题解决问题的能力及团队合作精神。

体外受精-胚胎移植中胚胎质量和女方年龄与多胎妊娠的相关性

目的 :观察胚胎质量和女方年龄对体外受精胚胎移植 (IVFET)中多胎妊娠发生率的影响。方法 :选择每周期移植 3～ 4个胚胎的 32 5个IVFET治疗周期 (常规IVF 16 9周期 ,ICSI 15 5周期 ) ,分析移植胚胎质量和女方年龄对临床妊娠率和多胎妊娠率的影响。结果 :32 5个周期共移植 10 4 9个新鲜胚胎 ,≤ 35岁妇女移植胚胎中含不同数目 (0 ,1,2 ,≥ 3)高质量胚胎的种植率 (P <0 .0 1)和周期临床妊娠率 (P <0 .0 1)差别有显著性 ;多胎妊娠率随着移植好质量胚胎数的增加而升高 ,98%的多胎妊娠发生在≤ 35岁妇女中。 >35岁妇女移植胚胎中含不同数目高质量胚胎的种植率 (P >0 .0 5 )和周期临床妊娠率 (P >0 .0 5 )差别无显著性。结论 :移植胚胎质量和女方年龄是两个重要的预测妊娠和多胎妊娠的因素。根据移植胚胎质量和女方年龄进行个体化的胚胎移植是必要的。

中药水蛭对小白鼠胚胎发育的影响

妊娠小白鼠58只随机分组,至孕第7～11天给实验组孕鼠每天分别以500mg/kg(水蛭1组)及1000mg/kg(水蛭2组)的中药水蛭煎剂灌胃,至孕第18天记录各组的孕鼠和胎鼠体重,死胎、吸收胎及堕胎数。结果:水蛭1、2两组胎鼠体重下降,致畸作用显著,死胎、吸收胎比例升高;水蛭2组孕鼠体重下降,堕胎作用显著,与对照组比较,差异均有非常显著意义(P<0.01)。

中药蜈蚣对小鼠胚胎发育的影响

孕鼠161只随机分组,在孕期第7～11天给实验组分别以500mg(kg.d)(蜈蚣1组)及1000mg/kg.d)(娱蚣2组)的中药蜈蚣煎剂灌胃,至孕期18天记录各组孕鼠和胎鼠的发育情况.结果表明:蜈蚣1、2两组致畸作用明显.死胎,吸收胎比例升高:蜈蚣2组胎鼠和孕鼠的体重均下降,堕胎作用显著,与对照组比较,差异均有非常显著意义(P<0.01).

不同冷冻保护剂对冻融人卵巢组织形态学的影响

目的：比较两种冷冻保护剂对人卵巢组织形态学的影响，为人卵巢组织的最佳冷冻保护剂的选 择提供实验依据。方法：获取12例活检人卵巢组织标本进行冷冻保存，每例标本随机分为新鲜对照组乙 二醇(EG)组和丙二醇(PROH)组，冻融卵巢皮质块采用慢速冷冻法和快速解冻法，冻融前后的卵巢皮质 分别进行光学显微镜观察(存活率等)和透射电子显微镜观察(亚细胞结构)。结果：光镜观察新鲜对照 组、PROH 组及 EG 组的卵巢组织中卵泡正常率分别为(73． 57±4． 94) %、(68． 40±12． 31) %和(58． 48±15． 53) %。PROH 组与新鲜对照组，卵泡正常率差异无显著性(P＞0． 05) ，但 EG 组卵泡正常率低于新鲜对照组和 PROH 组，差异均有显著性(P＜0． 05) 。透射电镜观察发现，卵巢组织中细胞的大部分超微结构保存良好。 冷冻损伤细胞的超微结构主要表现为细胞浆内空泡，线粒体水肿、空泡化，核固缩等改变。EG 组与 PROH 组相比，卵母细胞胞浆内可见更多空泡，基质细胞及颗粒细胞发生核固缩更多。结论：实验结果提示人卵 巢皮质中细胞的大部分组织结构和超微结构能成功冷冻保存，冷冻损伤细胞的超微结构主要表现为细胞浆 内空泡，线粒体水肿、空泡化，核固缩等改变。应用慢冻快融法冷冻人卵巢组织 PROH 可能比 EG 更为合适。

