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LPS刺激单核巨噬细胞培养上清对成骨细胞OPG/RANKL的影响
被引量:
2
1
作者
王海燕
秦化祥
+2 位作者
邓辉
孙超凡
胡荣党
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
2015年第4期428-432,共5页
目的 :观察经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞MC3T3-E1 OPG/RANKL表达的影响。方法:收集经100 ng/m L Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后的上清,以不同稀释浓度(10%、20%...
目的 :观察经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞MC3T3-E1 OPG/RANKL表达的影响。方法:收集经100 ng/m L Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后的上清,以不同稀释浓度(10%、20%、30%、40%和50%)的培养上清作用于MC3T3-E1 24h,分别通过RT-PCR、免疫印迹法(Western blotting)检测细胞OPG/RANKL基因和蛋白水平表达的变化,采用SPSS17.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:MC3T3-E1经不同稀释浓度的培养上清刺激后,其OPGm RNA及蛋白表达随浓度的增加而显著减少(P<0.05),而RANKLm RNA及蛋白表达随浓度的增加显著增加(P<0.05)。结论:Pg-LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清可通过抑制成骨细胞OPGm RNA及蛋白的表达,增加RANKLm RNA及蛋白的表达而抑制其成骨能力,且与浓度呈一定的正相关。
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关键词
LPS
单核巨噬细胞
成骨细胞
OPG/RANKL
下载PDF
职称材料
低氧调控大鼠骨髓间充质干细胞OPG/RANKL mRNA的表达
被引量:
6
2
作者
史新连
胡碧波
+2 位作者
任曼曼
喻文彬
邓辉
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
2017年第3期258-262,共5页
目的:探讨低氧处理对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κb受体活化因子配体(receptor activator of NF-κb ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:采...
目的:探讨低氧处理对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κb受体活化因子配体(receptor activator of NF-κb ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:采用全骨髓细胞贴壁法分离、培养rBMSCs,应用化学低氧剂氯化钴(CoCl_2)建立低氧模型,分别以0、50、100、200、400μmol/L浓度的CoCl_2孵育细胞,首先采用MTT法检测CoCl_2对细胞增殖的影响;利用实时荧光定量PCR及Western免疫印迹检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达情况。rBMSCs经低氧处理0、12、24、48、72、96 h,实时荧光定量PCR检测OPG、RANKL mRNA的表达。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,200、400μmol/L的CoCl_2抑制rBMSCs增殖(P<0.05),而50、100μmol/L CoCl_2实验组的增殖并未产生显著影响(P>0.05)。在50、100μmol/L CoCl_2实验组,rBMSCs表达HIF-1α的mRNA和蛋白水平均高于对照组,100μmol/L CoCl_2组较50μmol/L CoCl_2组高。100μmol/L CoCl_2孵育12 h时,低氧组和对照组rBMSCs的OPG、RANKL mRNA的表达无变化(P>0.05);24、48、72、96 h时,与常氧组相比,低氧组OPG mRNA表达水平升高,RANKL mRNA表达水平下降,OPG/RANKL的比值显著升高(P<0.05)。结论:100μmol/L CoCl_2低氧处理可通过调控rBMSCs OPG、RANKL mRNA的表达,从而促进成骨分化。
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关键词
大鼠骨髓间充质干细胞
低氧
骨保护素
核因子ΚB受体活化因子配体
下载PDF
职称材料
题名
LPS刺激单核巨噬细胞培养上清对成骨细胞OPG/RANKL的影响
被引量:
2
1
作者
王海燕
秦化祥
邓辉
孙超凡
胡荣党
机构
温州医科大学
附属
口腔
医院
正畸
科
温州医科大学附属口腔医院牙周病科
出处
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
