基质金属蛋白酶在心衰中作用的研究进展

充血性心力衰竭 (CHF)发生发展的基本机制是左室心肌重构 ,基质金属蛋白酶 (MMPs)是一族对细胞外基质成分 (ECM)有特异降解作用的锌依赖性蛋白水解酶 ,MMPs通过影响ECM的降解在心肌重构中起重要作用。MMPs的释放和功能受到严格的调控 ,包括酶原合成调控、酶原活性调控和基质金属蛋白酶抑制物 (TIMPs)的内源性抑制作用。充血性心力衰竭中存在心肌MMPs表达及活性变化、MMP/TIMP平衡失调等MMPs调控异常现象 ,阐明心肌内基质金属蛋白酶系统的表达及活性调控对探讨充血性心衰新的治疗策略具有重要意义。

心肌梗死患者基质金属蛋白酶9基因C1562T多态性

目的研究基质金属蛋白酶9基因C1562T多态性与中国汉族人群心肌梗死易感性的关系。方法以78例经冠状动脉造影确诊的心肌梗死患者为研究对象,以同期冠状动脉造影阴性、排除冠心病诊断的81例患者为对照组,取外周血标本提取DNA,用聚合酶链反应方法扩增目的基因,用限制性内切酶酶切聚合酶链反应产物用于基因分型。比较两组间基质金属蛋白酶9基因多态性频率分布的差异。结果本研究中未发现基质金属蛋白酶9的TT基因型突变。心肌梗死患者基质金属蛋白酶9基因CT基因型频率(26.9%)高于对照组(9.9%),两组差别有统计学意义(χ2=7.743,P=0.005),心肌梗死组1562T等位基因频率(13.5%)高于对照组(4.9%),两组差别也有统计学意义(χ2=6.966,P=0.008)。结论基质金属蛋白酶9基因C1562T多态性与中国汉族人群心肌梗死有关,1562T等位基因可能是心肌梗死遗传易感性的基因标记之一。

血清肿瘤抗原CA125水平与慢性心力衰竭关系的初步探讨

目的:探讨慢性心力衰竭(CHF)患者肿瘤抗原CA125(简称CA125)水平与患者心功能之间的关系。方法:108例CHF患者通过B型超声心动图测定左心室内径及射血分数并探察是否有胸腔积液,以酶联免疫吸附法测定其血清CA125水平,所有病例根据纽约心功能分级标准分为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组,根据有无胸腔积液而分为胸腔积液患者和非胸腔积液患者。另随机抽取40例有心血管疾病但无CHF的患者作为对照组。结果:CHF患者血清CA125水平高于对照组,Ⅳ级组血清CA125水平明显高于Ⅲ级组且Ⅲ级组明显高于Ⅱ级组,血清CA125水平与左心室射血分数值呈负相关,而与导致CHF的原发病种类不相关。胸腔积液患者血清CA125水平明显高于非胸腔积液患者,非胸腔积液患者明显高于对照组。结论:①CHF患者血清CA125水平升高,其水平与左心室射血分数呈负相关,而与导致CHF的原发病种类不相关;②胸腔积液患者其血清CA125水平高于非胸腔积液患者,这可能是由于胸膜间皮细胞分泌增加或胸腔积液刺激血清CA125的释放及阻碍其清除有关;③血清CA125水平的测定可能可以用来评价CHF治疗的疗效并可能用来评价预后。

老年男性冠心病患者体内性激素水平的研究

目的探讨老年男性冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者其体内性激素水平的变化与血脂之间的关系。方法所有研究对象均检测雌二醇(E2)、睾酮(T)、血脂、射血分数(EF)水平,比较各组间上述指标的水平差异并进行相关分析。结果CHD心力衰竭组和非心力衰竭组间E2、T、E2/T水平差异无显著性(P>0.05),CHD组E2及T水平明显低于非CHD组(P<0.05),而E2/T在CHD组明显高于非CHD组(P<0.05);E2、T、E2/T水平与冠脉狭窄程度、冠脉病变支数、冠脉病变评分之间无相关性,而EF值及血脂水平则与之相关;CHD患者E2水平与HDL-C水平呈显著负相关,与TC、LDC-C、TG、LP(a)水平呈显著正相关,T与血脂间无显著相关性。结论老年男性CHD患者体内性激素水平明显下降,且以雄性激素下降为主;体内性激素水平与CHD的严重程度无关;体内雌激素水平与血脂代谢有明显相关,而雄激素变化与血脂代谢无明显相关。

