miR-16-5p对食管鳞癌的诊断价值和作用机制研究

目的探讨miR-16-5p在食管鳞癌患者血清和健康人群血清中的表达差异,分析其对食管鳞癌的诊断价值和作用机制。方法通过基因表达汇编(GEO)数据库探寻食管鳞癌患者和健康人群血清中差异表达的miRNA;通过qRT-PCR实验对浙江省台州医院2015年9月至2019年6月的35例食管鳞癌患者的血清与健康人群血清中的miR-16-5p进行检测和分析,并通过ROC曲线评估miR-16-5p对食管鳞癌的诊断效能;下载癌症基因组图谱(TCGA)数据分析miR-16-5p在食管鳞癌组织中的表达,分析其作用机制。结果GEO数据集数据分析结果和qRT-PCR检测结果均显示食管鳞癌患者血清miR-16-5p表达水平明显高于健康人群血清(均P<0.05)。miR-16-5p诊断食管鳞癌的灵敏度为0.7143,特异度为0.8857,此时最佳截断值为1.3351,AUC为0.802(95%CI:0.689~0.887)。TCGA数据分析结果显示食管鳞癌患者癌组织miR-16-5p表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。京都基因与基因百科全书(KEGG)富集结果显示,miR-16-5p的靶基因显著富集于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)、p53、Hippo等多条肿瘤相关信号通路(P<0.05)。基因本体论(GO)富集结果显示,miR-16-5p的靶基因显著富集于翻译、结合蛋白、细胞黏附等(P<0.05)。结论miR-16-5p在食管鳞癌患者血清和癌组织中均表达上调,或可作为食管鳞癌辅助诊断的生物标志物。miR-16-5p可能通过调控翻译、结合蛋白、细胞黏附从而影响食管鳞癌的发生、发展,多条肿瘤相关信号通路或参与该过程。

1个复合杂合突变导致的凝血因子Ⅺ缺陷症家系表型及基因型分析

目的研究1个遗传性凝血因子(F)Ⅺ缺陷症家系的表型和基因型,探讨其分子致病机制。方法抽取先证者及家系(共3代8人)外周血,分离上层血浆,检测凝血相关指标;采用聚合酶链反应(PCR)扩增F11基因的13个外显子及5'端非翻译区,测序分析发现突变位点后采用反向测序验证。采用生物信息学软件(PolyPhen-2、Mutation Taster和SIFT)分析突变位点对蛋白质的影响。结果先证者活化部分凝血活酶时间(APTT)为162 s,FⅪ活性(FⅪ∶C)为2%,FⅪ抗原(FⅪ∶Ag)为3.6%,其父亲、母亲、姐姐及儿子APTT均明显延长,FⅪ∶C和FⅪ∶Ag均明显下降。先证者F11基因存在cDNA.1640G>A和cDNA.2183G>A复合杂合突变,分别来自于父亲和母亲。生物信息学软件预测结果表明,该突变可影响蛋白质功能并导致相应疾病的发生。结论F11基因存在cDNA.1640G>A和cDNA.2183G>A复合杂合突变,可能是导致患者FⅪ∶C下降的原因。

芒硝外敷联合生长抑素对不完全性粘连性肠梗阻患者炎症性肠黏膜损伤的保护作用

目的探讨芒硝外敷联合生长抑素对不完全性粘连性肠梗阻(adhesive intestinal obstruction,AIO)患者炎症性肠黏膜损伤的保护作用。方法选取2017年1月至2021年4月浙江省台州医院急诊科收治的腹部手术后不完全性AIO患者78例,采用随机数字表法分为对照组和联合组,每组各39例。两组患者均予禁食、持续胃肠减压、预防感染、营养支持及维持电解质及酸碱平衡等基础治疗。对照组予生长抑素针0.1mg皮下注射,8h/次。联合组在对照组基础上予芒硝外敷治疗,两组均连续治疗5d。比较两组治疗后肠功能恢复情况、治疗前后血清炎症因子[超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、白细胞介素-6(interleukin,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]和肠黏膜损伤指标[血清内毒素(serum endotoxin,ET)、肠脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,IFABP)和降钙素原(procalcitonin,PCT)]的变化情况,并评估临床疗效。结果联合组患者腹痛腹胀症状缓解时间、自主排气排便时间及胃管拔除时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗5d后,两组患者血清hs-CRP、IL-6、TNF-α、ET、IFABP和PCT水平较治疗前明显下降,且联合组患者下降幅度更明显,差异均有统计学意义(P<0.05);同时联合组患者临床总有效率(94.87%)明显优于对照组(79.49%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论芒硝外敷联合生长抑素治疗腹部手术后不完全性AIO患者的效果显著,能及早改善临床症状,作用机制可能与其能降低血清炎症因子和肠黏膜损伤指标水平,从而减轻炎症性肠黏膜损伤,保护胃肠功能有关。

miR-196b-5p在食管鳞癌癌组织中的表达及作用机制

目的探讨miR-196b-5p在食管鳞癌癌组织中的表达情况,评估miR-196b-5p作为食管鳞癌潜在生物标志物的可能性,并进一步分析其作用机制。方法收集2015至2019年浙江省台州医院收治的病理学检查确诊为食管鳞癌的24例患者的癌组织及相应癌旁(距离肿瘤≥2 cm)正常组织标本。采用qRT-PCR法检测miR-196b-5p表达水平。ROC曲线评估miR-196b-5p诊断食管鳞癌的效能,并收集癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达汇编(GEO)数据进行验证。进一步比较不同临床特征食管鳞癌患者癌组织中miR-196b-5p表达水平。基于TCGA数据库,通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集方法初步分析miR-196b-5p的相关信号通路。结果qRT-PCR检测结果、TCGA数据库和GEO数据库中食管鳞癌患者癌组织miR-196b-5p表达水平均明显高于癌旁正常组织(均P<0.01)。miR-196b-5p水平诊断食管鳞癌的灵敏度为0.79,特异度为0.92,最佳截断值为1.542,AUC为0.891(95%CI:0.767~0.962)(P<0.01);根据TCGA数据计算,灵敏度为0.86,特异度为0.85,最佳截断值为5.310,AUC为0.832(95%CI:0.748~0.897)(P<0.01);根据GEO数据计算,灵敏度为0.89,特异度为0.96,最佳截断值为0.012,AUC为0.946(95%CI:0.900~0.975)(P<0.01),T3~4期食管鳞癌患者癌组织中miR-196b-5p表达水平高于T1~2期食管鳞癌患者(P<0.05)。食管鳞癌癌组织miR-196b-5p低表达(≤1.898)患者3年生存率为55.3%,明显高于miR-196b-5p高表达(>1.898)患者的0.0%(P<0.05)。KEGG富集结果提示差异基因显著富集于有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、Wnt、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)等多条通路(均P<0.05)。结论食管鳞癌癌组织中miR-196b-5p表达水平明显高于癌旁正常组织,或可作为食管鳞癌筛选的潜在生物标志物。miR-196b-5p可能通过参与调控多条信号通路,在食管鳞癌中起致癌作用。