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连翘苷经miR-545-3p/SLC7A11途径诱导鼻咽癌细胞铁死亡
被引量:
2
1
作者
李绍霄
李邦亮
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期1179-1186,共8页
目的探究诱导铁死亡在连翘苷对鼻咽癌发挥抗癌效应中的作用,并研究其可能的作用机制。方法不同浓度连翘苷作用鼻咽癌HNE1细胞后,采用CCK-8法和细胞克隆形成实验分别检测鼻咽癌HNE1细胞活力和克隆形成能力;荧光探针检测鼻咽癌HNE1细胞内...
目的探究诱导铁死亡在连翘苷对鼻咽癌发挥抗癌效应中的作用,并研究其可能的作用机制。方法不同浓度连翘苷作用鼻咽癌HNE1细胞后,采用CCK-8法和细胞克隆形成实验分别检测鼻咽癌HNE1细胞活力和克隆形成能力;荧光探针检测鼻咽癌HNE1细胞内活性氧(ROS)水平,丙二醛(MDA)试剂盒检测鼻咽癌HNE1细胞内脂质过氧化情况;RT-qPCR法检测细胞中miR-545-3p表达,Western Blot实验测定溶质载体家族7成员11(SLC7A11)在鼻咽癌HNE1细胞中的表达水平;通过生物信息学工具分析miR-545-3p的可能靶基因,荧光素酶报告实验测定荧光素酶活性;通过裸鼠皮下肿瘤细胞注射法建立裸鼠鼻咽癌异种移植瘤模型,观察连翘苷(10 mg·kg^(-1))对鼻咽癌异种移植瘤生长的抑制效果;免疫组化检测异种移植瘤中Ki-67和SLC7A11的表达。结果连翘苷可明显抑制体外HNE1细胞活力(P<0.001),抑制细胞克隆形成能力(P<0.001),上调ROS和MDA表达水平(P<0.001),上调miR-545-3p表达水平(P<0.001),并下调SLC7A11的表达(P<0.001);通过生物学信息预测相关的靶基因和荧光素酶报告实验验证SLC7A11是miR-545-3p的直接作用靶点;过表达SLC7A11可明显削弱连翘苷对HNE1细胞活力、克隆形成能力以及对ROS和MDA表达的影响(P<0.001,P<0.05,P<0.01);连翘苷(10 mg·kg^(-1))可明显抑制鼻咽癌异种移植瘤生长,并抑制异种移植瘤组织中Ki-67和SLC7A11的阳性表达(P<0.001)。结论连翘苷可抑制体内外鼻咽癌细胞生长,促进鼻咽癌细胞铁死亡,miR-545-3p/SLC7A11信号通路可能是其主要作用机制。
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关键词
连翘苷
鼻咽癌
铁死亡
miR-545-3p
SLC7A11
HNEI细胞
活性氧
小鼠
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职称材料
连翘苷对体内外鼻咽癌血管新生的影响
被引量:
1
2
作者
李绍霄
李邦亮
《广州中医药大学学报》
CAS
2023年第3期693-700,共8页
【目的】观察连翘苷抗鼻咽癌效应及机制。【方法】(1)体外实验:不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)连翘苷作用于体外人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人鼻咽正常上皮细胞系NP69和鼻咽癌细胞系HNE1和SUNE-1后,采用细胞计数试剂盒8(CCK...
