温州地区儿童急性下呼吸道感染病原学及细菌耐药性检测

目的了解温州地区儿童急性下呼吸道感染（LRTI）的病原学特点及细菌耐药情况。方法454例急性LRTI患儿（年龄1个月～10岁，中位年龄6．0个月）入院24h内抽取下呼吸道分泌物送细菌培养，药敏试验采用K—B法，同时应用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒。结果297例（65．4％）病原检测阳性，其中病毒阳性229例（50．4％），以呼吸道合胞病毒（RSV）最多见（39．6％），其次为副流感病毒3型（PIV3）（6．6％）、腺病毒（2．2％）、流感病毒A型（0．9％）及流感病毒B型（0．7％）。共分离出19种135株（29．7％）致病菌，以肺炎克雷伯杆菌（K.pn）最多见（9．9％），其次为大肠杆菌（Ecoli）（4．4％），尼pn和E．coli产ESBLs株分别占42．2％和65．0％；肺炎链球菌（SP）占4．2％。混合感染率为14．8％。6个月以下患儿前5位病原为RSV，尼pn，PIV3，E．coli及SA；而RSV，PIV3，SP，尼pn及E．coli则是6个月至3岁患儿常见的病原。尼pn和Ecoli对氨苄西林的耐药率分别达97．8％和75．0％，产ESBLs株的足pn和E．coli对头孢菌素普遍耐药；SP对红霉素的耐药率高达100％，对青霉素的耐药率亦达68．4％，而SA对红霉素和青霉素的耐药率分别为94．7％和89．5％。结论RSV是温州地区儿童急性LRTI最常见的病原，其次为K.pn和PIV3。常见细菌的抗生素耐药性及革兰阴性杆菌产ESBLs的比率均相当高。

匹多莫德对儿童哮喘合并反复呼吸道感染的疗效观察

目的探讨哮喘合并反复呼吸道感染(RRI)经规律吸入糖皮质激素(ICS)症状控制不理想的儿童联用匹多莫德口服的临床疗效。方法将2007年5月至2007年7月收治的哮喘合并RRI经系统ICS治疗控制不佳的患儿65例采用随机数字表分为两组,实验组(33例)在ICS的基础上加用匹多莫德颗粒口服2个月,对照组(32例)仅给予ICS吸入治疗。两组均随访12个月,记录RRI和哮喘发作情况、血液淋巴细胞亚群检测结果及不良反应。结果与对照组比较,实验组的上呼吸道感染次数(t=5.205),下呼吸道感染次数(Z=2.056),哮喘发作次数(t=3.876),每次发作的发热天数(t=2.746)、咳嗽天数(Z=3.036)和抗生素使用天数(t=2.399)均少于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。与治疗前比较,实验组在治疗后2个月时CD3、CD4、CD8百分比和CD4/CD8比值均升高(t=3.783～13.490,P均<0.01);对照组治疗后CD3、CD4和CD4/CD8均低于实验组治疗后水平(t=4.107～7.209,P均<0.01)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(校正χ2=0.378,P>0.05)。结论哮喘合并RRI经ICS治疗控制不佳的儿童联用匹多莫德能有效预防RRI,减少哮喘的发作次数。匹多莫德颗粒疗效肯定,无明显不良反应,对RRI或哮喘合并RRI者可考虑使用。

温州地区2005～2006年急性呼吸道感染患儿病毒病原学检测的情况

目的了解2005～2006年温州地区急性呼吸道感染(ARI)患儿7种呼吸道病毒感染情况。方法选择3970例ARI患儿。其中急性上呼吸道感染308例,下呼吸道感染3662例。采集门诊患儿咽拭子及病房患儿的鼻咽分泌物,应用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV),流感病毒(IV)A、B型,副流感病毒(PIV)1、2、3型及腺病毒(ADV)7种常见呼吸道病毒。结果送检标本阳性1773例,阳性率44.7%,以RSV最高(36.2%)。病毒总检出率在性别间(χ2=9.2P<0.01)、年龄组间(χ2=120.5P<0.01)、疾病种类间(χ2=101.3P<0.01)及门诊、住院患儿间(χ2=180.4P<0.01)比较均有非常显著性差异。结论RSV仍是温州地区2005～2006年ARI患儿的主要病毒病原,男性患儿较女性患儿对呼吸道病毒易感,且婴幼儿(尤其<6个月)易感;住院患儿病毒检出率高,以毛细支气管炎阳性率最高。

