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人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液诱导破骨前体细胞的分化成熟
被引量:
4
1
作者
汤丽苑
徐钰
+2 位作者
陈瑾
刘新华
俞康
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期649-654,共6页
目的:探讨人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液对破骨前体细胞RAW264.7的影响。方法:Western blotting检测可溶性核因子κB受体激活剂配体(soluble receptor activator of NF-κB ligand,sRANKL)的蛋白表达。抗酒石酸酸性磷酸酶(tart...
目的:探讨人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液对破骨前体细胞RAW264.7的影响。方法:Western blotting检测可溶性核因子κB受体激活剂配体(soluble receptor activator of NF-κB ligand,sRANKL)的蛋白表达。抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察RAW264.7细胞的分化成熟情况。RT-PCR法检测RAW264.7细胞TRAP和cathepsin K mRNA的表达。结果:Western blotting法证实RPMI8226细胞条件培养液中含有sRANKL。TRAP染色发现RPMI 8226细胞条件培养液能诱导RAW264.7细胞分化为TRAP阳性的多核成熟破骨细胞。人抑制性RANKL单克隆抗体拮抗30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的作用,且具有剂量依赖性。30%RPMI 8226细胞条件培养液能刺激RAW264.7细胞上调TRAP和cathepsin KmRNA表达。结论:人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226条件培养液中的sRANKL具有促RAW264.7破骨前体细胞分化成TRAP阳性的多核成熟破骨细胞的生物活性。人抑制性RANKL单克隆抗体阻断30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的诱导分化作用,且具有浓度依赖性。
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关键词
多发性骨髓瘤
破骨细胞
核因子κB受体激活剂配体
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职称材料
载脂蛋白B、E基因多态性与浙南几种常见疾病的相关性分析
被引量:
5
2
作者
汤丽苑
王小同
+3 位作者
俞康
张怀勤
郑景晨
谭映霞
《温州医学院学报》
CAS
2007年第1期14-17,共4页
目的:探讨载脂蛋白B、E(ApoB、E)基因频率与浙南地区几种常见疾病的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,检测浙南地区41例Ⅱ型糖尿病、68例高血压病、26例冠心病、40例脑出血、40例脑梗死、23例再生...
目的:探讨载脂蛋白B、E(ApoB、E)基因频率与浙南地区几种常见疾病的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,检测浙南地区41例Ⅱ型糖尿病、68例高血压病、26例冠心病、40例脑出血、40例脑梗死、23例再生障碍性贫血患者和60例正常人的ApoB、E基因的多态性。结果:Ⅱ型糖尿病组ApoB基因X+,E-等位基因频率高于正常对照组(P<0.05),再生障碍性贫血组X+,E-等位基因频率明显高于正常对照组(P<0.01)。冠心病组X+等位基因频率与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组、冠心病组和高血压病组ApoE基因ε4等位基因频率较正常组增高(P<0.05)。结论:ApoB、E基因多态性与浙南地区几种常见疾病有密切的相关性,可作为危险因子来早期预测疾病的易感人群。
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关键词
载脂蛋白B基因
载脂蛋白E基因
基因多态性
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职称材料
重组CD13单链抗体/蝎毒素AGAP原核表达质粒的构建
被引量:
1
3
作者
骆超
倪吴花
+4 位作者
胡永仙
谭映霞
沈志坚
江松福
俞康
《温州医学院学报》
CAS
2009年第3期213-216,共4页
目的:构建pRSETA/AGAP/CD13scFv重组表达质粒,为重组CD13单链抗体/蝎毒素AGAP融合蛋白的表达奠定实验基础。方法:利用RT-PCR法从东亚钳蝎尾腺中获得AGAP目的基因,并与克隆质粒TOPO载体连接转入DH5α菌,用EcoR I和Hind III将目的基因从...
目的:构建pRSETA/AGAP/CD13scFv重组表达质粒,为重组CD13单链抗体/蝎毒素AGAP融合蛋白的表达奠定实验基础。方法:利用RT-PCR法从东亚钳蝎尾腺中获得AGAP目的基因,并与克隆质粒TOPO载体连接转入DH5α菌,用EcoR I和Hind III将目的基因从克隆质粒上切下并与同样双酶切后的表达质粒pRSETA连接;在含CD13单链抗体(CD13scFv)的pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP质粒中获得CD13scFv目的基因,用EcoR I、Xho I双酶切并与同样双酶切后的pRSETA/AGAP连接转入DH5α菌,提取重组质粒进行酶切及测序鉴定。结果:目的基因AGAP与表达质粒pRSETA连接,成功构建了pRSETA/AGAP重组质粒;目的基因CD13scFv再与该重组质粒连接,成功构建了pRSETA/AGAP/CD13scFv。结论:AGAP目的基因能经RT-PCR法获得,并能成功与表达质粒连接,构建pRSETA/AGAP;目的基因CD13scFv能由pSecTag2HygroC质粒中获得,并成功与pRSETA/AGAP连接,得pRSETA/AGAP/CD13scFv重组质粒。为该重组质粒体外融合蛋白的表达及今后研究CD13scFv和蝎毒素AGAP协同性杀伤CD13阳性肿瘤细胞提供了良好的实验基础及理论依据。
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关键词
CD13
单链抗体
蝎毒素
AGAP
质粒
肿瘤
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职称材料
题名
人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液诱导破骨前体细胞的分化成熟
