基于翻转课堂与PBL教学模式相结合的临床生物化学检验教学改革与探索

针对我国高等医学院校临床生物化学检验理论教学中缺乏应用性和创新性的现状,作者构建了结合翻转课堂与基于问题的学习教学模式的理论教学体系,同时进行建立具体的评价方法与指标等措施。这将从提供良好的学习环境激发学生的学习积极性和学习自主性、发挥专业教师的重要引导作用和督促提高业务能力,提高理论教学的质量及培养高素质的医学检验应用型和创新型人才起到促进作用。

PBL教学模式在生物材料检验课堂教学中的应用初探

通过改进传统课堂教学模式,尝试在生物材料检验课程教学中引入PBL方法,提高学生在课堂教学中的参与程度,达成更好的教学效果。并对PBL实施过程中发现的问题提出对策措施,以更好地实现培养专业人才的目标。

运动及复杂环境抑制细菌脂多糖诱导的中脑黑质多巴胺能神经元损伤

目的探讨运动和复杂环境对细菌脂多糖(LPS)诱导的中脑黑质多巴胺能神经元死亡的影响。方法将C57BL/6小鼠分为对照组、LPS组、LPS+游泳组和LPS+复杂环境组,每组各7只。LPS组小鼠通过脑立体定位注射建立帕金森病炎症模型,置于鼠笼中生活2周。LPS+游泳组小鼠模型制作后每日强迫进行游泳运动15 min,运动2周。LPS+复杂环境组小鼠模型制作后置于复杂环境生活2周。对照组小鼠不做处理。模型制作14 d后,对各组小鼠进行足迹、旷场和滚轴等行为学实验,检测小鼠的自主运动能力、运动平衡能力和抑郁水平;免疫组织化学染色和Western blotting检测中脑黑质中酪氨酸羟化酶(TH)的表达;Western blotting检测中脑黑质中脑源性神经生长因子(BDNF)、Caspase-3、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达;RT-PCR检测中脑黑质中IL-1β、IL-6和TNF-α转录水平。结果与对照组相比,LPS组、LPS+游泳组、LPS+复杂环境组小鼠的运动能力和平衡能力均有所下降,抑郁水平有所上升(P<0.001),TH阳性神经元存活数量和BDNF蛋白量均显著减少(P<0.001),Caspase-3及IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著增高(P<0.001)。与LPS组相比,LPS+游泳组和LPS+复杂环境组小鼠的运动能力和平衡能力均有所恢复,抑郁水平显著下降(P<0.01),TH阳性神经元存活数量及BDNF含量均显著增多(P<0.01),Caspase-3及IL-1β、IL-6和TNF-α均显著减少(P<0.01),且LPS+复杂环境组现象更为显著。结论运动和复杂环境能抑制LPS诱导的小鼠中枢神经系统炎症,从而减轻对中脑黑质神经元的损伤,且LPS+复杂环境组的抑制效果更为显著。

阿片受体影响雄性睾酮分泌的外周机制研究

目的:研究阿片μ受体对雄性睾酮的影响和外周机制。方法:通过在体动物模型的睾丸内吗啡注射和离体培养睾丸组织的特异性μ受体拮抗剂和激动剂处理,检测血浆、培养基和睾丸匀浆睾酮水平、睾丸匀浆睾酮合成酶m RNA水平、睾丸匀浆胰岛素样生长因子1(IGF1)蛋白和m RNA表达水平。结果:睾丸内注射吗啡后血清睾酮水平下降[(722.11±121.02)vs.(346.91±75.31)pg/mL;t=7.898,P=0.001],睾丸匀浆中的睾酮水平下降[(133.61±16.82)vs.(66.56±14.96)pg/mg总蛋白;t=8.941,P=0.001],同时下调睾酮合成酶的表达;吗啡睾丸内注射显著降低睾丸内IGF1蛋白[(7.93±2.13)vs.(2.54±0.74)ng/mg总蛋白,t=7.155,P=0.001]和m RNA[(3.22±1.12)vs.(1.66±0.55),t=3.751,P=0.001]的表达。睾丸体外培养模型中阿片μ受体特异性的激动剂(DAMGO)下调培养基的睾酮水平及睾丸匀浆合成酶、IGF1的表达;阿片μ受体抑制剂(CTOP)则上调睾酮水平及合成酶、IGF1的表达。结论:阿片类药物作用于睾丸Sertoli细胞(支持细胞)表面的阿片μ受体,抑制IGF1的合成,进而减少睾丸Leydig细胞(间质细胞)睾酮合成酶Scarb1(清道夫受体B1)、Star(类固醇合成快速调节蛋白)、3βHsd(3-羟基-5类固醇脱氢酶)、Cyp17α1(17α-羟化酶)和17βHsd(17β羟基固醇脱氢酶)的表达,最终导致睾酮合成减少。