儿童呼吸道合胞病毒感染的病原学及临床特点

目的：总结儿童呼吸道合胞病毒(RSV)感染的病原学及临床特点。方法：2003年1～6月因急性下呼吸道感染住院的患儿,入院后48h内应用直接免疫荧光法检测鼻咽分泌物中RSV抗原。结果：314例下呼吸道感染患儿中,RSV检测阳性164例,阳性率达52.2％。患儿年龄2～24个月,平均(5.23±3.76)个月,其中6个月以下占70.1％。临床诊断为毛细支气管炎有57.9％,支气管肺炎34.1％,支气管炎仅占8.0％。26.8％RSV感染患儿临床表现为重症,其中3个月以下小婴儿占63.6％。结论：RSV是2岁以下婴幼儿急性下呼吸道感染最常见的病原,毛细支气管炎和肺炎患儿感染率明显高于支气管炎患儿；感染高峰在6个月以下,3个月以下小婴儿临床表现多数为重症。

5岁以下儿童哮喘急性发作时呼吸道病毒病原学检测分析

支气管哮喘是儿童常见疾病之一,呼吸道病毒感染是小儿哮喘急性发作的常见诱因,尤其是5岁以下儿童哮喘,由于支气管尚处于发育阶段、免疫功能相对低下,极易诱发哮喘急性发作.现就5岁以下儿童哮喘急性发作与呼吸道病毒病原学的关系作一分析.

儿童过敏性紫癜肾炎血清中IFN-γ水平及临床意义

目的:探讨儿童过敏性紫癜肾炎(henoch-schoenlein purpura nephritis,HSPN)患者血清中几种细胞因子的水平变化及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定23例HSPN患儿及12例正常儿童血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-12及TNF-α的水平。结果:HSPN患者血清中IL-2、IL-4、IL-12、TNF-α水平与正常对照组比较无统计学意义(均为P>0.05);而IFN-γ的水平则显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:IFN-γ很可能与HSPN的发生发展密切相关,探索并采用包括中药在内的各种措施干预IFN-γ及其一系列的继发效应,可能在HSPN的临床治疗中具有重要价值。

尘螨过敏性哮喘小鼠模型的建立与评估

目的支气管哮喘(哮喘)的动物模型是研究人类哮喘的重要手段之一,但模型很难模拟人类哮喘的主要特点,而且因致敏原的不同影响了实验研究的意义。该文采用哮喘的常见致敏原尘螨抗原提取物(Derp)制作尘螨过敏性哮喘模型,并描述其气道炎症,评估其气道高反应性,尽可能与人类哮喘的病因及病变过程相似,以利于哮喘的实验研究。方法C57BL/6J小鼠分为对照组和模型组,各6只,Derp两次腹腔注射致敏(day0,day10),麻醉后滴鼻激发隔日一次,共7次,空白对照组用生理盐水代替,末次激发后24h检测气道高反应性(AHR),之后进行支气管肺泡灌洗,肺组织做病理检测(常规及特殊染色)。结果模型组气道阻力增加幅度(Raw%)、动态肺顺应性下降幅度(Cdyn%)均增高(P<0.01),Raw增加25%时(PC25Raw),Cdyn下降15%时(PC15Cdyn)所需的MCh浓度均下降(P<0.01);肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸细胞绝对值计数以及嗜酸细胞百分比均增加(P<0.01);模型组肺组织病理积分高于对照组(P<0.01),并且出现超微结构的改变,还可见杯状细胞,粘液及大量肥大细胞颗粒。结论采用腹腔注射致敏并滴鼻激发的方法可以建立尘螨过敏性哮喘模型,具备了气道炎症及气道高反应性的特点。

