孟德尔随机化分析联合PBL教学模式在《牙周病学》本科教学中的探索

目的:将分析疾病因果关系的孟德尔随机化(MR)分析联合以问题为导向的教学方法(PBL)的教学模式应用于《牙周病学》教学,引导学生了解探究牙周病与全身因素之间的关联性,并研究此模式在牙周病教学中的应用效果。方法:以《牙周病学》教材为主,教授学生MR分析手段为辅,引导学生进行科研探究,提升科研思维和文献查阅能力。选取温州医科大学2019级两个班级的口腔医学专业学生,随机按照班级分为实验组(MR分析联合PBL教学模式)与对照组(课堂授课联合PBL教学模式),实验组53人、对照组54人。课程结束后通过学生课堂表现评分、考试成绩和科研创新思维能力对两种教学模式进行考核评价。结果:经过MR分析联合PBL教学后,实验组学生理论成绩优于对照组,实验组学生试题平均分为84.9±4.6,而对照组的试题平均分为79.2±4.3,差异有统计学意义(P<0.05)。同时,实验组学生课堂表现评分为96.7±5.7,而对照组评分为91.2±4.8,差异有统计学意义(P<0.001)。此外,实验组学生科研创新思维能力优于对照组,具体表现为参与更多科研项目及论文撰写发表。结论:采用MR分析联合PBL的教学模式进行《牙周病学》教学,可加深学生对于牙周疾病与全身疾病关联性的理解与掌握。学生通过查阅科研文献,深入探究补充牙周病与全身疾病之间的关联性,可有效提升学生科研思维能力及文献查阅能力。

PDCA循环在提高牙周病患者口腔摄影图像质量中的应用

目的研究了PDCA循环在提高牙周病患者口腔摄影图像质量中的应用效果。方法选取2022年2月至7月温州医科大学附属口腔医院收治的94例牙周病患者,将2022年2月至4月进行口腔摄影图像拍摄的患者47例纳入对照组,5月至7月拍摄的患者47例纳入PDCA组。同时选取温州医科大学附属口腔医院牙周科护理人员9例。对照组患者由护理人员开展常规的口腔摄影图像拍摄。PDCA组在对照组的基础上使用PDCA循环。比较两组牙周病患者的图像质量达标情况以及对口腔摄影拍摄过程的满意度。比较PDCA循环实施前后护理人员的摄影技术扣分情况。结果PDCA组图像质量达标率显著高于对照组(P<0.05)。PDCA组对口腔摄影拍摄过程的满意度显著高于对照组(P<0.05)。PDCA循环实施后,护理人员用物准备、正面照、侧面照、舌侧面照、上下颌面照、摄影时间以及摄影技术扣分均显著低于实施前(P<0.05)。结论PDCA循环能够有效提高牙周病患者口腔摄影图像质量达标率和患者对拍摄过程的满意度,改善护理人员摄影技术评分。

基于IKAP理论的延续护理对慢性牙周炎患者口腔卫生习惯的影响

目的 观察基于IKAP理论的延续护理对慢性牙周炎患者口腔卫生习惯的影响。方法 选取该院2022年3月至2023年3月收治的慢性牙周炎患者110例,随机分为对照组与观察组各55例。两组均予常规护理,观察组在此基础上加用基于IKAP理论的延续护理。干预3个月后比较两组干预前后口腔卫生习惯、自我效能水平及心理状态。结果 干预后观察组每次刷牙持续时间、每日牙线使用次数、每周牙间隙清洁次数高于对照组,口腔保健自我效能量表各维度评分及总分高于对照组,牙科畏惧量表及牙科焦虑量表评分低于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 基于IKAP理论的延续护理能够改善慢性牙周炎患者口腔卫生习惯,提高患者口腔保健自我效能,缓解患者牙科畏惧及焦虑心态。

富血小板纤维蛋白联合羟基磷灰石治疗牙周骨内缺损的Meta分析

目的:从临床指标方面系统评价富血小板纤维蛋白(PRF)与羟基磷灰石(HA)联用治疗牙周骨内缺损的疗效。方法:计算机检索PubMed、the Cochrane Library、Web of Science、维普、万方数据库、中国知网,检索关于PRF和HA联合治疗与PRF或HA单独治疗牙周骨内缺损的随机对照实验(RCT),检索时限从建库至2023年6月。结果:最终纳入9个RCT,354个牙周骨内缺损位点。Meta分析显示,PRF与HA联合应用组与PRF组和HA组的探诊深度(PD)、临床附着丧失(CAL)、菌斑指数(PI)、牙龈指数(GI)的改变量差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:目前的研究证据表明,PRP与HA联合应用治疗牙周骨内缺损均优于单用PRF或HA,由于纳入研究数量及质量的限制,还亟待更多高质量文献的证明。

