高等医学网络教学缺陷和对策的几点思考

网络教学是一种基于现代网络信息技术的教学方式,被广泛用于教学与辅助教学。各种网络教学平台和教学网络应运而生,其优点不言而喻。然而,网络教学作为一种新生事物和虚拟化的教学环境仍然存在较多缺陷。笔者根据网络教学的缺点及其对策提出几点建议。

对《药理学》规划教材中有关受体概念的思考

对医学类本科使用的卫生部规划教材《药理学》(第六版)一书中关于受体理论部分的一些内容进行了思考,包括药物亲和力与内在活性的比较,部分激动药与反向激动药的概念等。

N-乙酰半胱氨酸和氯胺酮联用对脑缺血再灌注损伤的影响

目的:研究巯基供体物质N 乙酰半胱氨酸(NAC)和非竞争性NMDA受体拮抗剂氯胺酮(KT)联用对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法:雄性ICR小鼠,随机分为假手术组、生理盐水组(0 .0 1L·g- 1)、氯胺酮组(15mg·kg- 1)、N 乙酰半胱氨酸组(75mg·kg- 1)和联合组(KT 15mg·kg- 1+NAC75mg·kg- 1)。参照蒋晓帆等建立的方法,制备局灶性短暂性脑缺血再灌注模型(tMCAO) ,再灌注后6、2 4h测定神经行为缺陷评分,处死TTC染色测定脑梗死面积百分比;制备不完全性脑缺血再灌注模型(2 VO) ,在再灌注0 .5、2和6h时取全脑制成10 %匀浆,比色法测定MDA含量、SOD和GSH Px活力。结果:(1)短暂性局灶性脑缺血再灌注后6、2 4h ,各组小鼠脑组织均有不同程度梗死灶、神经行为缺陷明显,与生理盐水组比较,药物联合组可显著改善缺血再灌注小鼠的神经行为缺陷(均为P <0 .0 1) ,减少脑梗死面积百分比(均为P <0 .0 1) ,药物单用对以上指标有轻度的改善作用(P >0 .0 5 )。(2 )联合用药可明显改善脑细胞损伤。(3)与假手术组比较,不完全性全脑缺血再灌注损伤0 .5、2和6h后,生理盐水组小鼠MDA含量显著升高(均为P <0 .0 1) ,SOD活性(均为P <0 .0 1)和GSH Px活性均显著降低(均为P <0 .0 1)。与生理盐水组比较。

L-苹果酸对急性铝中毒小鼠脑组织形态及记忆功能的保护作用

目的:建立小鼠急性铝中毒模型并观察L-苹果酸对记忆功能及脑组织形态的保护作用。方法:采用脑室注射氯化铝(AlCl3)的方法造成小鼠急性铝中毒模型,学习记忆功能的检测采用跳台法,病理切片检查海马组织的损伤。结果:与对照组(0.50±0.92)次相比,模型组小鼠跳台训练的错误次数(6.50±7.76)次明显增加(t=2.979,P<0.05),海马组织有大量的神经元细胞发生水变性,核固缩,并可见神经元的坏死和噬神经细胞现象,呈筛孔状。与模型组(6.50±7.76)次比较;L-苹果酸低剂量组错误次数(1.25±2.09)次明显减少(t=2.266,P<0.05),海马组织多见正常神经元。结论:小鼠脑室注射AlCl3可造成明显的记忆功能损害及海马组织的神经元损伤;而L-苹果酸对急性铝中毒小鼠脑组织形态及记忆功能均有明显的保护作用。

HPLC法研究奥卡西平及代谢产物在小鼠体内的组织分布

目的:建立小鼠血浆和组织中奥卡西平(oxcarbazepine,OXC)及其活性代谢产物10-羟基卡马西平(10-hydroxycarbaz—epine,MHD)的 HPLC 分析方法,并研究其小鼠体内的组织分布。方法:选择卡马西平为内标,采用 Hypersil—ODS C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水(63:37)为流动相,流速0.8 mL·min^(-1),柱温30℃,在紫外波长为210 nm 处检测。所得数据用 DAS 药动学程序处理,求出有关的药动学参数。结果:血浆 OXC 和 MHD 在0.05～10.0 mg·L^(-1)的浓度范围内线性关系良好(r=0.9994),相对回收率为96.4%～107.6%,绝对回收率为75.1%～88.3%,日内、日间精密度的 RSD 均小于10%。OXC 和 MHD 在脂肪、心脏、脑及肝脏等组织分布较多,在血浆和多数组织中 OXC 的 C_(max)高,T_(max)、AUC 和 MRT 较小;而 MHD的 C_(max)低,T_(max)、AUC 和 MRT 明显大于 OXC。结论:该方法简便、准确、灵敏度高,可用于 OXC 和 MHD 的检测及药动学研究。