【目的】观察连翘苷抗鼻咽癌效应及机制。【方法】(1)体外实验:不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)连翘苷作用于体外人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人鼻咽正常上皮细胞系NP69和鼻咽癌细胞系HNE1和SUNE-1后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力,小管形成实验测定HUVECs血管新生活性,Transwell小室实验测定HUVECs侵袭活性,Western Blot法测定HNE1和SUNE-1细胞、HUVECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、Wnt和β-catenin表达水平。(2)体内实验:以连翘苷(10 mg/kg)对鼻咽癌异种移植瘤裸鼠进行干预后,采用血管造影法检测裸鼠鼻咽癌异种移植瘤的血管密度,免疫组织化学法检测鼻咽癌异种移植瘤中CD34、VEGFA和Wnt的表达。【结果】(1)连翘苷(0.625~10μmol/L)对体外HNE1和SUNE-1细胞活力有显著抑制效果,但对体外HUVECs和NP69的细胞活力无显著抑制效果;连翘苷(0.625~10μmol/L)可明显抑制HUVECs血管新生和侵袭活性,VEGFA(20μg/L)可削弱连翘苷对体外HUVECs血管新生和侵袭活性的抑制作用;连翘苷可下调VEGFA、Wnt和β-catenin在HNE1和SUNE-1细胞中的含量;连翘苷可诱导HUVECs中VEGFR2表达下调。(2)连翘苷(10 mg/kg)对裸鼠无明显毒副作用,但可显著抑制鼻咽癌异种移植瘤生长和血管新生,抑制鼻咽癌异种移植瘤组织中的CD34、VEGFA和Wnt的阳性表达。【结论】连翘苷对体内外鼻咽癌血管新生有显著抑制作用,其主要作用机制可能与调控Wnt/β-catenin/VEGFA/VEGFR2信号通路有关。
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关键词
连翘苷
鼻咽癌
血管新生
Wnt/β-catenin/血管内皮生长因子A(VEGFA)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路
HNE1细胞
SUNE-1细胞
裸鼠
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职称材料
负载紫杉醇的温敏水凝胶对鼻咽癌的抑制作用
3
作者
孙海力
叶纪拓
+1 位作者
李绍霄
吴秀
《广州中医药大学学报》
CAS
2023年第9期2313-2320,共8页
【目的】制备负载紫杉醇(PTX)的壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)温敏水凝胶,表征其理化性质,探讨其对体内外鼻咽癌生长的影响。【方法】在CS/β-GP水凝胶中加入PTX,制备PTX/CS/β-GP水凝胶,扫描电子显微镜观察水凝胶的形态,紫外光谱检...
【目的】制备负载紫杉醇(PTX)的壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)温敏水凝胶,表征其理化性质,探讨其对体内外鼻咽癌生长的影响。【方法】在CS/β-GP水凝胶中加入PTX,制备PTX/CS/β-GP水凝胶,扫描电子显微镜观察水凝胶的形态,紫外光谱检测水凝胶的低临界转变温度(LCST)和体外释药性能。体外实验:细胞计数试剂盒(CCK)-8法测定CS/β-GP水凝胶与PTX/CS/β-GP水凝胶对鼻咽癌HNE1细胞活力的影响,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)法检测细胞凋亡。体内实验:采用人HNE1细胞皮下注射法建立鼻咽癌移植瘤裸鼠模型,观察PTX和PTX/CS/β-GP水凝胶对移植瘤生长的抑制效果,免疫组织化学法检测移植瘤中Ki-67的表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡。【结果】制备的PTX/CS/β-GP水凝胶呈现规整的三维网络结构、良好的温敏性和药物缓释性能。CS/β-GP水凝胶对HNE1活力无明显抑制作用,PTX/CS/β-GP水凝胶可显著抑制HNE1细胞生长,并促进细胞凋亡。PTX/CS/β-GP水凝胶可显著抑制鼻咽癌移植瘤生长,其抗癌效应优于相同剂量的游离PTX。PTX/CS/β-GP水凝胶可抑制移植瘤组织中Ki-67的阳性表达,并促进TUNEL阳性细胞增多。【结论】CS/β-GP温敏水凝胶具有稳定的理化性质和良好的组织相容性,与游离PTX相比,PTX/CS/β-GP温敏水凝胶具有较低的细胞毒性和更好的抗癌效果,可以作为鼻咽癌治疗的候选药物负载系统。
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关键词
紫杉醇
鼻咽癌
壳聚糖
β-甘油磷酸钠
水凝胶
HNE1细胞
裸鼠
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职称材料
miR-19a在鼻咽癌细胞上皮间质转化中的作用
被引量:
1
4
作者
孙海力
林文巧
+1 位作者
李绍霄
陈恩就
《浙江中西医结合杂志》
2022年第3期207-212,共6页
目的研究微小RNA-19a(miR-19a)在鼻咽癌细胞中的表达以及对体外鼻咽癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用。方法利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-19a在鼻咽癌细胞株CNE2、SUNE-1、HNE1、58F及人正常鼻咽上皮细胞株NP69中的转录水平;使...