肺炎婴幼儿鼻咽分泌物呼吸道病毒、肺炎衣原体的检测分析

【目的】分析温州地区肺炎婴幼儿鼻咽分泌物7种呼吸道病毒、肺炎衣原体的感染及混合感染情况。【方法】选择2004年11月～2006年11月因肺炎而在温州医学院附属育英儿童医院住院治疗的婴幼儿，取其鼻咽分泌物做直接免疫荧光检测筛查7种呼吸道病毒与肺炎衣原体抗原，分析其结果。【结果】460例患儿送检标本，阳性260例（56．5％），其中合胞病毒（RSV）182例（39．6％）、腺病毒（ADV）2例（0．4％）、流感病毒A型（IVA）4例（0．9％）、流感病毒B型（IVB）2例（0．4％）、副流感病毒I型（PIVI）7例（1．5％）、副流感病毒III（PIVIII）16例（3．5％）、肺炎衣原体（CPn）42例（9．1％）。混合感染5例（1．1％），其中RSV＋IVA2例（0．4％），RSV＋CPn3例（0．7％）。RSV冬春两季高发，PIVI以秋季为主，PIVIII与CPn则无明显季节性。【结论】RSV是目前引起婴幼儿肺炎的主要病毒，CPn次之。RSV在温州地区的流行见于冬春季。CPn感染四季散发，存与RSV混和感染情况，在临床诊治中应给予关注。

过敏性紫癜肾炎患者血清对体外培养大鼠GMC增殖及活性氧产生的影响

目的:探讨过敏性紫癜肾炎(HSPN)患者血清对体外培养大鼠肾小球系膜细胞(rGMC)增殖及活性氧(ROS)产生的影响。方法:分别采用HSPN和正常人血清体外培养rGMC,比较二者在细胞增殖及ROS产生上的差别。结果:HSPN组的rGMC增殖显著快于对照组(P<0.01);HSPN组超氧化物歧化酶值明显低于对照组,而产生活性氧单位则显著高于对照组(均为P<0.01)。结论:HSPN患者血清能显著刺激rGMC的增殖,且这一作用极可能与ROS产生过多相关。

2007～2008年温州地区急性呼吸道感染病毒病原学研究

目的分析2007～2008年温州地区急性呼吸道感染病毒病原学的检测结果,为临床提供病毒病原学诊断依据。方法取5097例急性呼吸道感染儿童鼻咽分泌物,采用直接免疫荧光法检测7种常见呼吸道病毒抗原。结果①2209份标本(43.3%)病毒病原检测阳性,其中呼吸道合胞病毒(RSV)1725例(78.1%),腺病毒(ADV)61例(2.8%),流感病毒A型(IVA)66例(3.0%),流感病毒B型(IVB)12例(0.5%),副流感病毒1型(PIV1)38例(1.7%),副流感病毒2型(PIV2)7例(0.3%),副流感病毒3型(PIV3)275例(12.4%);②病毒检出率在小于3个月和小于6个月年龄组较高,分别为53.6%和49.2%;③冬季病毒检出率最高。结论2007～2008年温州地区急性呼吸道感染的病毒仍以RSV为主要病原体,<6个月的婴幼儿病毒感染率较高,好发于冬季。