急性心肌梗死患者血清Ⅳ-C、PC-Ⅲ、LN、HA水平测定的临床意义

采用放免法测定 2 0例急性心肌梗死 (AMI)患者发病后 5d、15d血清Ⅳ型胶原 -C(Ⅳ -C)、Ⅲ型前胶原(PC -Ⅲ )、层粘连蛋白 (LN )、透明质酸 (HA)的含量。结果 :AMI发病后 15d血清Ⅳ -C、PC -Ⅲ、LN、HA含量较健康对照组明显升高 ;并与心肌梗死后血浆肌钙蛋白Ⅰ (Tn -I)峰值水平呈明显正相关。认为血清Ⅳ -C、PC -Ⅱ、LN、HA可反映心肌梗死后心肌间质重构 。

rAAV1-SERCA2a转导对慢性心力衰竭beagle犬的治疗作用

目的研究重组1型腺相关病毒(rAAV1)介导的肌质网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭(HF)beagle犬的治疗作用及可能的机制。方法经快速右心室起搏建立beagle犬的慢性HF模型。16只beagle犬分为4组:对照组(n=4),HF组(n=4),HF+EGFP组(n=4)和HF+SERCA2a组(n=4)。应用开胸心肌内注射术,分别将携带EGFP基因rAAV1和携带SERCA2a基因rAAV1导入HF+EGFP组和HF+SERCA2a组的beagle犬心肌,剂量为1×1012/ml,而对照组和HF组未进行任何处理。基因转导后30d,应用超声心动图、血流动力学检测各组beagle犬的心脏收缩和舒张功能、Western blotting检测SERCA2a蛋白表达水平,TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数,免疫组织化学染色检测Bax的表达。结果在基因转导后30d,HF+SERCA2a组SERCA2a蛋白表达水平较HF组明显增加,随着SERCA2a表达增加心功能也得到改善,左室收缩压峰值(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(LV+dp/dtmax)和左室内压最大下降速率(LV-dp/dtmax)均接近对照组水平,较HF组明显改善(P<0.05)。SERCA2a基因治疗后心肌细胞凋亡指数、Bax表达比HF组显著降低(P<0.05)。结论SERCA2a基因转导能够治疗慢性心力衰竭,改善心功能,抑制心肌细胞凋亡。

干细胞移植与心血管疾病

干细胞是一类具有自我复制和分化潜能的早期未分化细胞。本综述着重介绍干细胞移植技术在基础及临床心血管领域的研究现况 。

定量药物负荷超声心动图试验在心肌缺血诊断中的应用

药物负荷超声心动图是诊断冠心病的无创检查之一,主要药物包括潘生丁、腺苷、多巴酚丁胺,既往判断室壁运动异常为半定量,不同分析者间差异较大。随着超声技术的不断发展,定量药物负荷超声应运而生,以多普勒和二维斑点追踪为基础的速度、应变、应变率成像技术与药物负荷超声试验相结合后,有助于进一步提高心肌缺血的诊断准确性并减少分析者之间的偏差。

高敏C反应蛋白与冠心病病变及胰岛素抵抗指数的关系

目的探讨冠心病病人胰岛素抵抗与高敏C反应蛋白(high sensitivity-C reactive protein,hs-CRP)及冠状动脉病变严重程度之间的关系。方法经冠状动脉造影确诊冠心病308例,稳定性心绞痛212例,年龄(62±11)岁;急性冠状动脉综合征96例,年龄(62±11)岁。分为3组:Ⅰ组123例,为非糖尿病无糖耐量异常病人;Ⅱ组87例,为糖耐量异常病人;Ⅲ组98例,为糖尿病病人。对照组92例经冠状动脉造影排除冠心病。测定空腹血糖、早餐后2h血糖、血脂、空腹胰岛素、hs-CRP、糖化血红蛋白水平。结果hs-CRP:Ⅰ组:(50±15)mg/L,Ⅱ组(55±14)mg/L;Ⅲ组(62±20)mg/L,差异无统计学意义,但均明显高于对照组(6.5±5.7)mg/L;hs-CRP在急性冠状动脉综合征病人为(8.4±2.6)mg/L,明显高于稳定性心绞痛病人(52±18)mg/L和非冠心病病人(6.5±5.7)mg/L;在糖尿病病人,无论是否患冠心病,血浆hs-CRP与糖化血红蛋白、空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数之间存在正相关,而与空腹血糖、2h血糖及血脂水平无相关;糖化血红蛋白、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数及血脂与冠状动脉病变支数及冠状动脉狭窄程度相关,而hs-CRP与此无相关。结论冠心病合并糖尿病患与否对hs-CRP水平不产生明显影响。hs-CRP水平是冠心病急性心脏事件发生的高危预测指标。