目的研究微小RNA-19a(miR-19a)在鼻咽癌细胞中的表达以及对体外鼻咽癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用。方法利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-19a在鼻咽癌细胞株CNE2、SUNE-1、HNE1、58F及人正常鼻咽上皮细胞株NP69中的转录水平;使用miR-19a模拟物(miR-19a mimics)、miR-19a抑制剂(miR-19a inhibitor)及其阴性对照瞬时转染体外鼻咽癌细胞;光学显微镜下观察细胞形态;Transwell小室实验检测细胞侵袭;Western blot实验测定E-cadherin、N-cadherin、KRAS、p-FAK和p-SRC的表达;通过生物信息学工具TargetScan研究miR-19a可能靶向调控基因,荧光素酶报告实验测定荧光素酶活性在鼻咽癌细胞中的表达;通过挽救实验验证miR-19a是否直接作用于靶基因从而调控鼻咽癌细胞的EMT行为。结果miR-19a在NP69细胞中的表达水平分别为CNE2、SUNE-1、HNE1和58F细胞的5.88、3.57、11.11和6.67倍,差异均有统计学意义(P<0.01);SUNE-1细胞转染miR-19a mimics促进miR-19a表达后,细胞侵袭能力明显下降[(10.5±2.1)比(25.6±4.4),P<0.01],HNE1细胞转染miR-19a inhibitor抑制miR-19a表达后,细胞侵袭能力明显增强[(34.2±4.9)比(16.9±2.5),P<0.01];通过生物学信息预测相关的靶基因和荧光素酶报告实验验证KRAS是miR-19a的直接作用靶点;mimics NC组、miR-19a mimics组和miR-19a mimics+KRAS mimics组侵袭细胞数分别为(28.3±3.4)、(11.6±1.5)和(23.7±2.8),上调KRAS的表达可部分逆转miR-19a对鼻咽癌细胞侵袭能力的抑制作用(P<0.01);Western blot结果表明,上调miR-19a表达可抑制N-cadherin、p-FAK和p-SRC蛋白表达,上调E-cadherin表达,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞经转染KRAS mimics后,miR-19a mimics对E-cadherin、N-cadherin、p-FAK和p-SRC蛋白表达的调控作用明显被削弱。结论miR-19a可抑制鼻咽癌细胞EMT,该抑癌作用可能是miR-19a通过靶基因KRAS负性调控FAK/SRC信号通路来实现的。
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关键词
鼻咽癌
miR-19a
KRAS
上皮间质转化
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职称材料
题名
连翘苷经miR-545-3p/SLC7A11途径诱导鼻咽癌细胞铁死亡
被引量:
2
1
作者
李绍霄
李邦亮
机构
温州医科大学附属平阳医院耳鼻喉科
温州医科大学
附属
瑞安
医院
耳鼻喉科
出处
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期1179-1186,共8页
基金
2019年度浙江省医药卫生科技计划项目(2019KY676)。
文摘
目的探究诱导铁死亡在连翘苷对鼻咽癌发挥抗癌效应中的作用,并研究其可能的作用机制。方法不同浓度连翘苷作用鼻咽癌HNE1细胞后,采用CCK-8法和细胞克隆形成实验分别检测鼻咽癌HNE1细胞活力和克隆形成能力;荧光探针检测鼻咽癌HNE1细胞内活性氧(ROS)水平,丙二醛(MDA)试剂盒检测鼻咽癌HNE1细胞内脂质过氧化情况;RT-qPCR法检测细胞中miR-545-3p表达,Western Blot实验测定溶质载体家族7成员11(SLC7A11)在鼻咽癌HNE1细胞中的表达水平;通过生物信息学工具分析miR-545-3p的可能靶基因,荧光素酶报告实验测定荧光素酶活性;通过裸鼠皮下肿瘤细胞注射法建立裸鼠鼻咽癌异种移植瘤模型,观察连翘苷(10 mg·kg^(-1))对鼻咽癌异种移植瘤生长的抑制效果;免疫组化检测异种移植瘤中Ki-67和SLC7A11的表达。结果连翘苷可明显抑制体外HNE1细胞活力(P<0.001),抑制细胞克隆形成能力(P<0.001),上调ROS和MDA表达水平(P<0.001),上调miR-545-3p表达水平(P<0.001),并下调SLC7A11的表达(P<0.001);通过生物学信息预测相关的靶基因和荧光素酶报告实验验证SLC7A11是miR-545-3p的直接作用靶点;过表达SLC7A11可明显削弱连翘苷对HNE1细胞活力、克隆形成能力以及对ROS和MDA表达的影响(P<0.001,P<0.05,P<0.01);连翘苷(10 mg·kg^(-1))可明显抑制鼻咽癌异种移植瘤生长,并抑制异种移植瘤组织中Ki-67和SLC7A11的阳性表达(P<0.001)。结论连翘苷可抑制体内外鼻咽癌细胞生长,促进鼻咽癌细胞铁死亡,miR-545-3p/SLC7A11信号通路可能是其主要作用机制。
关键词
连翘苷
鼻咽癌