被引量:
4
1
作者
汤丽苑
徐钰
陈瑾
刘新华
俞康
机构
温州
医学院
附属第一医院血液科
温州
医学院
温州
医学院
血液
肿瘤与
移植
免疫
研究所
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期649-654,共6页
基金
温州医学院5010重大项目子课题(No.XNK05005)
文摘
目的:探讨人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液对破骨前体细胞RAW264.7的影响。方法:Western blotting检测可溶性核因子κB受体激活剂配体(soluble receptor activator of NF-κB ligand,sRANKL)的蛋白表达。抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察RAW264.7细胞的分化成熟情况。RT-PCR法检测RAW264.7细胞TRAP和cathepsin K mRNA的表达。结果:Western blotting法证实RPMI8226细胞条件培养液中含有sRANKL。TRAP染色发现RPMI 8226细胞条件培养液能诱导RAW264.7细胞分化为TRAP阳性的多核成熟破骨细胞。人抑制性RANKL单克隆抗体拮抗30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的作用,且具有剂量依赖性。30%RPMI 8226细胞条件培养液能刺激RAW264.7细胞上调TRAP和cathepsin KmRNA表达。结论:人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226条件培养液中的sRANKL具有促RAW264.7破骨前体细胞分化成TRAP阳性的多核成熟破骨细胞的生物活性。人抑制性RANKL单克隆抗体阻断30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的诱导分化作用,且具有浓度依赖性。
关键词
多发性骨髓瘤
破骨细胞
核因子κB受体激活剂配体
Keywords
Multiple myeloma
Osteoclast
Receptor activator of NF-κB ligand
分类号
R733.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
载脂蛋白B、E基因多态性与浙南几种常见疾病的相关性分析
被引量:
5
2
作者
汤丽苑
王小同
俞康
张怀勤
郑景晨
谭映霞
机构
温州
医学院
血液
肿瘤与
移植
免疫
研究所
温州
医学院
第二附属医院神经内科
温州
医学院
第一附属医院心内科
温州
医学院
第一附属医院内分泌科
出处
《温州医学院学报》
CAS
2007年第1期14-17,共4页
基金
浙江省卫生厅科研基金资助项目。
文摘
目的:探讨载脂蛋白B、E(ApoB、E)基因频率与浙南地区几种常见疾病的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,检测浙南地区41例Ⅱ型糖尿病、68例高血压病、26例冠心病、40例脑出血、40例脑梗死、23例再生障碍性贫血患者和60例正常人的ApoB、E基因的多态性。结果:Ⅱ型糖尿病组ApoB基因X+,E-等位基因频率高于正常对照组(P<0.05),再生障碍性贫血组X+,E-等位基因频率明显高于正常对照组(P<0.01)。冠心病组X+等位基因频率与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组、冠心病组和高血压病组ApoE基因ε4等位基因频率较正常组增高(P<0.05)。结论:ApoB、E基因多态性与浙南地区几种常见疾病有密切的相关性,可作为危险因子来早期预测疾病的易感人群。
关键词
载脂蛋白B基因
载脂蛋白E基因
基因多态性
Keywords
Apolipoprotein B
Apolipoprotein E
gene polymorphism
分类号
R394.5 [医药卫生—医学遗传学]
R541 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
重组CD13单链抗体/蝎毒素AGAP原核表达质粒的构建
被引量:
1
3
作者
骆超
倪吴花
胡永仙
谭映霞
沈志坚
江松福
俞康
机构
温州
医学院
附属第一医院血液科
温州医学院肿瘤与移植免疫研究所
出处
《温州医学院学报》
CAS
2009年第3期213-216,共4页
基金
浙江省自然科学基金资助项目(Y206383)
文摘
目的:构建pRSETA/AGAP/CD13scFv重组表达质粒,为重组CD13单链抗体/蝎毒素AGAP融合蛋白的表达奠定实验基础。方法:利用RT-PCR法从东亚钳蝎尾腺中获得AGAP目的基因,并与克隆质粒TOPO载体连接转入DH5α菌,用EcoR I和Hind III将目的基因从克隆质粒上切下并与同样双酶切后的表达质粒pRSETA连接;在含CD13单链抗体(CD13scFv)的pSecTag2HygroC/CD13-1/RFP质粒中获得CD13scFv目的基因,用EcoR I、Xho I双酶切并与同样双酶切后的pRSETA/AGAP连接转入DH5α菌,提取重组质粒进行酶切及测序鉴定。结果:目的基因AGAP与表达质粒pRSETA连接,成功构建了pRSETA/AGAP重组质粒;目的基因CD13scFv再与该重组质粒连接,成功构建了pRSETA/AGAP/CD13scFv。结论:AGAP目的基因能经RT-PCR法获得,并能成功与表达质粒连接,构建pRSETA/AGAP;目的基因CD13scFv能由pSecTag2HygroC质粒中获得,并成功与pRSETA/AGAP连接,得pRSETA/AGAP/CD13scFv重组质粒。为该重组质粒体外融合蛋白的表达及今后研究CD13scFv和蝎毒素AGAP协同性杀伤CD13阳性肿瘤细胞提供了良好的实验基础及理论依据。
关键词
CD13
单链抗体
蝎毒素
AGAP
质粒
肿瘤
Keywords
CD13
single-chain antibody
scorpion toxin
AGAP
plasmid
tumor
分类号
R551.3 [医药卫生—血液循环系统疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液诱导破骨前体细胞的分化成熟
汤丽苑
徐钰
陈瑾
刘新华
俞康
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
4
下载PDF
职称材料
2
载脂蛋白B、E基因多态性与浙南几种常见疾病的相关性分析
汤丽苑
王小同
俞康
张怀勤
郑景晨
谭映霞
《温州医学院学报》
CAS
2007
5
下载PDF
职称材料
3
重组CD13单链抗体/蝎毒素AGAP原核表达质粒的构建
骆超
倪吴花
胡永仙
谭映霞
沈志坚
江松福
俞康
《温州医学院学报》
CAS
2009
1
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职称材料
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