金荞麦Fr4诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的 研究金荞麦有效部位Fr4能否诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响。方法 用MTT法检测Fr4对细胞增殖的影响；光学显微镜和透射电镜观察细胞形态改变；Annexin—V／PI双染法检测细胞膜介导的凋亡；琼脂糖凝胶电泳观察DNA碎片；TRAP—PCR-ELISA检测端粒酶活性。结果 金荞麦Fr460～240mg·L^-1能诱导HL-60细胞凋亡，电镜观察到典型的凋亡细胞，电泳呈现出阶梯状条带，流式细胞仪检测到早期凋亡细胞数随剂量的增加而升高。MTT法示金荞麦Fr4抑制HL-60细胞增殖，并且呈剂量依赖性趋势，药物作用24h的IC50为115mg·L^-1，Fr4诱导HL-60细胞凋亡过程中，端粒酶活性下降。结论 金荞麦Fr4可诱导HL-60细胞凋亡，其机制可能与端粒酶活力下降有关。

急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶2的变化

目的探讨急性冠状动脉综合征与血清基质金属蛋白酶2的关系。方法经皮腔内冠状动脉造影确诊的冠心病患者61例,其中急性冠状动脉综合征患者46例,包括急性心肌梗死16例,不稳定型心绞痛30例,稳定型心绞痛15例;另设冠状动脉造影排除冠心病但有临床胸闷、胸痛症状的24例患者作为对照组。运用酶联免疫吸附法测定造影前后血清基质金属蛋白酶2浓度。结果造影前,急性冠状动脉综合征组、稳定型心绞痛组及对照组血清基质金属蛋白酶2水平分别为56.9±11.9μg/L、48.2±10.8μg/L和46.6±10.5μg/L,急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组基质金属蛋白酶2水平分别为58.6±14.8μg/L和53.4±9.3μg/L。急性心肌梗死组及不稳定型心绞痛组与稳定型心绞痛组之间基质金属蛋白酶2水平有显著性差异,稳定型心绞痛组与对照组之间没有统计学差异。血清基质金属蛋白酶2水平与C反应蛋白、白细胞计数、冠状动脉病变评分和冠状动脉狭窄程度之间呈正相关,与冠状动脉病变支数、肌钙蛋白、肌酸激酶同工酶、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和血小板计数之间无明显相关性。经皮腔内冠状动脉成形术及支架术患者基质金属蛋白酶2水平在术后1天均较术前明显升高。结论急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶2浓度明显升高,其水平与冠状动脉内粥样硬化斑块的稳定性可能相关,有助于冠心病的危险分层,对评价冠状动脉病变严重程度及预后可能有重要意义。

脉压及脉压指数与冠状动脉病变严重程度的相关性研究

目的:探讨脉压、脉压指数与冠心病严重程度的相关性,并比较脉压与脉压指数用以评价冠脉病变严重程度的相对优越性。方法:经冠脉造影(CAG)确诊的冠心病患者154例,其中ACS患者104例,包括急性心肌梗死(AMI)44例,不稳定型心绞痛(UAP)60例;稳定型心绞痛(SAP)50例;另设冠脉造影排除冠心病患者43例作为正常对照组。冠心病病变的严重程度分别用冠状动脉病变的血管支数、冠状动脉病变评分和冠状动脉狭窄程度表示。结果:脉压及脉压指数与冠心病患者冠脉病变的严重程度密切相关,而与血脂、血糖、体重指数等无明显关系。结论:脉压及脉压指数是较为方便的反映大动脉弹性的参数,与冠状动脉病变的严重程度密切相关,可作为全身心血管病的一个危险信号,指导早期干预,且脉压指数在一定程度上较之脉压有更大的优势。

高血压患者血压水平和脉压及脉压指数与蛋白尿的关系

目的 高血压患者收缩压 (SBP)、舒张压 (DBP)、脉压 (PP)及脉压指数 (PPI)与蛋白尿的关系 ,并进一步评价各自在反映蛋白尿严重程度上的优劣和 (或 )一致性。方法 将所有研究对象按SBP≥ 180mmHg(6 8例 )、16 0～ 179mmHg(81例 )、14 0～ 15 9mmHg(5 7例 )分为 3组 ;按DBP≥110mmHg(5 9例 )、10 0～ 10 9mmHg(79例 )、90～ 99mmHg(6 7例 )分为 3组 ;按PP≤ 4 0mmHg(39例 )、4 1～ 6 0mmHg(6 1例 )、6 1～ 80mmHg(5 6例 )和大于 80mmHg(4 3例 )分为 4组 ;按PPI≤ 0 4 0 0(5 0例 )、0 4 0 1～ 0 5 0 0 (70例 )、0 5 0 1～ 0 6 0 0 (6 2例 )和大于 0 6 0 0 (17例 )分为 4组。采用全自动散射比浊仪及全自动生化分析仪测定所有研究对象的尿蛋白和血脂水平 ,比较各组蛋白尿的发生率。结果 各组间性别、年龄、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平均无显著性差异。随收缩压、舒张压、脉压及脉压指数的增加 ,蛋白尿的发生率明显增高 (P <0 0 5 )。结论 收缩压、舒张压、脉压水平和脉压指数与蛋白尿的发生密切相关 ,且 4者在反映蛋白尿的发生上具有较好的一致性。