N-乙酰-L-半胱氨酸对氰化钠急性中毒小鼠的解毒作用

目的:研究N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对氰化钠(NaCN)的解毒作用。方法:观察并记录4种巯基化合物腹腔注射保护后,NaCN急性中毒小鼠的行为变化及72 h内惊厥和死亡鼠数;通过急性毒性实验测定NaCN组和NAC保护组急性小鼠LD50;观察并比较灌胃NaCN染毒1 min后,NAC联用硫代硫酸钠(Na2S2O3)组与亚硝酸钠(NaNO2)联用Na2S2O3组小鼠的行为变化及72 h惊厥和死亡鼠数。结果:4种巯基化合物对NaCN急性中毒小鼠都有不同程度的保护作用,其中NAC效果最显著(P<0.01);经腹腔注射NAC保护后,能显著提高NaCN急性中毒小鼠LD50(P<0.01);小鼠腹腔注射NaCN染毒1 min后NAC联用Na2S2O3治疗,72 h内惊厥数和死亡数显著下降(P<0.01),与NaNO2联用Na2S2O3组无差异。结论:巯基化合物具有抗氰作用,且与其巯基相关,NAC对NaCN急性中毒有明显解毒作用。

神经保护剂联用对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察氯胺酮(KT)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)和褪黑激素(MT)三种药物单用和联用对小鼠短暂性局灶性脑缺血再灌注损伤和不完全性脑缺血再灌注损伤的改善作用。方法经前期正交设计试验确定三药最佳剂量组合。雄性ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、氯胺酮组、N-乙酰半胱氨酸组、褪黑激素组、二联组(氯胺酮+N-乙酰半胱氨酸)及三联组(氯胺酮+N-乙酰半胱氨酸+褪黑激素)。各组动物分别制作短暂性局灶性脑缺血再灌注模型(tMCAO)和不完全性脑缺血再灌注模型(2-VO)。tMCAO小鼠缺血2h再灌注6h和24h时测定神经行为学评分后处死测定梗塞面积;2-VO小鼠在清醒状态下缺血5min再灌注0.5h、2h、6h后迅速处死,取全脑制成10%匀浆,比色法测定MDA含量、SOD和GSH-Px活力。数据采用SPSS10.0统计软件包进行分析。结果(1)tMCAO后缺血组出现严重的神经行为缺陷和大范围的梗塞,药物单用或联用可不同程度的改善缺血再灌注小鼠神经行为缺陷和减少梗塞范围,以三联用药为最佳(与模型组比较,均为P<0.01)。(2)2-VO小鼠MDA含量显著上升、SOD和GSH-Px活性明显受抑制,药物单用和联用可不同程度地降低缺血再灌注0.5h、2h和6h小鼠全脑组织MDA含量、提高SOD活力和GSH-Px活力,以三药联用最佳(与模型组比较,均为P<0.01)。结论本实验剂量下药物单用不能有效减轻损伤,二联组较各单用组显著地改善脑缺血再灌注损伤,三联组较二联组更为明显地改善小鼠脑缺血再灌注损伤。

高效液相色谱法同时检测兔血浆和脑脊液中的卡马西平及其环氧化物

目的建立家兔血浆和脑脊液中卡马西平（CBZ）及其活性代谢产物环氧化卡马西平（ECBZ）的高效液相色谱（HPLC）分析方法，并研究其药动学过程。方法选择奥卡西平为内标，采用Hypersil-ODS（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，以乙腈-水（63：37）为流动相，流速0．8mL·min^-1，柱温30℃，在紫外波长为210nm处检测。所得教据用3P87药动学程序处理，求出有关的药动学参数。结果CBZ和ECBZ在0．05～10．00mg·L^-1的浓度范围内线性关系良好（r=0．9999），平均回收率为99．6％～105．4％，日内、日间精密度RSD均〈7％。结论该方法简便、准确、灵敏度高，可用于CBZ和ECBZ的检测及药动学研究。

