脊髓活性氧激活自噬参与调节2型糖尿病神经病理性疼痛

目的:探讨脊髓中活性氧(reactive oxygen species,ROS)是否通过激活自噬参与大鼠2型糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)的形成和发展。方法:清洁级雄性SD大鼠高脂高糖喂养8周,后链脲佐菌素(streptozocin,STZ)单次小剂量(35 mg/kg)腹腔注射,注射后3 d血糖≥16.7 mmol/L为成功诱导2型糖尿病发生;注射后14 d行为学测定痛阈下降至基础值的85%以下,即为成功制备出大鼠2型DNP模型,否则为2型糖尿病不痛组(PL组)。将造模成功的2型DNP大鼠随机分为3组,每组10只:DNP组、DNP+ROS清除剂组(DNP+PBN组)和溶剂对照组(SC组)。另取10只正常SD大鼠为对照组(C组),普通饲料喂养,给予PBN后3 d、7 d、14 d时测定所有组别大鼠的机械缩足反应阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),随后处死大鼠,取脊髓腰膨大L4-L6,用免疫印迹法测定脊髓中Beclin 1、LC3II/LC3I和p62的表达水平;用流式细胞仪测定脊髓组织中活性氧(ROS)的含量。结果:与C组和PL组比较,DNP组和SC组于模型制备成功后3 d、7 d和14 d时MWT下降,TWL缩短,脊髓ROS、Beclin 1和LC3II/LC3I表达上调(P<0.05),而p62表达下降(P<0.05);与DNP组比较,DNP+PBN组在3 d、7 d和14 d时MWT升高、TWL延长,脊髓Beclin 1和LC3II/LC3I表达下降(P<0.05),而p62表达上调(P<0.05);DNP组与SC组各指标比较差异均无统计学意义。结论:脊髓ROS通过激活自噬参与调节2型糖尿病神经病理性疼痛的产生和维持。

NR2B-Wnt3α-ADAM10信号通路与糖尿病脑病关系的研究进展

糖尿病脑病(DE)是糖尿病引起的中枢神经系统损害,可引起认知功能障碍。糖尿病时大脑N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDARs)表达异常,人们由此推断NMDARs在DE的发展过程中可能发挥重要作用〔1〕。NMDARs的激活通过Wnt信号通路引起去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)的变化,与认知功能密切相关〔2,3〕。

消退素D1缓解神经病理性疼痛的研究进展

背景神经病理性疼痛（neuropathicpain，NP）是临床上常见的医学难题，因其形成机制复杂，目前尚缺乏有效的治疗手段。消退素（resolvin，Rv）D1是一种新发现的内源性促炎症消退介质，对多种疼痛模型具有镇痛作用，然而其具体镇痛机制仍不明确。最近有研究发现，它可参与影响小胶质细胞激活状态，促进其M2型极化，而小胶质细胞的激活状态与NP等慢性神经炎性疾病密切相关。目的分析RvD1是否可通过影响小胶质细胞的激活状态来产生镇痛作用。内容简要介绍近来对于RvD1的镇痛作用及其与小胶质细胞活化关系的研究进展。趋向完善RvD1的镇痛机制，探寻新的NP治疗方法。

小胶质细胞极化与神经病理性疼痛的关系

背景神经病理性疼痛（neuropathicpain，NP）的形成机制非常复杂，其中免疫炎症对NP的产生和维持非常重要，小胶质细胞作为中枢神经系统（centralnervoussystem，CNS）的免疫活性细胞，已证实其激活与NP密切相关，而且其不同的极化状态（M1／M2）对CNS的免疫环境产生截然不同的损伤或保护作用。有研究发现，促进小胶质细胞M2型极化可抑制多种慢性神经炎性疾病，并在脊髓损伤（spinecordinjury，SCI）模型中产生镇痛作用。目的阐述小胶质细胞M2型极化与NP关系的研究进展。内容从NP的发病机制，小胶质细胞极化及与神经疾病关系，与NP发生、发展关系等研究进展展开综述。趋向从免疫炎症方面为NP的发病机制及其治疗提供新的思路。