自体软组织替代材料治疗天然牙牙龈退缩的Meta分析

目的:从临床指标方面系统评价并比较自体软组织替代材料与结缔组织移植物联合冠向复位瓣技术治疗天然牙牙龈退缩的疗效。方法:计算机检索PubMed、EMBASE、Web of Science、维普、万方、知网等数据库中关于自体软组织替代材料或结缔组织移植物(CTG)治疗牙龈退缩的随机对照试验,检索时限从2013年1月至2023年12月。结果:最终纳入14个随机对照研究,1117个牙龈退缩位点。Meta分析显示,术后6个月时,CTG与异种胶原基质(XCM)比较能更好地降低牙龈退缩深度,与富血小板纤维蛋白(PRF)、脱细胞真皮基质(ADM)比较无明显区别;CTG与PRF、ADM、XCM比较角化龈宽度增量更明显;根面覆盖率指标差异无统计学意义;PRF、XCM可以明显降低患者术后的疼痛感。结论:研究表明,自体软组织替代材料与CTG相比,对于治疗牙龈退缩的效果并没有显著差异,但是前者可以降低患者术后疼痛感。

根分叉病变评估及治疗的研究进展

根分叉病变是指牙周炎病变累及多根牙根分叉区,在该处出现牙周袋、附着丧失和牙槽骨吸收。由于根分叉区的特殊解剖条件,给彻底清创带来很大困难,加之发病因素复杂,造成根分叉病变病情进展快,治疗难度大,伴有根分叉病变的患牙失牙率较一般牙高。因此,根分叉病变的早期发现、准确评估和规范治疗对疾病防治十分重要。笔者总结国内外经典和时新的根分叉病变相关研究,对根分叉病变检查评估和治疗做一综述,以期提高临床医师对根分叉病变的诊疗水平。

黄芩素对人牙周膜细胞骨向分化能力的影响

目的:探讨中药黄芩提取物黄芩素对人牙周膜细胞(h PDLCs)增殖和成骨分化功能的影响。方法:原代培养h PDLCs,向h PDLCs中分别加入浓度为0.3125、0.625、1.25μmol/L的黄芩素作为实验组,对照组不加黄芩素。MTT法检测黄芩素对h PDLCs增殖的影响后,分别采用碱性磷酸酶(ALP)活性测定、茜素红S染色、Real-time PCR和Western Blot法研究黄芩素对h PDLCs ALP活性、矿化结节形成、I型胶原(Col-I)m RNA和蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,各浓度黄芩素对h PDLCs增殖均无明显影响;各浓度黄芩素组均表现为ALP活性上升;同时骨向诱导21 d后可见黄芩素组矿化结节形成增加,定量分析结果显示1.25μmol/L黄芩素组形成矿化结节数量最多;Real-time PCR和Western Blot结果显示各浓度黄芩素组Col-I m RNA和蛋白表达均有上升,7 d时随浓度的增加其表达上升,1.25μmol/L黄芩素组达到最高水平。结论:黄芩素能促进h PDLCs的骨向分化能力,具有进一步研究其辅助牙周再生治疗的价值。

PBL教学结合翻转课堂教学在牙周病学课程教学中的应用

目的探讨基于问题教学(PBL教学)结合翻转课堂教学在牙周病学课程教学中的应用效果。方法选取温州医科大学口腔医学院2014级口腔医学专业共86名学生作为研究对象,随机分为试验组和对照组,每组各43名。试验组采用PBL教学结合翻转课堂教学,对照组仅采用PBL教学,通过课堂表现评分、随堂测验成绩及问卷调查对2种教学方法的效果进行评价。结果试验组学生课堂表现评分和随堂测验成绩优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组教学满意度高于对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PBL教学结合翻转课堂教学能显著提高牙周病学课程教学效果,有助于提高学生的学习兴趣和综合能力。