冻融人胎儿卵巢组织异种移植的实验研究

目的探求冻融人胎儿卵巢组织异种移植后的生长发育能力。方法胎儿卵巢组织分为新鲜胎儿卵巢组织(新鲜组),慢冻-快融胎儿卵巢组织(冻融组),解冻的胎儿卵巢组织异种移植到8只裸鼠肾被膜下(移植组)三组。2个月后开始隔天注射孕马血清促性腺激素(PMSG),持续5个月。注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)36 h后裸鼠处死取得移植物。胎儿卵巢组织石蜡包埋后连续切片,进行组织学评价和增殖细胞核抗原(PCNA)的检测。结果冻融组和新鲜组中绝大多数是原始卵泡。与新鲜组相比,冻融组中正常及总的原始卵泡数虽有下降,异常原始卵泡数虽有升高,但均无显著性差异。移植组的原始卵泡数明显少于新鲜组和冻融组(7.2±1.64,20.4±5.68,17.2±4.27,P<0.05),但可见到数个形态正常的初级卵泡、次级卵泡和窦卵泡。三组的原始卵泡均未见有PCNA阳性表达,PCNA阳性表达见于移植组初级卵泡的颗粒细胞和卵母细胞、次级卵泡和窦卵泡的颗粒细胞。结论冻融人胎儿卵巢组织异种移植后能存活,卵泡能正常发育到窦卵泡。

大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定

目的：探索大鼠胚胎神经干细胞的体外分离培养条件,并观察神经干细胞增殖、分化的特点。方法：从孕14 d SD胎鼠前脑组织分离神经干细胞,用DMEM／F12无血清培养液,加入表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),进行体外扩增、培养和传代。传3～4代的神经细胞球在含10％胎牛血清的DMEM／F12培养液中贴壁诱导分化培养。采用免疫荧光法鉴定神经干细胞和分化的神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。结果：从孕14 d SD胎鼠前脑分离的细胞在含有EGF和bFGF的无血清培养液中能形成大量的神经细胞球,这些神经细胞球可在体外增殖及传代培养,经nestin染色鉴定,大部分为阳性细胞。神经细胞球在血清培养液贴壁培养后可分化出神经纤维细丝(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖脑苷脂(Gal-C)表达阳性的细胞。结论：从孕14 d SD胎鼠前脑分离的细胞具有自我更新能力和多向分化潜能,属于神经干细胞；在含有EGF和bFGF的无血清培养液中,神经干细胞能在体外大量扩增。

胎儿手足皮肤皮脊发生学的组织学观察

用组织学方法观察26例引产胎儿的手足表皮脊线的胚胎发生及分化特征,对手足皮脊发生的时间及分化程度作了比较。结果表明:(1)手皮脊分化始于胎龄12～14wk;腺褶和初级乳头在胎龄12～14wk形成;沟褶和次级乳头于胎龄16wk出现;汗腺原基现于胎龄16wk;胎龄17wk表皮脊线外显。(2)足趾皮脊分化始于14～16wk、比手指皮脊分化迟2 wk左右。

腹部外科手术操作对大鼠肠道运动功能和肠神经系统的影响

目的观察不同的腹部外科手术操作对大鼠肠道运动功能以及肠神经系统内乙酰胆碱酯酶(AchE)神经元和一氧化氮合酶(NOS)神经元的影响,探讨腹部外科手术对肠道运动功能影响的神经机制。方法48只SD大鼠随机分为单纯开腹组、肠道按摩组、肠道手术组和正常对照组(n=12),各组术后灌服炭末,测定小肠炭末推进率,同时取各组相同部位的小肠和大肠,制作肠肌间神经丛铺片标本,采用AchE和NADPH-d组化染色观察AchE、NOS阳性神经元的分布密度和染色情况。结果炭末推进率(%)肠道手术组、肠道按摩组低于单纯开腹组和正常对照组(P<0.01),肠道手术组低于肠道按摩组(P<0.05),单纯开腹组与对照组比较降低不明显(P>0.05);与正常对照组比较,肠道手术组、肠道按摩组的小肠和大肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量(个/200倍视野)减少(P<0.01),阳性表达减弱,NOS阳性神经元数量增多(P<0.01),阳性表达增强,节间束纤维粗大,而单纯开腹组的变化不明显;与肠道按摩组比较,肠道手术组小肠和大肠肌间神经丛内的NOS阳性神经元数量较多(P<0.01),胞体大而染色深,节间束纤维较粗大,而AchE阳性神经元数量和染色的差异不明显。结论腹部外科手术在一定程度上会影响或损伤肠神经系统的胆碱能和氮能神经,这可能是腹部外科手术后发生肠道运动功能障碍的神经机制之一。