2015年第4期428-432,共5页
基金
浙江省自然科学基金(Y207360)
温州市科技计划项目(Y20130259)~~
文摘
目的 :观察经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞MC3T3-E1 OPG/RANKL表达的影响。方法:收集经100 ng/m L Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后的上清,以不同稀释浓度(10%、20%、30%、40%和50%)的培养上清作用于MC3T3-E1 24h,分别通过RT-PCR、免疫印迹法(Western blotting)检测细胞OPG/RANKL基因和蛋白水平表达的变化,采用SPSS17.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:MC3T3-E1经不同稀释浓度的培养上清刺激后,其OPGm RNA及蛋白表达随浓度的增加而显著减少(P<0.05),而RANKLm RNA及蛋白表达随浓度的增加显著增加(P<0.05)。结论:Pg-LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清可通过抑制成骨细胞OPGm RNA及蛋白的表达,增加RANKLm RNA及蛋白的表达而抑制其成骨能力,且与浓度呈一定的正相关。
关键词
LPS
单核巨噬细胞
成骨细胞
OPG/RANKL
Keywords
LPS
Monocyte
Osteoblasts
OPG/RANKL
分类号
R78 [医药卫生—口腔医学]
下载PDF
职称材料
题名
低氧调控大鼠骨髓间充质干细胞OPG/RANKL mRNA的表达
被引量:
6
2
作者
史新连
胡碧波
任曼曼
喻文彬
邓辉
机构
温州医科大学附属口腔医院牙周病科
温州医科大学
附属
口腔
医院
正畸
科
出处
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
2017年第3期258-262,共5页
基金
浙江省自然科学基金(LY17H140009)
浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划(2016R413074)
+1 种基金
浙江省医药卫生科技计划(2015KYA149)
温州市公益性科技计划(Y20160140)
文摘
目的:探讨低氧处理对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κb受体活化因子配体(receptor activator of NF-κb ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:采用全骨髓细胞贴壁法分离、培养rBMSCs,应用化学低氧剂氯化钴(CoCl_2)建立低氧模型,分别以0、50、100、200、400μmol/L浓度的CoCl_2孵育细胞,首先采用MTT法检测CoCl_2对细胞增殖的影响;利用实时荧光定量PCR及Western免疫印迹检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达情况。rBMSCs经低氧处理0、12、24、48、72、96 h,实时荧光定量PCR检测OPG、RANKL mRNA的表达。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,200、400μmol/L的CoCl_2抑制rBMSCs增殖(P<0.05),而50、100μmol/L CoCl_2实验组的增殖并未产生显著影响(P>0.05)。在50、100μmol/L CoCl_2实验组,rBMSCs表达HIF-1α的mRNA和蛋白水平均高于对照组,100μmol/L CoCl_2组较50μmol/L CoCl_2组高。100μmol/L CoCl_2孵育12 h时,低氧组和对照组rBMSCs的OPG、RANKL mRNA的表达无变化(P>0.05);24、48、72、96 h时,与常氧组相比,低氧组OPG mRNA表达水平升高,RANKL mRNA表达水平下降,OPG/RANKL的比值显著升高(P<0.05)。结论:100μmol/L CoCl_2低氧处理可通过调控rBMSCs OPG、RANKL mRNA的表达,从而促进成骨分化。
关键词
大鼠骨髓间充质干细胞
低氧
骨保护素
核因子ΚB受体活化因子配体
Keywords
Rat bone marrow derived mesenchymal stem cells
Hypoxia
Osteoprotegerin
Receptor activator of NF-κb ligand
分类号
R781.4 [医药卫生—口腔医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
LPS刺激单核巨噬细胞培养上清对成骨细胞OPG/RANKL的影响
王海燕
秦化祥
邓辉
孙超凡
胡荣党
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
2015
2
下载PDF
职称材料
2
低氧调控大鼠骨髓间充质干细胞OPG/RANKL mRNA的表达
史新连
胡碧波
任曼曼
喻文彬
邓辉
《上海口腔医学》
CAS
CSCD
2017
6
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