黄芩素对人牙周膜细胞增殖、RUNX2和BMP2表达的研究

目的探讨中药黄芩提取物黄芩素对人牙周膜细胞（hPDLCs）增殖和成骨基因RUNX2、BMP2表达的影响。方法原代培养hPDLCs,hPDLCs中分别加入浓度为1.25、2.50、5.00、10.00μmol/L的黄芩素作为实验组,空白组不加黄芩素。MTT法检测黄芩素对hPDLCs增殖的影响;试剂盒检测ALP的活性和表达;qRT-PCR研究黄芩素对hPDLCs RUNX2、BMP2表达的影响。结果较空白组,1.25-10.00μmol/L黄芩素作用于hPDLCs,其增殖活力略下降,但差异无统计学意义（P〉0.05）;黄芩素组ALP活性和表达上升（P〈0.05）,呈浓度依赖性;成骨相关基因RUNX2、BMP2 mRNA表达水平随时间延长,表达量持续上升,11 d上升最为显著（P〈0.05）,且10.00μmol/L黄芩素组显著高于其余浓度组（P〈0.05）。结论黄芩素对hPDLCs骨向分化有促进作用,有可能作为牙周再生的选择之一。

褪黑素对人牙周膜细胞成骨分化能力的影响

目的探讨褪黑素对人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化能力的影响。方法原代培养法成功提取hPDLCs后,加入不同浓度的褪黑素作为实验组,空白对照组不加褪黑素。MTT法检测不同浓度褪黑素对细胞增殖的影响,相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)的活性和表达后,采用茜素红S染色、Real-time PCR和Western Blot分别研究褪黑素对hPDLCs的矿化结节、成骨相关mRNA以及蛋白表达的影响。结果与对照组相比,褪黑素组hPDLCs的增殖活力略有抑制,其中50μmol/L和100μmol/L褪黑素组抑制最为显著(P<0.01);褪黑素组均表现为ALP活性和表达上升,矿化结节形成增多且呈浓度依赖性(P<0.01);Real-time PCR和Western Blot结果显示褪黑素组成骨相关mRNA和蛋白表达均有上升(P<0.01)。结论褪黑素可促进hPDLCs的成骨分化,具有作为牙周再生治疗药物的潜能。

4种炎症因子在牙周炎与冠心病相关性中的作用

目的:探讨4种炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1在牙周炎与冠心病(CHD)相关性中的可能角色,进一步探索牙周炎和CHD的相关机制。方法:选取2015年7月至2016年5月就诊于温州市中医院口腔科及温州市人民医院心内科的129例研究对象,其中健康者39名,单纯中重度牙周炎患者35例,单纯CHD患者31例,CHD伴中重度牙周炎患者24例,采用定制的ProcartaPlex多因子ELISA试剂盒检测每位受检者的血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1含量。结果:经协方差分析排除危险因素BMI和血压的作用后,各组血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1的差异有统计学意义(P<0.05),CHD伴中重度牙周炎组最高。除MCP-1以外,中重度牙周炎组和CHD组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于健康组。结论:中重度牙周炎患者升高的血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,可能促进CHD的发生发展。

相关粘附分子在牙周炎与冠心病相关性中的作用初探

目的探讨牙周炎与冠心病(coronary heartdisease,CHD)相关性及粘附分子包括血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、细胞间粘附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、P-选择素及E-选择素在两者相关性中的可能作用。方法选取冠心病伴中重度牙周炎的患者24例(PD+CHD组),单纯冠心病患者31例(CHD组),中重度牙周炎患者35例(PD组)及健康对照组(HC组)39例;临床检查(包括探诊出血、牙周袋探诊深度和临床附着丧失)并记录,采用酶联免疫吸附反应法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)常规检测血清样本中ICAM-1、VCAM-1、E-选择素、P-选择素的含量,进行统计学分析。结果各组间血清ICAM-1、VCAM-1、P-选择素、E-选择素水平有统计学差异(P<0.05),中、重度牙周炎组和/或CHD组显著高于健康对照组;排除血压和BMI混杂作用后,各组间粘附分子水平差异仍具统计学意义(P<0.05)。结论中重度慢性牙周炎提高血液中ICAM-1、VCAM-1、P-选择素、E-选择素的表达水平,提示其在牙周炎促进CHD发生发展的机制中可能发挥了重要作用。