Toll样受体9基因启动子单核苷酸多态性与儿童变应性哮喘的相关性

目的 研究Toll样受体9（toll-like receptor 9,TLR9）基因启动子区单核苷酸多态性在浙江汉族儿童中的分布,探讨其与哮喘易感性及其表型之间的相关性.方法 对312例变应性哮喘患儿（哮喘组）和339名健康儿童（对照组）采用DNA直接测序法检测TLR9基因-1486（rs187084）和-1237（rs5743836）单核苷酸多态性;采用ELISA法检测两组不同基因型血清干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）、白细胞介素12（interleukin-12,IL-12）和白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）水平;采用化学发光法检测血清总免疫球蛋白E（immunoglobulin E,IgE）水平;采用酶免疫荧光法检测血清变应原特异IgE.结果 （1）哮喘组和对照组均存在-1486位点T→C突变,哮喘组TT、TC和CC 3种基因型的频率分别是3 8.8%、48.4%和12.8%,对照组分别是41.0%、44.3%和14.7%;未发现-1237位点存在多态性.（2）哮喘组和对照组-1486位点各基因型的频率分布差异无统计学意义（P＞0.05）,年龄分层后比较差异也无统计学意义（P＞0.05）.（3）哮喘组-1486位点3种基因型的血清IFN-γ和IL-4水平差异有统计学意义（P＜0.01）,CC基因型的IFN-γ水平较低而IL-4水平较高;对照组2种细胞因子的差异无统计学意义（P＞0.05）.哮喘组和对照组血清IL-12水平在3种基因型间差异均无统计学意义（P＞0.05）.（4）哮喘组-1486位点不同基因型血清总IgE水平差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 浙江汉族儿童不存在TLR9基因-1237位点多态性.TLR9基因-1486 C/T位点单核苷酸多态性与浙江汉族儿童哮喘易感性、血清IL-12及总IgE水平无关;-1486 C/T位点多态性与哮喘患儿血清IFN-γ和IL-4水平有关联,CC基因型的IFN-γ水平较低而IL-4水平较高.

毛细支气管炎CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和Foxp3mRNA表达与激素调控

目的探讨毛细支气管炎（简称毛支）的发病机制与激素治疗。方法对呼吸道合胞病毒（RSV）阳性的毛支患儿，根据血清总IgE是否增高以及有无湿疹、皮炎等过敏病史，分为特应体质和非特应体质2组，各50例，另选健康对照组25名。毛支患儿按临床评分分为轻、中、重度（18、62、20例）；再随机分成激素组（49例）和非激素组（51例）。流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的比例；反转录（RT）-PCR检测Foxp3 mRNA的表达量。结果CD4^＋CD25^＋Treg的数量和Foxp3mRNA表达量：健康对照组、非特应体质组、特应体质组分别为（10．5±1．6）％和0．34±0．11、（8．8±2．2）％和0．26±0．08、（7．6±1．8）％和0．21±0．09，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；轻、中、重组分别为（9．7±1．6）％和0．28±0．08、（7．8±2．1）％和0．24±0．06、（6．7±1．3）％和0．20±0．07（均P〈0．05）。CD4^＋CD25^＋Treg数量、Foxp3mRNA的表达量与临床评分均呈显著负相关（r=-0．62、-0．71，均P〈0．01）；激素治疗后两者均升高[（9．5±2．1）％和0．33±0．10分别比（8．5±1．8）％和0．27±0．12，P〈0．05和〈0．01]。结论CD4^＋CD25^＋Treg和Foxp3mRNA与RSV毛支气道炎症关系密切，可反映毛支的病情严重程度。激素可促进CD4^＋CD25^＋Treg的发育和功能。

母亲叶酸代谢相关基因多态性与唐氏综合征发生的关系

目的研究叶酸代谢相关基因多态性在浙南地区汉族妇女中的分布,探讨其与唐氏综合征(Down's Syn-drome,DS)发生的关系。方法对84例已生育DS患儿的母亲(观察组)和120例生育过正常儿童的母亲(对照组)采用PCR扩增及DNA测序法检测亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、A1298C位点;甲硫氨酸合成酶(MTR)基因A2756G位点单核苷酸多态性。结果 MTHFR 677 T基因及CT、TT基因型、MTHFR 1298 C基因及AC、CC基因型、MTR 2756 G基因及AG基因型频率观察组与对照组比较均无统计学意义(P>0.05)。三个位点基因型频率联合分析两组也不存在统计学意义(OR=0.692,P>0.05)。结论浙南地区汉族妇女MTHFR C677T、FTHFR A1298C、MTR A2756G基因型不是DS发生的风险因素;三个基因型的联合频率也未见增加DS发生的风险。