维心脉抗心肌缺血的实验研究

目的研究维心脉对实验性急性心肌缺血的保护作用及可能的机制。方法阻断犬冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,测量心外膜心电图(ECG)、Ⅱ导联心电图[ECG(Ⅱ)]、平均动脉压(MBP)、心肌耗氧指数及心肌梗死面积;以体内血栓形成仪刺激大鼠血栓形成,二磷酸腺苷(ADP),花生四烯酸及胶原诱导血小板聚集,测量血栓形成时间和血小板聚集抑制百分率。结果维心脉1.5和3.0 g·kg-1可明显降低心肌梗死犬的∑ST,NST及心肌氧耗指数,缩小心肌梗死范围,降低血压而对心率无明显影响。维心脉3个剂量组:2.0,4.0和8.0 g·kg-1能显著推迟大鼠实验性动脉血栓形成时间,抑制ADP,花生四烯酸及胶原诱导的血小板聚集。结论维心脉可通过降低心肌耗氧量,抑制血小板聚集和血栓形成从而较好的保护缺血心肌。

中国汉族人群CYP2C9常见多态性位点的检测及其与国外其他人群的比较研究

目的检测中国汉族人群细胞色素P450 2C9(CYP2C9)常见多态性位点的等位基因,为药物基因组学研究提供理论依据。方法用聚合酶链反应产物直接测序和基因克隆测序法对2127例中国汉族人群CYP2C9基因常见多态性位点CYP2C9*1、CYP2C9*2和CYP2C9*3等位基因进行检测,明确其在中国汉族人群中的等位基因及基因型频率分布,并与国外不同人群基因多态性进行比较研究。结果中国汉族人群CYP2C9基因常见等位基因CYP2C9*1、CYP2C9*2和CYP2C9*3的等位基因频率分别为96.94%、0.14%、2.92%,常见基因型CYP2C9*1/*1、CYP2C9*1/*2、CYP2C9*1/*3、CYP2C9*3/*3的基因型频率分别为94.12%、0.28%、5.36%、0.24%。结论中国汉族人群CYP2C9基因中以CYP2C9*1等位基因为最常见,CYP2C9*2和CYP2C9*3是中国汉族人群罕见等位基因;中国人群CYP2C9基因的等位基因频率与日本人群相近,与法国、西班牙和意大利等欧洲人群差异有统计学意义,该研究结果将为我国的临床药物基因组学研究提供有价值的理论依据。

米氮平所致不良反应571例文献分析

收集国内文献报道的米氮平引起的不良反应571例报告,进行统计分析。结果显示米氮平不良反应大多数比较轻微,偶有血液系统和生殖系统损害。近年来米氮平新的不良反应逐渐增多,临床应继续加强米氮平的不良反应监测与上报,确保患者安全用药。

盐酸伐昔洛韦片在健康志愿者体内的生物等效性

目的:研究盐酸伐昔洛韦片的人体相对生物利用度和生物等效性。方法:采用高效液相色谱法测定健康志愿者随机双交叉单剂量口服2种制剂的盐酸伐昔洛韦片后血浆中阿昔洛韦浓度。血浆经高氯酸沉淀蛋白,用 Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-水-2%冰醋酸(4:86:10)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为274 nm。结果:单剂量口服盐酸伐昔洛韦试验制剂和参比制剂后血浆阿昔洛韦的 C_(max)分别为(3.04±0.51)μg·mL^(-1)和(3.15±0.62)μg·mL^(-1);T_(max)分别为(1.20±0.25)h 和(1.15±0.33)h;AUC_(0～14)分别为(10.71±1.94)μg·h·mL^(-1)和(10.36±2.37)μg·h·mL^(-1);AUC_(0～∞)分别为(11.12±1.94)μg·h·mL^(-1)和(10.76±2.42)μg·h·mL^(-1)。试验制剂与参比制剂的人体相对生物利用度为(105.48±15.42)%。结论:2种制剂具有生物等效性。

