补锌对酒精性肝病的影响及其分子机制

目的:本研究是为了观察饮食补充锌减轻酒精性肝病损伤的作用及与HNF-4α的关系。方法:选用成年C57BL/6小鼠40只,按随机数字表分为4组(n=10):正常对照组、酒精中毒组、正常补锌组及酒精补锌组,用不同饮食喂养6个月处死,在正常补锌组和酒精补锌组小鼠饮用水中加入硫酸锌,使锌的含量达到75 mg/L。取各组小鼠肝组织进行病理切片及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色,RT-PCR检测肝细胞核因子-4α(HNF-4α)含量,Western blot检测肝组织HNF-4α蛋白表达,检测"肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量"。结果:酒精中毒组小鼠HNF-4α转录及表达均明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),该组小鼠MDA含量增高,SOD活性下降与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);而酒精补锌组小鼠PCNA阳性肝细胞数目及HNF-4α蛋白表达水平明显高于酒精中毒组,差异有统计学意义(P<0.05),该组小鼠SOD活性增加,MDA下降,与酒精中毒组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:长期酒精喂养导致小鼠氧化还原失衡,而补锌可逆转该状态。我们推测饮食补锌可能是通过增加HNF-4α的转录及表达而增强酒精喂养小鼠的肝再生,因此,饮食补锌可能对酒精性肝病有较好的影响。

锌对酒精性肝病小鼠的作用研究

为探究膳食补充锌是否改善肝再生,选用12周大的雄性C57BL/6小鼠40只,按随机数字表法分为4组:正常对照组、酒精中毒组、正常补锌组及酒精中毒补锌组,予不同的饮食喂养6个月后,通过增殖细胞核抗原(PCNA)阳性标记的肝细胞数目评价了肝细胞再生状况,并检测了超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量评估肝损伤的氧化应激状态。结果表明,酒精中毒补锌组小鼠PCNA阳性肝细胞数目增加,与酒精中毒组相比差异有统计学意义(P<0.05);酒精中毒组MDA含量增多,SOD含量下降与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);而酒精中毒补锌组SOD增多,MDA下降,与酒精中毒组相比差异有统计学意义(P<0.05)。提示长期酒精喂养导致小鼠抗氧化能力下降,而补锌可逆转氧化还原失衡的状态。膳食补锌增强酒精喂养小鼠的肝再生,可能对酒精性肝病有益。

HPL-CECD法检测小鼠体内多巴胺及其代谢产物

建立了HPLC-电化学检测法同时测定小鼠血浆及脑组织中多巴胺及其代谢产物的方法。采用安捷伦水相柱,流动相为V(甲醇)+V(水)=10+90,其中水相中含NaH2PO4.H2O,KCl,EDTA,辛烷磺酸钠,流量0.25 mL.min-1,检测电压0.52 V。结果表明,线性范围:多巴胺(DA)25～750 ng,多巴烯(DOPAC)25～750 ng,高香草酸(HVA)50～1 000 ng,线性关系与精密度良好;该法操作简单、快速、准确,可用于检测小鼠血浆及脑组织中多巴胺及其代谢产物的含量。

补锌对小鼠酒精性肝病的作用及对HNF-4α的影响

目的 检测膳食补充锌改善肝再生是否能通过增加肝细胞核因子-4α （HNF-4α）的表达来实现.方法 选用12周雄性C57BL/6小鼠40只,按随机数字表法分为4组：正常对照组、酒精中毒组、正常补锌组及酒精补锌组,予不同的饮食喂养6个月后通过增殖细胞核抗原（PCNA）阳性标记的肝细胞数目评价肝细胞再生状况,Western blotting法检测HNF-4α蛋白表达,检测超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量评估肝损伤的氧化应激状态.结果 酒精中毒组小鼠HNF-4α表达减少,与正常对照组小鼠的差异有统计学意义（P＜0.05）,而酒精补锌组小鼠PCNA阳性肝细胞数目增加及HNF-4α蛋白表达水平升高,与酒精中毒组的差异有统计学意义（P＜0.05）.酒精中毒组MDA含量增多,SOD含量下降与正常对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）,而酒精补锌组SOD增多,MDA下降,与酒精中毒组的差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 长期酒精喂养导致小鼠抗氧化能力下降,而补锌可逆转氧化还原失衡的状态.酒精喂养小鼠补充锌可以增强肝再生,这与HNF-4α的增加有关,膳食补锌可能对酒精性肝病有较好的影响.

吡非尼酮抗百草枯中毒小鼠肺纤维化的研究

目的探讨吡非尼酮（PF）对百草枯（PQ）中毒小鼠肺纤维化的治疗作用，为临床治疗提供理论依据。方法雄性ICR小鼠90只，随机分为正常对照组、PQ组、地塞米松组、25、50和100mg／kgPF组，每组15只。正常对照组小鼠一次性空腹灌胃给予生理盐水，2h后给予质量分数为1％羧甲基纤维素（CMC）灌胃，再每天定时空腹灌胃同等量CMC；PQ组、地塞米松组及各PF剂量组小鼠给予PQ100mg／kg一次性灌胃染毒，灌胃后2h，再每天定时PQ组给予0．02ml／lOgCMC灌肠，PF组给予PF（25、50、100mg／kg）和地塞米松（0．02ml／10g）灌胃，每天1次，共49d。计算肺系数，HE染色，光学显微镜下观察肺组织病理改变；测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量，转化生长因子（TGF—β）的mRNA表达水平、蛋白表达水平，支气管肺泡灌洗液（BALF）中的TGF—β，蛋白含量。结果PQ组3d生存率为53．33％，25、50、100mg／kgPF组3d生存率分别为46．67％、73．33％、86．67％，地塞米松组3d生存率为80％，地塞米松组、50、100mg／kgPF组3d生存率明显高于PQ组和25mg]kgPF组，差异有统计学意义（P〈0．05）。25、50及100mg／kgPF组小鼠肺系数均明显低于PQ组，差异有统计学意义（P〈0．05）。地塞米松组肺组织中HYP含量为（50．95±11．65）mg／g，25、50、100mg／kgPF组HYP含量分别为（44．52±9．48）、（43．27±6．01）、（40．82±5．90）mg／g，较PQ组[（74．27±3．68）mg／g]明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．01）。地塞米松组BALF中TGF-β1蛋白含量为（22．03±7．27）mg／ml，25、50、100mg／kgPF组TGF-β1蛋白含量分别为（55．33±17．50）、（27．75±5．84）、（21．31±6．82）mg／ml，与PQ组[（52．52±15．51）mg／m1]相比，明显降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；100mg／kgPF组肺组织TGF—β1 mRNA表达水平与PQ组相比，明显下降，差异有统计学意义（P〈0．01）与PQ组比较，地塞米松组，50、100mg／kgPF组肺组织中TGF—β1蛋白表达下降，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PF可以减少百草枯中毒小鼠肺组织胶原沉积，减轻肺部纤维化程度。