TAZ在张应力促进人牙周膜细胞骨向分化中的作用

目的:探索PDZ结合基序转录共激活因子(TAZ)参与张应力促进间充质干细胞(MSCs)骨向分化的调控作用及分子机制。方法:原代培养人牙周膜细胞(hPDLCs)。利用Flexcell系统对hPDLCs体外加载12%,0.5 Hz张应力,实时荧光定量PCR及Western blot检测hPDLCs中TAZ及成骨标志物核心结合因子α1(Cbfα1)、I型胶原(COL I)、骨钙素(OCN)、锌指结构转录因子(OSX)的表达变化;蛋白质免疫共沉淀检测TAZ与Cbfα1的结合情况。结果:加载12%,0.5 Hz张应力24 h及48 h时显著促进hPDLCs的TAZ、Cbfα1、COL I、OSX、OCN mRNA及蛋白表达水平(P<0.05)。蛋白质免疫共沉淀证实TAZ与Cbfα1的结合量显著增加。hPDLCs转染TAZ siRNA 72 h,加载12%,0.5 Hz张应力24 h,TAZ蛋白水平及张应力所促进的细胞成骨蛋白表达下降。结论:张应力作用下TAZ通过上调Cbfα1的表达与转录活性诱导hPDLCs骨向分化。

Hippo信号通路调节牙周膜干细胞生物学行为的研究进展

牙周膜干细胞(PDLSCs)因其多功能性与高增殖性,已成为目前广受关注的牙周组织工程应用的种子细胞,有望在牙周组织改建和再生的临床应用方面发挥实际作用。Hippo信号通路是一条进化上高度保守的激酶链,大量研究证实其在调控器官发育、组织再生、细胞稳态中发挥重要作用。同时,越来越多的证据在分子水平及细胞层面上证实,Hippo信号通路影响PDLSCs的分化及增殖-凋亡平衡。笔者总结了目前报道的Hippo信号通路相关组分对PDLSCs增殖、凋亡、衰老及成骨分化等生物学行为的调控作用,并着重探讨关键效应因子YAP在其中的调控机制,为牙周再生的基础研究与临床应用提供新思路。

牙龈卟啉单胞菌感染对血管内皮细胞与单核细胞黏附的影响

目的:研究Pg感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与单核细胞黏附的影响。方法:建立Pg感染HUVEC细胞株EA.hy926的体外模型,虎红染色法观察Pg381和Pg33277菌株感染HUVEC 6 h和24 h后,HUVEC与人单核细胞株THP-1细胞黏附量的变化。结果:培养6 h时Pg381感染组的THP-1细胞黏附量相对值为0.210±0.025,高于Pg33277感染组(0.078±0.024,P<0.05)和空白对照组(0.062±0.022,P<0.05),Pg33277感染组和空白对照组无差异。24 h时3组间无差异(P>0.05)。结论:Pg381感染HUVEC后能显著促进其与单核细胞的黏附。

LPS刺激单核巨噬细胞培养上清对成骨细胞OPG/RANKL的影响

目的 :观察经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞MC3T3-E1 OPG/RANKL表达的影响。方法:收集经100 ng/m L Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后的上清,以不同稀释浓度(10%、20%、30%、40%和50%)的培养上清作用于MC3T3-E1 24h,分别通过RT-PCR、免疫印迹法(Western blotting)检测细胞OPG/RANKL基因和蛋白水平表达的变化,采用SPSS17.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:MC3T3-E1经不同稀释浓度的培养上清刺激后,其OPGm RNA及蛋白表达随浓度的增加而显著减少(P<0.05),而RANKLm RNA及蛋白表达随浓度的增加显著增加(P<0.05)。结论:Pg-LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清可通过抑制成骨细胞OPGm RNA及蛋白的表达,增加RANKLm RNA及蛋白的表达而抑制其成骨能力,且与浓度呈一定的正相关。