铁死亡
miR-545-3p
SLC7A11
HNEI细胞
活性氧
小鼠
Keywords
phillyrin
nasopharyngeal cancer
ferroptsis
miR-545-3p
SLC7A1l
HNE1 cells
ROS
mice
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
连翘苷对体内外鼻咽癌血管新生的影响
被引量:
1
2
作者
李绍霄
李邦亮
机构
温州医科大学附属平阳医院耳鼻喉科
温州医科大学
附属
瑞安
医院
耳鼻喉科
出处
《广州中医药大学学报》
CAS
2023年第3期693-700,共8页
基金
2019年度浙江省医药卫生科技计划项目(编号:2019KY398)。
文摘
【目的】观察连翘苷抗鼻咽癌效应及机制。【方法】(1)体外实验:不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)连翘苷作用于体外人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人鼻咽正常上皮细胞系NP69和鼻咽癌细胞系HNE1和SUNE-1后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力,小管形成实验测定HUVECs血管新生活性,Transwell小室实验测定HUVECs侵袭活性,Western Blot法测定HNE1和SUNE-1细胞、HUVECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、Wnt和β-catenin表达水平。(2)体内实验:以连翘苷(10 mg/kg)对鼻咽癌异种移植瘤裸鼠进行干预后,采用血管造影法检测裸鼠鼻咽癌异种移植瘤的血管密度,免疫组织化学法检测鼻咽癌异种移植瘤中CD34、VEGFA和Wnt的表达。【结果】(1)连翘苷(0.625~10μmol/L)对体外HNE1和SUNE-1细胞活力有显著抑制效果,但对体外HUVECs和NP69的细胞活力无显著抑制效果;连翘苷(0.625~10μmol/L)可明显抑制HUVECs血管新生和侵袭活性,VEGFA(20μg/L)可削弱连翘苷对体外HUVECs血管新生和侵袭活性的抑制作用;连翘苷可下调VEGFA、Wnt和β-catenin在HNE1和SUNE-1细胞中的含量;连翘苷可诱导HUVECs中VEGFR2表达下调。(2)连翘苷(10 mg/kg)对裸鼠无明显毒副作用,但可显著抑制鼻咽癌异种移植瘤生长和血管新生,抑制鼻咽癌异种移植瘤组织中的CD34、VEGFA和Wnt的阳性表达。【结论】连翘苷对体内外鼻咽癌血管新生有显著抑制作用,其主要作用机制可能与调控Wnt/β-catenin/VEGFA/VEGFR2信号通路有关。
关键词
连翘苷
鼻咽癌
血管新生
Wnt/β-catenin/血管内皮生长因子A(VEGFA)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路
HNE1细胞
SUNE-1细胞
裸鼠
Keywords
phillyrin
nasopharyngeal cancer
angiogenesis
Wnt/β-catenin/VEGFA/VEGFR2 signaling pathway
HNE1 cells
SUNE-1 cells
nude mice
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
负载紫杉醇的温敏水凝胶对鼻咽癌的抑制作用
3
作者
孙海力
叶纪拓
李绍霄
吴秀
机构
温州医科大学附属平阳医院耳鼻喉科
出处
《广州中医药大学学报》
CAS
2023年第9期2313-2320,共8页
基金
2019年度浙江省医药卫生科技计划项目(编号:2019KY676)。
文摘
【目的】制备负载紫杉醇(PTX)的壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)温敏水凝胶,表征其理化性质,探讨其对体内外鼻咽癌生长的影响。【方法】在CS/β-GP水凝胶中加入PTX,制备PTX/CS/β-GP水凝胶,扫描电子显微镜观察水凝胶的形态,紫外光谱检测水凝胶的低临界转变温度(LCST)和体外释药性能。体外实验:细胞计数试剂盒(CCK)-8法测定CS/β-GP水凝胶与PTX/CS/β-GP水凝胶对鼻咽癌HNE1细胞活力的影响,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)法检测细胞凋亡。体内实验:采用人HNE1细胞皮下注射法建立鼻咽癌移植瘤裸鼠模型,观察PTX和PTX/CS/β-GP水凝胶对移植瘤生长的抑制效果,免疫组织化学法检测移植瘤中Ki-67的表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡。【结果】制备的PTX/CS/β-GP水凝胶呈现规整的三维网络结构、良好的温敏性和药物缓释性能。CS/β-GP水凝胶对HNE1活力无明显抑制作用,PTX/CS/β-GP水凝胶可显著抑制HNE1细胞生长,并促进细胞凋亡。PTX/CS/β-GP水凝胶可显著抑制鼻咽癌移植瘤生长,其抗癌效应优于相同剂量的游离PTX。PTX/CS/β-GP水凝胶可抑制移植瘤组织中Ki-67的阳性表达,并促进TUNEL阳性细胞增多。【结论】CS/β-GP温敏水凝胶具有稳定的理化性质和良好的组织相容性,与游离PTX相比,PTX/CS/β-GP温敏水凝胶具有较低的细胞毒性和更好的抗癌效果,可以作为鼻咽癌治疗的候选药物负载系统。