马来酸依那普利片的健康人体生物等效性

目的:研究马来酸依那普利片的人体相对生物利用度和生物等效性。方法:健康志愿者20名,随机双交叉单剂量口服马来酸依那普利片试验制剂和参比制剂,剂量分别为20mg,用高效液相色谱(HPLC)法测定血浆中依那普利的浓度。用DAS药动学程序计算相对生物利用度并评价两种制剂生物等效性。结果:受试制剂与参比制剂的Cmax分别为(272.6±42.2)μg.L-1和(263.5±42.2)μg.L-1;tmax分别为(0.81±0.11)h和(0.80±0.10)h;AUC(0-∞)分别为(664.7±105.1)μg.h.L-1和(661.2±99.5)μg.h.L-1;AUC(0-inf)分别为(698.0±116.3)μg.h.L-1和(689.0±106.0)μg.h.L-1。试验制剂与参比制剂的人体相对生物利用度为(102.3±19.7)%,结论:试验制剂与参比制剂具有生物学等效性。

二甲基甲酰胺对动物的急性毒性实验研究

目的观察动物二甲基甲酰胺(DMF)急性中毒表现、病理变化及几种药物对其急性中毒保护作用。方法建立DMF急性经口中毒小鼠和兔实验模型,观察中毒小鼠和兔组织病理学及酶学变化、不同剂量DMF中毒表现,测定小鼠经口LD50,观察不同保护药物〔N-乙酰半胱氨酸(NAC)、谷胱甘肽(GSH)、二巯丙磺钠(Na-DMPS)、二巯丁二酸(DMSA)、东莨菪碱(SCO)〕对小鼠生存时间及存活率的影响。结果DMF染毒剂量越大,中毒潜伏期越短,生存时间越短,小鼠经口LD50为6.019gkg。中毒主要表现有行动迟缓、行走不稳、发绀、易兴奋、呼吸急促、四肢抽搐等;血AST、ALT及LDH升高。病理学检查见:胃肠散在小充血灶;腹腔内少许淡黄色或淡血性腹水;肝细胞局灶坏死、炎症细胞浸润,肝血窦扩张、淤血,部分肝细胞索断裂,线粒体水肿、嵴减少,肝细胞内胆汁淤积;肾小管上皮细胞水肿,局部肾小管细胞核固缩、碎裂,胞质内板层小体形成,近曲小管微绒毛细丝样改变,线粒体可见电子致密物。GSH、SCO、Na-DMPS可延长小鼠急性DMF中毒的生存时间。NAC、GSH、Na-DMPS、DMSA、SCO对致死亡剂量的DMF中毒小鼠生存时间及存活率无显著影响。结论DMF是一种低毒毒物,急性经口中毒表现多样,主要损害脏器为肝、肾,GSH、SCO、Na-DMPS对DMF中毒可能有保护作用。

MTH1基因的低表达对HeLa细胞内RNA氧化程度的影响

目的建立敲减MTH1基因的HeLa细胞稳定细胞株,研究MTH1基因的低表达对HeLa细胞内RNA氧化程度的影响。方法设计并合成针对MTH1基因的3条siRNA,分别转染HeLa细胞,选择干扰效果最为理想的靶序列连接入反转录病毒载体Retro-Q,在293T细胞内包装病毒颗粒,将病毒转染HeLa细胞后使用嘌呤霉素筛选抗性克隆株,用western b lot技术检测克隆株的MTH1的表达量以确定干扰效果最理想的稳定细胞株,用API5000型质谱仪检测稳定细胞株RNA中的8-oxoG与G的含量以评价RNA的氧化程度。结果本研究设计的3条siRNA中有2条干扰效率可达90%以上,所建立的敲减MTH1基因HeLa细胞稳定细胞株的干扰效果达80%以上,质谱检测结果表明MTH1基因低表达的稳定细胞株每106个G中含有14.9个8-oxoG,而对照细胞中则仅含9.7个8-oxoG。结论 MTH1基因的低表达可引起HeLa细胞中RNA氧化程度明显升高。