富血小板血浆对脂肪干细胞体外增殖及成脂分化的影响

目的:研究不同体积分数富血小板血浆(PRP)对脂肪干细胞(ASCs)体外增殖及成脂分化的影响。方法:采用酶消化组织块法分离培养ASCs,有限稀释法克隆纯化,检测细胞表面标志物并进行鉴定。改良两步离心法从人全血中制备PRP。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测在培养基中分别添加不同体积分数(0、10%、20%、30%)PRP对ASCs增殖的影响。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测在成脂诱导培养基中添加不同体积分数PRP对ASCs成脂分化相关基因过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、脂肪分化相关蛋白(adipophilin)表达的影响。结果:CCK-8结果显示,培养基中添加PRP显著促进了ASCs的增殖(P<0.01);与10%PRP相比,20%PRP或30%PRP更好地促进了ASCs的增殖(P<0.01),而20%PRP与30%PRP相比,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示,成脂诱导培养基中添加PRP时,PPARγ、LPL、adipophilin表达均明显升高(P<0.05),而加入PRP的体积分数为10%、20%、30%时,对PPARγ、adipophilin表达的影响差异无统计学意义(P>0.05),以20%PRP对LPL表达的促进作用最为明显(P<0.01)。结论:PRP可以促进ASCs体外增殖及成脂分化,对脂肪组织再生有重要研究价值。

介孔二氧化硅包覆金纳米双锥近红外光响应药物载体的构建及抗菌性能

目的制备介孔二氧化硅包覆金纳米双锥的药物载体,研究其表征、生物相容性、载药性能、近红外光响应性能及抗菌性能。方法运用晶种介导方法合成金纳米双锥,并在其表面包覆介孔二氧化硅,采用扫描电镜、透射电镜和紫外分光光度计对其进行表征,并通过MTT实验检测其生物相容性;观察其米诺环素负载率及近红外光照射对其药物累积释放率的影响。结果成功制备介孔二氧化硅包覆金纳米双锥药物载体,透射电镜下可见无序的孔隙结构,对细胞增殖无明显影响,药物负载率为76.5%,经近红外光照射后药物累积释放量上升41.7%。体外抗菌实验显示显著抑制细菌生长达90%。结论介孔二氧化硅包覆金纳米双锥药物载体具有良好生物相容性、近红外光响应药物释放及抗菌作用,在牙周局部缓控释抗菌中有应用的潜能。

低氧调控大鼠骨髓间充质干细胞OPG/RANKL mRNA的表达

目的:探讨低氧处理对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κb受体活化因子配体(receptor activator of NF-κb ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:采用全骨髓细胞贴壁法分离、培养rBMSCs,应用化学低氧剂氯化钴(CoCl_2)建立低氧模型,分别以0、50、100、200、400μmol/L浓度的CoCl_2孵育细胞,首先采用MTT法检测CoCl_2对细胞增殖的影响;利用实时荧光定量PCR及Western免疫印迹检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达情况。rBMSCs经低氧处理0、12、24、48、72、96 h,实时荧光定量PCR检测OPG、RANKL mRNA的表达。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,200、400μmol/L的CoCl_2抑制rBMSCs增殖(P<0.05),而50、100μmol/L CoCl_2实验组的增殖并未产生显著影响(P>0.05)。在50、100μmol/L CoCl_2实验组,rBMSCs表达HIF-1α的mRNA和蛋白水平均高于对照组,100μmol/L CoCl_2组较50μmol/L CoCl_2组高。100μmol/L CoCl_2孵育12 h时,低氧组和对照组rBMSCs的OPG、RANKL mRNA的表达无变化(P>0.05);24、48、72、96 h时,与常氧组相比,低氧组OPG mRNA表达水平升高,RANKL mRNA表达水平下降,OPG/RANKL的比值显著升高(P<0.05)。结论:100μmol/L CoCl_2低氧处理可通过调控rBMSCs OPG、RANKL mRNA的表达,从而促进成骨分化。

大麻素Ⅱ型受体参与调控低氧微环境下大鼠骨髓间充质干细胞的骨向分化

目的:研究大麻素Ⅱ型受体(CB2)对低氧微环境调控骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化的作用及其调控机制。方法:全骨髓细胞贴壁法分离培养rBMSCs。应用化学低氧剂CoCl2建立低氧模型,实时荧光定量PCR和Western blot检测成骨关键蛋白RUNX2、OCN在基因和蛋白水平的表达,评估骨向分化能力。进一步结合CB2抑制剂AM630探讨CB2在低氧微环境下介导rBMSCs骨向分化中的作用。结果:与对照组比,低氧处理24、48、72、96h后rBMSCs的RUNX2、OCN mRNA和蛋白表达量显著上升(P<0.05);同时低氧处理上调CB2 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。CB2抑制剂AM630下调低氧所促进的RUNX2、OCN的表达(P<0.05)。结论:CB2参与低氧促进rBMSCs的成骨分化的调控。