姜黄素对糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓背角NR2B与NR1活性的影响

目的 评价姜黄素对糖尿病神经病理性痛（DNP）大鼠脊髓背角NR2B与NR1活性的影响.方法 高糖高脂饲料喂养SD大鼠8周诱导胰岛素抵抗,继以单次小剂量链脲佐菌素（STZ）35 mg/kg腹腔注射,3d后血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病大鼠;14 d后测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足反应潜伏期（TWL）,低于基础值80％的大鼠为DNP大鼠,采用随机数字表法分为3组（n=27）：DNP组、DNP＋姜黄素组（DCur组）和DNP＋溶剂组（DSC组）.DCur组和DSC组于注射STZ 14 d后分别腹腔注射姜黄素100 mg·kg-1·d-1和玉米油4 ml·kg-1 ·d-1,连续注射14 d.另取27只正常大鼠为对照组（C组）.给予姜黄素3、7和14 d后测定MWT和TWL,并在同时点取大鼠L4-6脊髓,用免疫组化和免疫印迹法测定脊髓背角pTyr1472-NR2B与pSer896-NR1的表达.结果 与C组比较,DNP组各时点MWT降低,TWL缩短,脊髓背角pTyr1472-NR2B表达上调（P＜0.05）;与DNP组比较,DCur组给予姜黄素7d后MWT升高,TWL延长,给予姜黄素3d后脊髓背角pTyr1472-NR2B表达下调（P＜0.05）;DSC组与DNP组各指标比较差异无统计学意义（P＞0.05）;4组脊髓背角pSer896-NR1表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 姜黄素减轻大鼠DNP的机制可能与抑制脊髓背角NR2B激活有关,而与脊髓背角NR1无关.

糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓内质网应激的变化

目的评价糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓内质网应激的变化。方法清洁级健康雄性SD大鼠,8周龄,体重120~160 g,高脂高糖饲养8周后,腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg,注射3 d后血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病模型制备成功,注射后14 d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL),MWT和TWL低至基础值85%以下为大鼠DNP模型制备成功,否则为非DNP(NDNP),各取15只为DNP组和NDNP组,另取正常大鼠15只为对照组(C组)。于模型制备成功后3、7和14 d时测定MWT和TWL,随后处死大鼠取L4-6脊髓膨大组织,采用Western blot法检测肌醇需求酶1α(IRE1α)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和Beclin1的表达。结果与C组和NDNP组比较,DNP组模型制备成功后3、7和14 d时MWT降低,TWL缩短,脊髓IRE1α、p-JNK和Beclin1表达上调(P<0.05)。结论大鼠DNP产生和维持的机制可能与脊髓内质网应激加重,p-JNK表达上调诱发自噬有关。

姜黄素对2型糖尿病神经痛大鼠脊髓背角和背根神经节RAGE表达的影响

目的 评价姜黄素对2型糖尿病神经痛大鼠脊髓背角和背根神经节晚期糖基化终末产物受体（RAGE）表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠,体重160～ 180 g,高脂高糖饲料喂养8周诱导胰岛素抵抗,然后腹腔注射链脲佐菌素（STZ）35 mg/kg,3d后血糖浓度≥16.7 mmol/L为2型糖尿病大鼠;14 d后测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足反应潜伏期（TWL）,低于基础值80％的大鼠为2型糖尿病神经痛大鼠.取2型糖尿病神经痛大鼠81只,采用随机数字表法分为3组（n=27）：糖尿病神经痛组（DNP组）、糖尿病神经痛＋姜黄素组（DCur组）和糖尿病神经痛＋溶剂组（DSC组）.DCur组和DSC组于STZ注射后14 d分别腹腔注射姜黄素100 mg·kg^-1·d^-1和玉米油4 m1·kg^-1·d^-1,连续14 d.另取27只正常大鼠作为对照组（C组）.分别于STZ注射前、注射后14 d及给予姜黄素3、7和14 d时时测定MWT和TWL.给予姜黄素3、7和14d测定痛阈后采用免疫组化法测定脊髓背角和背根神经节RAGE阳性细胞率,采用免疫印迹法测定脊髓背角和背根神经节RAGE表达.结果 与C组比较,DNP组STZ注射后14 d和给予姜黄素各时点MWT降低,TWL缩短,给予姜黄素各时点脊髓背角和背根神经节RAGE阳性细胞率升高,给予姜黄素各时点脊髓背角、给予姜黄素7和14 d时背根神经节RAGE表达上调（P＜0.05）.与DNP组比较,DCur组给予姜黄素各时点MWT升高,TWL延长,给予姜黄素7和14 d时脊髓背角和背根神经节RAGE阳性细胞率降低,给予姜黄素各时点脊髓背角、给予姜黄素7和14 d时背根神经节RAGE表达下调（P＜0.05）,DSC组上述各指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 姜黄素减轻大鼠2型糖尿病神经痛的机制可能与抑制脊髓背角和背根神经节RAGE表达上调有关.