慢性冠状动脉闭塞病变侧支循环形成的影响因素分析

目的分析慢性冠状动脉闭塞病变患者冠状动脉侧支循环形成的影响因素。方法采用双中心回顾性的方法分析温州医学院附属台州医院及中山大学孙逸仙纪念医院住院的慢性冠状动脉闭塞患者143例的临床资料,根据Rentrop and Cohen分级法对侧支循环形成情况进行分级,并根据分级水平将患者分为侧支循环不良组(0级与1级)与侧支循环良好组(2级和3级)。结果两组年龄、性别、高血压、饮酒、心肌梗死、缺血性脑卒中及总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、肌钙蛋白T浓度等比较,差异无统计学意义(P>0.05);而两组吸烟、糖尿病及血肌酐、空腹血糖、血红蛋白、高敏C反应蛋白浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组血管闭塞支数比例及靶血管闭塞比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。以Rentrop and Cohen分级为因变量,以年龄、性别、原发性高血压、糖尿病、血脂浓度、超敏C-反应蛋白、估算的肾小球率过滤(estimated glomerular filtrationrate,eGFR)为自变量进行Logistic回归分析,结果显示糖尿病(OR=1.24,95%CI:1.12～1.41)及eGFR(OR=1.12,95%CI:1.23～1.52)入选回归方程。结论合并糖尿病或肾功能不全的慢性冠状动脉闭塞患者侧支循环差,而糖尿病及肾功能不全可能是影响侧支循环形成的重要因素。

白三烯B4对巨噬细胞小凹蛋白-1表达的影响及其与冠状动脉斑块不稳定的关系

目的研究小凹蛋白-1(Cav-1)及白三烯B4(LTB4)与冠状动脉斑块不稳定的关系,观察LTB4及其抑制剂对巨噬细胞Cav-1表达的影响并探讨其意义。方法免疫组化检测41例人尸检冠状动脉粥样斑块中巨噬细胞Cav-1蛋白的表达;以流式细胞技术检测167例入选患者外周血单核细胞Cav-1的表达水平,用ELISA检测血清中LB4的表达水平;分别用浓度为10-8mol/L、10-7mol/L的LTB4及10-7mol/LU75302处理THP-1源性的巨噬细胞,RT-PCR检测细胞内的TNF-αmRNA,Cav-1mRNA水平及Western Blot检测Cav-1蛋白表达的变化。结果与稳定斑块相比,不稳定斑块中巨噬细胞聚集处Cav-1表达下调或表达阴性。急性冠脉综合征(ACS)组中急性心梗(AMI)组及不稳定性心绞痛(UAP)组外周血单核细胞Cav-1表达水平皆显著低于稳定心绞痛(SAP)组、非冠心病组(99.2±40.8MnX比(176.1±90.3)MnX、(246.0±122.8)MnX(t=-4.786、5.112),(104.8±37.4)MnX比(176.1±90.3)MnX、(246.0±122.8)MnX(t=-4.508、-4.942,P<0.01);AMI组血清LTB4表达显著高于UAP组、SAP组及非冠心病组(209.8ng/L比40.7ng/L、59.5ng/L、63.8ng/L,Z=-3.771、-3.426、-2.849,P<0.01)。LTB4可下调Cav-1mRNA及蛋白表达水平(0.963、0.959比1.186,t=-5.079、-5.148),0.712比0.840(t=-4.050,P<0.01),上调肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达(0.637比0.555)(t=5.148,P<0.01);U75302预处理组Cav-1mRNA及蛋白水平上调(1.089比0.959、0.963(t=3.018、3.087,0.799比0.712,t=2.849,P<0.05),TNF-αmRNA水平下降(0.529比0.637,t=-3.087,P<0.01)。结论冠状动脉不稳定斑块中巨噬细胞及ACS患者外周血单核细胞Cav-1表达降低,AMI患者血清中LTB4表达上调,提示高水平LTB4及低表达Cav-1与斑块不稳定有关。LTB4下调THP-1来源的巨噬细胞Cav-1mRNA及蛋白的表达,上调TNF-αmRNA水平,U75302预处理可拮抗上述LTB4的作用,提示使用拮抗LTB4的药物可能有稳定粥样斑块的作用。