关键词
紫杉醇
鼻咽癌
壳聚糖
β-甘油磷酸钠
水凝胶
HNE1细胞
裸鼠
Keywords
paclitaxel
nasopharyngeal cancer
chitosan
sodiumβ-glycerophosphate
hydrogel
HNE1 cells
nude mice
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
miR-19a在鼻咽癌细胞上皮间质转化中的作用
被引量:
1
4
作者
孙海力
林文巧
李绍霄
陈恩就
机构
温州医科大学附属平阳医院耳鼻喉科
出处
《浙江中西医结合杂志》
2022年第3期207-212,共6页
文摘
目的研究微小RNA-19a(miR-19a)在鼻咽癌细胞中的表达以及对体外鼻咽癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用。方法利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-19a在鼻咽癌细胞株CNE2、SUNE-1、HNE1、58F及人正常鼻咽上皮细胞株NP69中的转录水平;使用miR-19a模拟物(miR-19a mimics)、miR-19a抑制剂(miR-19a inhibitor)及其阴性对照瞬时转染体外鼻咽癌细胞;光学显微镜下观察细胞形态;Transwell小室实验检测细胞侵袭;Western blot实验测定E-cadherin、N-cadherin、KRAS、p-FAK和p-SRC的表达;通过生物信息学工具TargetScan研究miR-19a可能靶向调控基因,荧光素酶报告实验测定荧光素酶活性在鼻咽癌细胞中的表达;通过挽救实验验证miR-19a是否直接作用于靶基因从而调控鼻咽癌细胞的EMT行为。结果miR-19a在NP69细胞中的表达水平分别为CNE2、SUNE-1、HNE1和58F细胞的5.88、3.57、11.11和6.67倍,差异均有统计学意义(P<0.01);SUNE-1细胞转染miR-19a mimics促进miR-19a表达后,细胞侵袭能力明显下降[(10.5±2.1)比(25.6±4.4),P<0.01],HNE1细胞转染miR-19a inhibitor抑制miR-19a表达后,细胞侵袭能力明显增强[(34.2±4.9)比(16.9±2.5),P<0.01];通过生物学信息预测相关的靶基因和荧光素酶报告实验验证KRAS是miR-19a的直接作用靶点;mimics NC组、miR-19a mimics组和miR-19a mimics+KRAS mimics组侵袭细胞数分别为(28.3±3.4)、(11.6±1.5)和(23.7±2.8),上调KRAS的表达可部分逆转miR-19a对鼻咽癌细胞侵袭能力的抑制作用(P<0.01);Western blot结果表明,上调miR-19a表达可抑制N-cadherin、p-FAK和p-SRC蛋白表达,上调E-cadherin表达,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞经转染KRAS mimics后,miR-19a mimics对E-cadherin、N-cadherin、p-FAK和p-SRC蛋白表达的调控作用明显被削弱。结论miR-19a可抑制鼻咽癌细胞EMT,该抑癌作用可能是miR-19a通过靶基因KRAS负性调控FAK/SRC信号通路来实现的。
关键词
鼻咽癌
miR-19a
KRAS
上皮间质转化
Keywords
Nasopharyngeal cancer
miR-19a
KRAS
EMT
分类号
R739.63 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
连翘苷经miR-545-3p/SLC7A11途径诱导鼻咽癌细胞铁死亡
李绍霄
李邦亮
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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职称材料
2
连翘苷对体内外鼻咽癌血管新生的影响
李绍霄
李邦亮
《广州中医药大学学报》
CAS
2023
1
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职称材料
3
负载紫杉醇的温敏水凝胶对鼻咽癌的抑制作用
孙海力
叶纪拓
李绍霄
吴秀
《广州中医药大学学报》
CAS
2023
0
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职称材料
4
miR-19a在鼻咽癌细胞上皮间质转化中的作用
孙海力
林文巧
李绍霄
陈恩就
《浙江中西医结合杂志》
2022
1
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职称材料
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