检验医学本科生毕业论文规范化带教

毕业论文的带教是开发学生智力、培养创新精神和创新能力的一种有效方法,但在具体实施时,如何在有限的时间内,既要完成实习任务,又要完成高质量的医学研究论文,对各大实习单位来说难度较大。目前温州医学院附属第一医院已实行一套规范化的检验医学本科生的带教模式,并已取得一定的成绩。

医学检验本科生实习带教探讨

临床实习是检验本科教学的重要阶段,因此我们对如何搞好本科生的实习带教工作进行了积极的思考和探索。现将我们认为较有成效的做法向大家做个汇报,以求领导和同行们的指正,更好地搞好实习教学工作。一、建立严格的考勤制度,加强对学生劳动纪律管理:实验室科学是一门严谨的科学。

切实做好检验专业本科生的论文带教工作

检验医学系本科学生完成了四年的理论学习后,系统掌握了医学基础和专业知识,进入实习阶段。这一年,是学生从学校走向社会的过渡时期,是锻炼学生操作技能,训练动手能力和科研思维的重要阶段。按照我校全日制检验医学系本科教学大纲规定,学生在毕业实习期间,在带教老师的指导下,要完成一篇毕业论文,借此来实践科研与写作的全过程,适时地培养学生初步科研思维,诱发、培养科研写作兴趣。

温州地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的基因型研究

目的研究温州地区分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的基因型。方法随机挑取经全自动微生物分析仪鉴定的产ESBLs肺炎克雷伯菌35株,非产ESBLs肺炎克雷伯菌29株;用头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸和头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸双纸片扩散法对肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测,采用聚合酶链反应(PCR)法对ESBLs阳性株进行TEM型、SHV型、CTX-M型、VEB型和PER型ESBLs基因检测,对PCR阳性产物进行测序确定基因型别,同时采用PCR法检测整合酶基因,对PCR产物进行测序确定整合酶类别。结果47株经双纸片扩散法确定为ESBLs阳性株中,经仪器法确定为阳性的为35株,仪器法的敏感性为73.4%;在17株经双纸片法确定为ESBLs阴性的菌株中,经仪器法确定为ESBLs阴性的有12株,仪器法的特异性为70.1%;TEM型、SHV型和CTX-M型阳性率分别为90.0%、86.7%和90.0%;整合酶基因阳性率为93.3%,经测序,所有TEM型为TEM-1 ESBLs;26株SHV型阳性的PCR产物经测序证实,SHV-12的有16株、SHV-11的有6株、SHV-2的有2株及SHV-1型2株,在27株CTX-M型中,CTX-M-14型有18株、CTX-M-15型9株。结论温州地区肺炎克雷伯菌临床分离株的ESBLs基因主要为CTX-M型和SHV型,CTX-M-14和SHV-12是主要的基因型。

温州地区产妇HBV、梅毒、HCV及HIV感染情况调查分析

目的：了解HBV、梅毒螺旋体、HCV及HIV在产妇中的感染趋势及其在不同年龄段的感染情况。方法：对温州地区三大医院2002～2004年22447例产妇进行调查并按年龄组分析。结果：各年份产妇HBV的阳性率分别为12．53％、11．42％、11．27％，差异无统计学意义（P〉0．05）；梅毒螺旋体的阳性率分别为0．30％、0．52％、0．86％，感染率逐年升高（P〈0．05）；HCV的感染率分别为0．06％、0．08％、0．24％，2004年高于2003年（P〈0．01）；2002、2003年分别有1例产妇HIV抗体检测阳性。产妇按年龄分≤24岁，25～29岁，≥30岁组比较，梅毒螺旋体的感染率分别为0．87％、0．49％及0．39％，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：3年HBV感染率均较高，无统计学意义，但有略为下降的趋势；梅毒螺旋体、HCV的感染率有明显增加；≤24岁年轻产妇梅毒螺旋体感染率较≥25岁产妇高，HIV在产妇中已有检出。