急性冠脉综合征患者血浆脂蛋白(a)测定的临床意义

目的探讨急性冠脉综合征患者血浆脂蛋白(a)测定的临床意义。方法因胸痛或胸部不适行选择性冠状动脉造影的患者494例,结合冠状动脉造影结果及临床诊断分成非冠心病组(NCHD,221例)；冠心病稳定型心绞痛组(SAP,58例)；冠心病急性冠脉综合征组(ACS,215例),其中不稳定型心绞痛(UAP,114例),ST段抬高型急性心肌梗死(STEMI,66例),非ST段抬高型急性心肌梗死(NSTEMI,35例),测定各组血浆Lp(a)浓度并进行分析比较。结果NCHD组、SAP组和ACS组Lp(a)测定值分别为(166．33±41．92)mg/L、(222．34±44．83)mg/L、(280．32±56．64)mg/L。ACS组Lp(a)测定值明显高于SAP组(F=9．26 P＜0．01)和NCHD组(F=8．13,P＜0．01)。结论急性冠脉综合征血浆Lp(a)浓度较之稳定型心绞痛和非冠心病明显增高,提示血浆Lp(a)增高不仅是冠心病的独立危险因素,也可能是急性冠脉事件的促发因素。

国产雷帕霉素洗脱支架远期预后的临床研究

目的观察冠心病患者应用国产雷帕霉素洗脱支架后临床不良心血管事件(major adverse cardia cevent,MACE)包括心源性死亡、再发非致死性心肌梗死、再次血运重建的发生率。方法2003年11月至2006年12月,共入选267例患者,国产雷帕霉素(Firebird,上海微创公司)支架组145例,进口雷帕霉素(Cypher,美国强生公司)支架组122例。术后严格要求患者服用阿司匹林和噻氯匹定或氯吡格雷至少12个月。通过门诊或电话随访术后患者MACE的发生率,部分患者进行了冠状动脉造影复查。结果随访(31±11)个月,失访患者9例(Firebird组6例、Cypher组3例),失访率3.37%。随访期间总的MACE的发生率在Firebird组10.79%、Cypher组11.76%,两组无显著性差异(P=0.95),两组冠状动脉介入治疗(PCI)术后<1年及>1年MACE分别为5.04%、7.02%和5.04%、8.08%,P<0.05;Firebird支架和Cypher支架的血栓发生率分别为1.44%、1.68%,P>0.05。两组冠状动脉造影再狭窄率分别为17.6%(6/34)、19%(8/42),无显著性差异。结论远期临床随访结果表明,国产Firebird支架与Cypher支架临床心血管事件、支架内血栓的发生率均较低,两组无显著性差异,两者的安全性与有效性相似。延长联合抗血小板治疗时间很有必要。

LTB4在THP-1源性巨噬细胞中通过MAPK途径上调EMMPRIN的表达

目的探讨白三烯B4在MAPK信号通路中对细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达的影响。方法将人类单核细胞系THP-1分为6组,用PMA诱导2～6组的THP-1成巨噬细胞,3～6组加入白三烯B4,第4组加入PD98059(ERK1/2抑制剂),第5组加入SB203580(P38抑制剂),第6组加入SP600125(JNK抑制剂),观察EMMPRIN和MMP-9的mR-NA以及EMMPRIN的蛋白变化。结果 LTB4使单核细胞EMMPRIN的mRNA表达增加(P<0.05)、MMP-9的mRNA表达增加(P<0.01),及EMMPRIN的蛋白表达明显增加(P<0.01),加入PD98059后,EMMPRIN的mRNA表达明显下降(P<0.01),MMP-9的mRNA表达明显下降(P<0.01),EMMPRIN蛋白表达明显下降(P<0.01),加入SB203580后,EMMPRIN的mRNA明显下降(P<0.01),MMP-9的mRNA明显下降(P<0.01),EMMPRIN蛋白表达明显下降(P<0.01),加入SP600125后,EMM-PRIN的mRNA明显下降(P<0.05),MMP-9的mRNA明显下降(P<0.01),EMMPRIN蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论白三烯B4通过激活MAPK信号通路增加THP-1源性巨噬细胞EMMPRIN的表达,可能是其增加巨噬细胞MMPs产生的机制。