肝硬化患者血浆输注临床分析

目的：探讨肝硬化患者血浆输注的疗效。方法收集近两年所有肝硬化住院患者病历资料，筛选出输注血浆治疗的223例患者，分析其血浆输注的病因，血浆输注前后的凝血功能和肝生化指标的改变。结果肝硬化患者血浆输注主要病因为乙肝所致肝硬化。患者输注血浆后凝血功能显著改善，凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、国际标准化比值（INR）显著下降，差异有统计学意义（t分别=2.16、2.42、2.15，P均＜0.05）。同时患者输注血浆后肝功能相关生化指标明显好转，白蛋白（Alb）显著上升，谷草转氨酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）、血清肌酐（Scr）、总胆红素（TBIL）（初始TBIL 34～51μmol/L组）显著下降，差异有统计学意义（t分别=2.70、2.31、2.15、2.51、1.74，P均＜0.05）。结论肝硬化患者输注血浆后凝血和肝功能相关生化指标得到改善，综合评价血浆输注的疗效可同时考虑凝血和肝功能相关生化指标。

ACTL8的表达与乳腺癌临床病理特征及预后的关系

目的:探讨肌动蛋白样蛋白8(ACTL8)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法:采用Western blot方法检测人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A和5种乳腺癌细胞株中ACTL8蛋白的表达;采用免疫组织化学方法检测6例乳腺癌标本及其对应的癌旁组织中ACTL8蛋白的表达;收集TCGA乳腺癌数据集,将488例乳腺标本纳入,分析ACTL8的mRNA表达水平与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:ACTL8蛋白在乳腺癌细胞株T47D、BT474、HCC1954和SKBR3中表达显著高于乳腺上皮细胞株MCF-10A;ACTL8蛋白在乳腺癌组织中的表达也显著高于癌旁组织;ACTL8 mRNA表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、临床TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05)。ACTL8 mRNA高表达的乳腺癌患者5年内生存率低、预后差。结论:ACTL8在乳腺癌组织中高表达并与乳腺癌临床病理特征及预后密切相关,提示ACTL8可作为判断乳腺癌预后的标志物。

芬苯达唑对慢性髓系白血病K562细胞的增殖抑制作用

目的:探讨抗寄生虫药芬苯达唑对慢性髓系白血病细胞K562的作用及机制。方法:采用CCK-8法检测芬苯达唑对K562和正常人外周血单个核细胞(PBMC)生长的影响;台盼蓝拒染实验检测芬苯达唑对K562细胞活力的影响;瑞氏染色观察芬苯达唑对K562细胞形态的影响;流式细胞术检测芬苯达唑对K562细胞周期分布的影响;Western blot检测芬苯达唑对K562细胞周期相关蛋白表达的影响;免疫荧光观察芬苯达唑对K562细胞核的改变。结果:芬苯达唑能够显著抑制K562细胞的生长,而对PBMC生长无明显影响;进一步的研究发现,芬苯达唑显著抑制K562细胞增殖并诱导细胞发生G_2/M期阻滞;芬苯达唑处理K562细胞后,细胞分裂周期蛋白25C(Cdc25C)磷酸化、周期素依赖性激酶1(Cdk1)-Tyr15去磷酸化以及cyclin B1磷酸化增加;免疫荧光结果证实芬苯达唑诱导K562多核细胞增多(P<0.01),发生有丝分裂灾难。结论:芬苯达唑通过调控周期相关蛋白诱导K562细胞发生G_2/M期阻滞。

高通量混合基因测序预测志贺菌属新型耐药基因研究

目的通过高通量测序结合生物信息学分析,预测110株志贺菌属中与耐药基因库序列相似度差异较大的潜在新型耐药基因。方法 110株志贺菌属来源于2006年6月-2011年6月温州地区不同医院腹泻患者粪便标本,采用碱裂解法提取志贺菌属的混合基因DNA,Illumina HiSeq 2000高通量测序;通过基于同源比对核心算法的基因分析,挖掘与已知耐药基因遗传变异较大、相似性较低的潜在新型耐药基因。结果 110株志贺菌属中福氏志贺菌30株、宋氏志贺菌80株,福氏、宋氏志贺菌高通量测序总碱基数分别为4.9和3.5Gb;志贺菌属高通量测序数据信息挖掘,分别获得潜在的耐药片段宋氏志贺菌255个和福氏志贺菌272个,分布于712条Unigene中;GO和COG蛋白功能数据库注释,发现其分子功能绝大多数与转运(21.3%)、催化(25.2%)、结合(25.2%)和转录调控(9.3%),福氏志贺菌denovo组装后预测发现外排泵基因mdt操纵子。结论研究提出的基于同源比对的核心算法,可以有效地预测与参考耐药基因序列相似性较低的基因,为新型耐药基因的发现提供了思路。