温州市5285例老年人血糖、肝、肾功能调查分析

目的调查温州市老年人(≥60岁)的血糖、肾功能、肝功能异常情况。方法2007年10月～2008年2月温州市社保局对全市老年人进行大规模的体检,我们收集5285例随机在我院体检的老年人血清葡萄糖(GLU)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测值,根据我院参考范围对其进行异常率分析。结果各年龄组老年人生化指标异常率以高血糖为首位(总计为37.3%),在年龄60～69岁组,男性高血糖明显高于女性(P<0.05),并且异常率男性随着年龄增加明显下降(P<0.05),女性有下降的趋势但无显著性意义(P>0.05);高尿酸血症次之(总计为12.5%),各年龄组男性明显高于女性(P<0.05),70岁以上的老年人明显高于60～69岁组(P<0.05);高BUN和高Cr异常率除70～79岁组外男性均明显高于女性(P<0.05),并且随着年龄增加异常率明显升高(P<0.05);高ALT和高AST异常率较低,且年龄和性别均无显著性差异(P>0.05)。结论高血糖和高尿酸血症是老年人常见疾病,老年人应定期体检、注意饮食和加强运动。

温州地区嗜血杆菌的检出及耐药性分析

目的 了解本地区成人呼吸道嗜血杆菌的感染情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗提供参考.方法 用嗜血杆菌专用巧克力培养基(HAE)进行分离培养,用NHI鉴定卡和ATB－NH药敏检测条鉴定其生物种型及其对多种抗生素的耐药性,用Nitrocefin纸片法测定被试菌的β－内酰胺酶.结果 1190例呼吸道感染病人痰液和咽拭标本中检出147株嗜血杆菌,总检出率12．35%,其中流感嗜血杆菌32株(21．77%),副流感嗜血杆菌113株(76．87%),杜克雷嗜血杆菌2株(1．36%).检测株对头孢噻肟、阿莫西林／克拉维酸、利福平的耐药率较低,分别为6．12%、10．88%、19．05%.产β－内酰胺酶的共64株,产酶率为43．54%.结论 本地区成人呼吸道嗜血杆菌感染中以副流感嗜血杆菌为主,产酶率较高,对嗜血杆菌引起的呼吸道感染可选用头孢噻肟、阿莫西林／克拉维酸、利福平等药物进行治疗.

血糖即时检验室间质控品的制备和评价

目的配制血糖即时检验室间质控品并做评价。方法准备肝素抗凝全血标本,取部分全血即刻分离血浆在日立7600-110全自动生化仪上测定作为对照组,剩余的全血联合加入多种抗糖酵解剂,并在室温(22OC)保存2、8、24、48小时后测定血中葡萄糖的浓度,在日立7600-110全自动生化仪、雅培MediSense○ROptiumTM快速血糖仪、强生SureStepTMPlus稳步型血糖仪、罗氏GLUCOTREND○R2乐康全血糖仪上测定,并将各仪器各时间段的结果作组间比较。结果含有复合抗酵解剂的全血标本,可使血中葡萄糖浓度在24小时内保持稳定,24小时内各时间段之间的结果差异无显著性意义(F=1.52,P>0.05),48小时的血糖结果有所下降,与对照组结果比较,有显著性差异(P<0.01)。结论自制的全血血糖室间质控品配制简单,血糖浓度24小时内保持稳定,且不会干扰快速血糖仪的测定,符合血糖即时检验室间质控要求。

妇科炎症患者宫颈分泌物发酵支原体和穿透支原体的检测

目的探讨3种难培养支原体(发酵支原体,Mf;穿透支原体,Mpe;梨支原体,Mpi)的临床检测方法,同时了解其在温州地区妇科炎症患者中的感染情况。方法采集妇科炎症患者和正常女性(各280例)的宫颈管分泌物,接种于SP-4培养液培养。阳性培养物应用套式聚合酶链反应(nPCR)和DNA测序等方法加以鉴定。结果280例患者的宫颈分泌物中分离到8株Mf(2.86%)、7株Mpe(2.50%),而280例正常女性未分离到相应菌株。nPCR检测结果与之相符,阳性菌株经测序确认。结论培养液分离培养法结合nPCR技术,准确、较快速,是进行艾滋病(AIDS)相关支原体分离鉴定较可靠实用的方法。温州地区妇科炎症患者存在Mf、Mpe感染,在临床诊治中应予关注。

