低温微创冷冻减脂动物模型的构建

目的:探讨建立大鼠皮下脂肪微创冷冻减脂实验的动物模型。方法:将大鼠随机分为低温组(0℃组、-20℃组、-40℃组、-60℃组、-80℃组)以及室温对照组(Control组),利用不同低温干预造成大鼠皮下脂肪局部冷损伤,观察脂肪厚度及病理学改变。结果:超声示各低温组均有不同程度脂肪厚度减少,在无皮肤损伤情况下低温-60℃干预60 s时脂肪厚度减少最为明显(P<0.01)。病理学显示局部冷冻后随着温度的降低,炎症细胞浸润与脂肪细胞破坏愈加明显,在低温-60℃干预60 s 3 d后脂肪组织炎症细胞浸润达到峰值(P<0.01)。与Control组比,-60℃组脂肪组织内NF-κB-p65在第2周时表达明显上升,TGF-β1在第4周时阳性表达明显上升(P<0.01)。-20℃组TUNEL染色细胞凋亡逐渐增多,-60℃组干预60 s3 d后细胞凋亡最明显(P<0.01)。结论:采用低温探针技术在低温-60℃干预60 s条件下,可建立稳定的SD大鼠皮下脂肪微创冷冻减脂模型。

人源性脂肪干细胞对30%体表总面积Ⅲ度烫伤大鼠肺组织炎症反应的影响及其机制初步探讨

目的研究人源性脂肪干细胞(h-ADSCs)对30%体表总面积(TBSA)Ⅲ度烫伤大鼠肺组织炎症反应的作用及机制。方法采用随机数字表法将72只雄性Sprague-Dawley大鼠分为单纯烫伤组和h-ADSCs组,每组各36只。采用沸水水浴法制备30%TBSAⅢ度烫伤模型,烫伤后即刻,h-ADSCs组予尾静脉注射含600万h-ADSCs(总注射量约1 mL),单纯烫伤组予尾静脉注射等体积的等渗NaCl溶液。比较两组大鼠烫伤8 h、1周、2周后肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)信使RNA(mRNA)及其蛋白、核因子κB(NF-κB)P65蛋白、苏木素-伊红(HE)染色评分及肺损伤评分,并在普通光镜下观察肺组织病理变化情况。结果h-ADSCs组大鼠烫伤8 h、1周、2周后肺组织TNF-α(t=2.421、2.626、2.356,P=0.035、0.041、0.032)、IL-6(t=2.514、2.751、2.756,P=0.029、0.031、0.039)、HE染色评分(t=2.869、2.631、2.813,P=0.028、0.031、0.042)和肺损伤评分(t=2.172、3.017、2.698,P=0.033、0.032、0.029)和烫伤1周、2周后NF-κB P65蛋白(t=2.639、2.491,P=0.028、0.037)均明显低于单纯烫伤组同时间点;而烫伤1周、2周后α7nAChR mRNA(t=2.912、2.663,P=0.032、0.046)及其蛋白(t=2.814、2.638,P=0.033、0.032)表达水平均明显高于单纯烫伤组同时间点。伤后8 h,h-ADSC组大鼠肺泡隔增宽,间质血管充血,病变轻于单纯烫伤组。伤后1周,h-ADSCs组大鼠镜下可见肺间隔明显增厚,肺泡腔变窄,伴有炎症细胞浸润。伤后2周,h-ADSCs组大鼠镜下可见肺间隔明显增厚,肺泡腔变窄,伴有大量炎症细胞浸润。结论h-ADSCs能减轻30%TBSAⅢ度烫伤休克大鼠肺组织炎症水平,其机制可能与h-ADSCs能增加α7nAChR的表达和抑制肺组织NF-κB P65的表达有关。