冰片对卡马西平在小鼠体内分布的影响

目的:观察冰片对卡马西平(CBZ)及10,11-环氧化卡马西平(ECBZ)在小鼠体内分布的影响。方法:CBZ和冰片灌胃给药,高效液相色谱法检测小鼠血浆和脑、心、肾、肝、脾、肺、脂肪、骨骼肌等组织中CBZ及ECBZ的浓度,并计算有关的药动学参数。结果:合用冰片使CBZ在脑、肺、肝、脾等组织前60min内的含量明显增高,在血浆、脑、骨骼肌、脾、脂肪组织的相对摄取率(Re)和峰浓度比(Ce)均大于1。ECBZ在血浆、心、脑、肝、肾、脾、肌肉、脂肪组织前60min内的含量也明显增高,在脑、骨骼肌、脾、脂肪组织的Re和Ce均大于1。结论:冰片可提高CBZ和ECBZ在小鼠各组织中分布的靶向性。

HPLC法检测人血浆中喷昔洛韦浓度

目的建立人血浆中喷昔洛韦浓度检测的HPLC法。方法血浆经70％高氯酸沉淀蛋白，以ZORBAX-SB-C18（150mm×5mm，5μm）为色谱柱，以水-乙腈-3％冰醋酸水溶液=87．5：2．5：10（V／V／V）流动相，流速1mL·min^-1，柱温35℃，检测波长254nm。结果喷昔洛韦血药浓度为0．05-8．00mg·L^-1时与峰面积之间线性关系良好（r=0．9999），最低检测浓度为0．05mg·L^-1；低、中、高3个浓度的相对回收率分别为92．0％、97．6％、100．1％，绝对回收率分别为92．79％、85．15％、89．54％；日内、日间RSD均低于10％。结论此方法简便、快速、准确可靠，适用于人血浆喷昔洛韦浓度测定及药动学研究。

氯胺酮对小鼠短暂性局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 :观察不同非麻醉剂量氯胺酮对小鼠短暂性局灶性脑缺血性再灌注损伤的影响。方法 :通过栓塞大脑中动脉制备小鼠短暂性局灶性脑缺血再灌注模型 ,缺血 2h再灌注 ,以神经行为评分达Bederson’s 3级视为模型成功标准 ,再灌注 2 4h处死取全脑进行TTC染色 ,测量梗死面积 ,HE染色观察海马病理变化。结果 :2 5mg/kg氯胺酮能显著减少脑缺血再灌注损伤引起的梗死面积 (P <0 .0 5 )和改善海马神经细胞坏死 ,而 10mg/kg和 15mg/kg氯胺酮无统计学意义 ,但呈明显剂量依赖性关系。结论 :非麻醉剂量氯胺酮能改善小鼠短暂性局灶性脑缺血再灌注损伤并呈明显剂量依赖性关系。

CYP2C9*58型新突变体的体外酶学活性研究

目的对CYP2C9基因新突变体(CYP2C9*58型)开展体外酶学功能研究,明确其代谢活性与野生型的相关性。方法以CYP2C9基因cDNA为模板,通过定点诱变方法获得CYP2C9各变异体的cDNA全长,用以构建昆虫表达载体。利用杆状病毒包装试剂盒包装昆虫病毒,侵染sf21昆虫细胞后获得高效表达CYP2C9各型蛋白的微粒体。以甲苯磺丁脲为探针底物药,利用获得的微粒体体外测定各变异体的最大反应速率V max和米氏常数K m,评价其主要酶促动力学特性。结果成功构建了CYP2C9*1、CYP2C9*2、CYP2C9*3和CYP2C9*58型4种CYP2C9昆虫表达载体,Western blot证实该载体可用于稳定表达相应的CYP2C9突变体。CYP2C9*2、CYP2C9*3和CYP2C9*58型变异体的体外酶学活性分别为野生型CYP2C9*1的91.6%,13.5%和23.1%。结论 CYP2C9*58型的酶学活性较野生型明显降低,接近于典型缺陷型突变体CYP2C9*3型,提示携带此突变型的患者在服用经由CYP2C9代谢的相关药物时,药物代谢速度较野生型携带者会有一定程度的降低。