微生物学检验临床实习带教体会

在临床微生物检验教学中,除要求学生系统地掌握微生物学基础理论知识外,同时要求学生具备熟练的操作技能及分析解决问题的能力。笔者在微生物检验临床实习带教中,经过多年探索,总结和实施了一套较为完善和系统的实习带教方法,并取得了较好的效果。

质粒介导喹诺酮类qnr基因在肠杆菌科细菌中的流行及耐药特性研究

目的 了解质粒介导喹诺酮耐药qnr基因在临床分离的三种常见肠杆菌科细菌中的分布,研究qnr阳性株的质粒特性和流行播散情况.方法 VITEK-60全自动微生物分析仪检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性,琼脂稀释法检测环丙沙星、诺氟沙星和左氧氟沙星的最低抑菌浓度（MIC）;PCR扩增质粒介导的喹诺酮类耐药基因 （qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS）,阳性产物进行DNA测序比对以确定基因型;.对qnr基因阳性菌株进行接合转移试验,探讨qnr基因的可转移性;脉冲场凝胶电泳技术（PFGE）分析同源性及流行播散情况.结果 301株大肠埃希菌中共检出qnr阳性菌株14株,其中2株同时携带两种基因,qnrA、qnrB、qnrS基因分别检出5、2、9株;145株肺炎克雷伯菌中共检出qnr阳性菌株17株,其中1株同时携带两种基因,qnrA、qnrB、qnrS基因分别检出1、11、6株;173株阴沟肠杆菌中共检出qnr阳性菌株57株,其中3株同时携带两种基因,qnrA、qnrB、qnrS基因分别检出14、36、10株;所有菌株中均未检出qnrC和qnrD基因;接合转移试验结果显示,14株qnr基因阳性的大肠埃希菌、17株qnr阳性肺炎克雷伯菌和57株qnr阳性阴沟肠杆菌中分别有4、3和26株体外接合成功,qnrB阳性阴沟肠杆菌中少数菌株存在同源性,大多呈散发流行趋势.结论 临床肠杆科细菌中存在qnr阳性菌株的流行,总体以qnrB为主;qnr基因在喹诺酮类耐药和敏感菌株中均存在,喹诺酮类药物敏感菌株中qnr基因的检出值得关注;qnr基因可通过其所在质粒进行水平转移;携带qnrB基因的阴沟肠杆菌大多无同源性,呈散发流行趋势.

导流杂交方法检测人乳头状瘤病毒分型的临床应用

目的探讨导流杂交方法在人乳头状瘤病毒(HPV)分型检测中的临床应用。方法采用导流杂交方法,对305例HPV感染的女性患者进行HPV分型检测,分析HPV亚型的检出情况,并评价HPV分型在宫颈病变中价值。结果21种HPV亚型均被检出,305例女性患者中单型感染有173例(56.7%),多重型感染有132例(43.3%),检出率较高的HPV高危型有HPV16型(17.6%)、HPV52型(9.8%)、HPV58型(9.0%)、HPV33型(6.3%)、HPV18型(5.4%)、HPV68型(5.2%),低危型有HPV11型(14.3%)、HPV6型(6.5%);随着宫颈病变级别升高,HPV高危型检出率增加趋势,HPV低危型检出率下降趋势。结论导流杂交方法可检测HPV多种亚型,对HPV感染亚型的鉴别及宫颈癌的预防和治疗具有较好的临床应用价值。

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶基因检测及耐药性分析

目的了解下呼吸道感染肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒AmpC酶的产生情况及耐药性,研究AmpC酶的基因型别。方法用纸片扩散确证法检测ESBLs;用酶提取三维试验检测AmpC酶,聚合酶链反应(PCR)扩增AmpC酶的基因,DNA序列测定检测AmpC酶的基因型;K-B法检测细菌耐药性。结果58株下呼吸道感染肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性21株,AmpC酶阳性5株,其中3株ESBLs和AmpC酶均阳性,5株AmpC酶阳性菌中,4株扩增出DHA基因,经测序均为DHA-1,1株扩增出MIR基因。产酶菌株的耐药性明显高于非产酶株。结论肺炎克雷伯菌中ESBLs和AmpC酶均有较高的检出率,AmpC酶以DHA基因型为主。产ESBLs和AmpC酶是肺炎克雷伯菌耐药的主要原因。