肠淤血大鼠肠神经系统内胆碱能和氮能神经的改变

目的研究肠淤血大鼠肠神经系统内乙酰胆碱酯酶(AchE)神经元和一氧化氮合酶(NOS)神经元的改变,以探讨肠淤血影响肠道运动功能的神经机制。方法SD大鼠分成实验组(依据肠道淤血时间分为肠淤血20min组、60min组)和对照组,取各组相同部位的回肠,制作肠肌间神经丛铺片标本,采用AchE和NADPH-d组化染色,观察比较各组AchE、NOS阳性神经元的分布密度和染色情况。结果与对照组比较,实验组大鼠的回肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量减少(P<0·01),阳性表达减弱,而NOS阳性神经元数量增多(P<0·01),阳性表达增强;与肠淤血20min组比较,60min组AchE阳性神经元较少(P<0·01),胞体染色较浅,而NOS阳性神经元数量较多(P<0·01),胞体大而染色深,但节间束NOS阳性神经纤维稀少。结论肠淤血会影响或损伤肠神经系统的胆碱能和氮能神经,这可能是肠淤血后肠道运动功能障碍发生的神经机制。

内源性神经营养因子-3在电针刺激治疗脊髓损伤中的作用

目的探讨内源性的神经营养因子-3(NT-3)在成年猫脊髓去传入损伤后电针刺激治疗中的作用。方法成年猫25只,雌雄不拘,随机分为左侧L1-L5、L7-S2背根去传入手术组(手术组,保留L6为备用背根)、手术+电针刺组(电针组)、手术+电针刺+NT-3抗体封闭组(抗体封闭组),2个月后对相应脊髓节段和备用背根节进行霍乱毒素B亚单位结合辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)形态学示踪及免疫组化、酶组化观察并进行组间比较。结果各组背根节感觉神经元中枢投射轴突终末集中分布在脊髓后角Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ板层内侧,且电针组感觉神经元突起标记点密度(171.5±12.1/100μm2)明显高于手术组(101.2±6.5/100μm2)及抗体封闭组(142.3±12.3/100μm2,P<0.05)。结论电针刺可能通过上调NT-3的表达促进损伤脊髓和感觉神经元的形态和功能修复而参与脊髓可塑性过程。

肝门阻断对大鼠肠道肌间神经丛内NOS阳性神经元的影响

目的:研究肝门阻断后大鼠肠道肌间神经丛内一氧化氮合酶(NOS)神经元表达的变化,以探讨肝门阻断对肠道功能影响的神经机制.方法:SD大鼠分成实验组(根据阻断时间分为肝门阻断20min组、40min组及60min组)和对照组,取各组相同部位的小肠和结肠,制作肠肌间神经丛标本行NADPH-d组化染色,观察和比较各组NOS阳性神经元的分布密度和染色情况.结果:与对照组比较,实验组小肠(28.89±5.49,32.22±7.03,36.89±8.58vs21.78±4.56,P<0.01)和结肠(34.22±8.82,39.39±8.91,44.61±9.94vs25.94±5.59,P<0.01)的肠肌间神经丛内NOS阳性神经元数量增多,胞体大而染色深;实验组之间比较,肝门阻断60min组的NOS阳性神经元数量多于肝门阻断20min组(小肠:36.89±8.58vs28.89±5.49;结肠:44.61±9.94vs34.22±8.82,P<0.05),肝门阻断60min组和40min组的NOS阳性神经元胞体较大,染色较深,但节间束NOS阳性神经纤维稀少.结论:肝门阻断会影响或损伤肠神经系统的NO能神经,这可能是术后肠道运动功能障碍发生的神经机制.

中药苦参碱对体外培养人宫颈癌Hela细胞的抑制作用

目的:探讨中药苦参碱对体外培养的人宫颈癌细胞株Hela细胞的抑制作用。方法:选用人宫颈癌Hela细胞进行体外培养,以0.125～2.0 mg/ml的苦参碱分别处理Hela细胞24～72 h后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,透射电镜进行形态学观察,RT-PCR半定量检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的mRNA表达水平。结果:苦参碱对Hela细胞有抑制作用,呈剂量和时间依赖性,其24 h半数抑制浓度(IC 50)为1.074 mg/ml;流式细胞仪检测到细胞在苦参碱作用后,细胞凋亡率增加;透射电镜观察发现部分细胞发生凋亡早期改变;RT-PCR结果显示凋亡相关基因Bcl-2/Bax比值随药物剂量增加而逐渐减少。结论:苦参碱对人宫颈癌Hela细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡可能是其机制之一。

糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛内氮能神经和Cajal间质细胞的变化

目的:研究糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛氮能神经和Cajal间质细胞(ICC)的变化规律,并探讨肠功能异常的机制。方法:用链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型(n=12),同时设同批次同种系大鼠6只作为对照组(n=6)。3个月后采用NOS组织化学染色法观察糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛的形态学变化,并对两组大鼠十二指肠肌间神经丛内NOS阳性神经元、神经节、节间束和Cajal间质细胞的密度进行了测定。结果:糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元、神经节、节间束和ICC数量均减少(P<0.01)。结论:糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛氮能神经和ICC的改变可能是糖尿病引起肠功能障碍的原因。

大鼠回肠肌间神经丛 Cajal 间质细胞的乙酰胆碱酯酶组化染色法和新功能

目的：寻找 Cajal 间质细胞(interstitial cell of cajal，ICC)新染色法，并明确大鼠胃 肠道 ICC 的吞噬功能。方法：选用健康成年 Wistar 大鼠进行苔盼蓝(TB)活体注射，同时，对回肠肌间 神经丛进行乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学染色。结果：光镜下，在回肠肌间神经丛内，可观察到两种 不同染色的细胞：① AChE 阳性神经元，大多呈 AChE 强阳性，胞体多为圆形或卵圆形，部分为三角形或 不规则形，体积大，胞体直径达20～25μm，胞浆内含有棕褐色 AChE 阳性颗粒，细胞核不着色。AChE 阳 性神经元多以8～12个细胞密集成肠肌间神经节。神经节之间，由 AChE 阳性神经纤维束相连接。② TB 阳 性细胞即 Cajal 间质细胞，胞核大而圆，不着色，核周质少，胞质内含有 TB 阳性颗粒，体积小，胞体直 径6～8μm，多位于三级神经纤维束分支所形成的网眼中，肠神经节内未见 TB 阳性细胞。ICC 有二种类 型，Ⅰ型细胞数目多，胞体呈三角形或不规则形，突起明显，常发出2～5个突起；Ⅱ型细胞数目少，胞 体呈卵圆形，突起不明显。结论：此染色法可很好地显示 ICC 及其与神经元的形态学联系，同时也证实 了 ICC 具有吞噬功能，ICC 可能是胃肠道的重要免疫防御细胞之一。

红外线及特定电磁波辐照对小鼠周围血象的影响

经红外线及特定电磁波(TDP)辐照的小鼠周围血象与对照组比较.红外线15分钟组的淋巴细胞占白细胞分类的百分比,TDP15分钟组与TDP 30分钟组的白细胞总数及淋巴细胞占白细胞分类的百分比均明显增高.提示一定剂量的红外线及TDP辐照有增强机体免疫功能的效应.

针刺对备用根猫背根节神经元IGF-表达的影响

目的观察胰岛素样生长因子-I（IGF—I）在正常猫、部分去背根猫及针刺部分去背根猫的L6手术侧背根节（DRG）表达的时空变化，以了解IGF—I与针刺促进脊髓可塑性的关系。方法25只成年健康雄猫随机分为5组：即正常组、备用根术后7d组与14d组（动物行单侧部分去背根手术，即切除一侧L1～L5、L7～S2背根节，保留L6为备用根）、针刺备用根术后7d组与14d组（动物行单侧部分去背根术后针刺L6脊神经外周支配区内的两组穴位）。动物于术后7d、14d分别处死，取各组（手术侧）L。背根节，-20℃恒冷箱切片，片厚20μm，用兔抗IGF—I（1：200）抗体行免疫组化ABC法染色。观察、计数并比较各组背根节IGF—I阳性神经元的分布、含量及时空变化。结果针刺备用根7d组，DRGIGF—I阳性神经元数较术后7d组明显增加（P〈0．05），但仍低于正常水平；针刺14d，DRG阳性神经元比术后14d亦增多（P〈0．01），且恢复至正常水平。与针刺7d组比较，DRGIGF—I阳性神经元在针刺14d时明显增多（P〈0．05）。结论针刺可增加针刺侧DRG内IGF—I阳性中小神经元数。提示针刺后IGF—I在背根节的表达变化可能与针刺促进脊髓可塑性有关。