万古霉素对金黄色葡萄球菌体外抗菌活性研究

目的调查万古霉索对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性。方法收集温州医学院附属第一医院2005年2～7月从临床各种标本分离的金黄色葡萄球菌112株，PCR检测mecA基因确定MRSA，采用琼脂稀释法和全自动微生物分析仪检测金黄色葡萄球菌万古霉素MIC值，使用4mg／L万古霉索脑心浸液琼脂（BHIA）筛选异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌（hVRSA）。结果MRSA的检出率为64．3％，万古霉素的MIC大多数≤2mg／L，MIC。为2mg／L，有2株菌在4mg／L万古霉素BHIA平皿上生长，经菌群分析法证实非hVRSA。仪器法检测的万古霉素MIC值与琼脂稀释法的符合率只有35．7％，琼脂稀释法万古霉索MIC高于仪器法，仪器法检测的2株万古霉素中介耐药的菌株经琼脂稀释法和K-B法证实为敏感株。有6株对万古霉索的MIC为4mg／L，按美国NCCLS／CLSI2006年的标准被确定为万古霉素中介耐药株。结论万古霉素对金黄色葡萄球菌具有较强的体外抗菌活性，未发现耐药株，但MIC值较大。仪器法检测金黄色葡萄球菌对万古霉素的敏感性结果不可靠。按NCCLS／CLSI2006年的标准临床上能检测到对万古霉素中介耐药的金黄色葡萄球菌临床分离株。

乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用

目的 建立血浆 (血清 )HBVDNA荧光定量PCR检测方法 ,探讨其临床应用价值。方法 用PUCm T载体和PCR纯化产物连接 ,转染DH5α菌 ,筛选阳性菌落 ,提取质粒 ,制作外标准品 ;在HBV基因组S区设计一对引物和TaqMan探针 ,严格优化反应物的组成和扩增条件 ,并对该方法进行评价。结果 建立的HBVDNA荧光定量PCR最低可检出 80 0拷贝 /ml;批内误差为 1 8%～ 6 5% ,批间误差为 2 6 %～ 9 1 % ;在 1 0 4 ～ 1 0 11拷贝 /ml之间与Ct值具有很好的线性 (Ct =- 1 .391 1ln(X) +4 1 .6 5,r =- 0 .9958) ;外周血HBVDNA临床定量检测发现 ,HBeAg阳性的 1 30例中 ,HBVDNA阳性率为 1 0 0 % ,含量为1 0 6 89± 1.6 9拷贝 /ml,抗HBe阳性的 96例中HBVDNA阳性率为 55 2 % ( 53/ 96 ) ,含量为 1 0 4 .0 9± 1.19拷贝 /ml;6 2例献血员未检出HBVDNA。乙肝临床治疗监测发现 ,外周血中HBVDNA含量检测可有效反映治疗效果 ,指导临床用药。结论 荧光定量PCR检测方法是一种相对准确、灵敏度高、特异性较强和较简便的HBVDNA定量检测技术 ,对乙肝诊断。

mini VITAL全自动血培养仪假阳性/假阴性结果分析

目的 评价miniVITAL全自动血培养仪在临床应用中的假阳性 /假阴性情况。方法 采用回顾性分析 ,对miniVITAL全自动血培养仪在检测 3834份临床标本中出现的假阳性 /假阴性率及导致假阴性结果的细菌种类与分布进行评估分析。结果 miniVITAL系统假阳性率和假阴性率分别为 0 .6 8%和 0 .70 % ,所有致假阴性菌种中 ,以真菌的比率最高 ,占 6 2 .0 7% ,其次为非发酵菌、草绿色链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、革兰阳性杆菌和厌氧菌 ,分别为 10 .34%、10 .34%、6 .90 %、6 .90 %和 3.4 5 %。