肝细胞癌免疫联合治疗研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)在全球范围内的发病率和死亡率有所上升。目前对于失去手术机会的进展期HCC的治疗主要以局部治疗为主,同时联合其他多种治疗手段。近年来以免疫检查点抑制剂为代表的免疫治疗为进展期HCC的治疗提供了新选择。本文就近期HCC采取免疫治疗联合其他治疗方案的进展进行综述。

2023 年第1 版NCCN 肝细胞癌临床实践指南更新解读

美国国家综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)是由32家世界知名癌症中心组成的非营利性联盟组织,致力于促进肿瘤学领域的教育、研究和临床实践。NCCN每年持续更新多种恶性肿瘤的临床实践指南,不仅是美国肿瘤领域临床决策的标准,也已成为全球肿瘤临床实践中应用最为广泛的指南。NCCN肝细胞癌临床实践指南目前更新至2023年第1版,较2022年第5版指南主要在肿瘤的筛查诊断、手术治疗、辅助治疗、局部治疗、系统治疗及分子检测等方面进行更新。本文就新版指南更新内容进行逐一解读。

敲除核因子E2相关因子对肾肌成纤维细胞活化与纤维化的影响

目的:研究敲除核因子E2相关因子(Nrf2)对肾组织中肌成纤维细胞的活化及间质纤维化的影响。方法:将实验小鼠分成Nrf2野生型假手术组、Nrf2野生型单侧输尿管梗阻(UUO)组、Nrf2敲除型假手术组、Nrf2敲除型UUO组4个小组,每组6只。生化分析仪检测血肌酐和尿素氮水平;糖原染色(PAS)观察肾组织损伤程度;Masson染色评价肾间质总胶原累积情况;免疫组织化学染色分析肌成纤维细胞标志物α-SMA、基质成分III型胶原及TGF-β1的表达;RT-q PCR检测TGF-β1 mRNA的表达。结果:与Nrf2野生型假手术组比,Nrf2野生型UUO组血肌酐和尿素氮水平明显升高(P<0.05)。Nrf2敲除型UUO组血肌酐和尿素氮水平与Nrf2野生型UUO组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。PAS染色显示,与Nrf2野生型UUO组相比,Nrf2敲除型UUO组肾组织损伤明显加剧(P<0.01)。Masson染色显示,与Nrf2野生型UUO组相比,Nrf2敲除型UUO组肾间质总胶原累积明显增加(P<0.01)。免疫组织化学染色显示,与Nrf2野生型UUO组相比,Nrf2敲除型UUO组肾组织α-SMA和III型胶原的表达明显增加(P<0.05),而这可能与Nrf2敲除所致的TGF-β1 m RNA和蛋白表达提高有关(P<0.05)。结论:Nrf2敲除可加剧输尿管梗阻引起的肾损伤及纤维化程度,其机制可能为Nrf2敲除通过提高TGF-β1水平,进而促进肌成纤维细胞过度活化和胶原在肾间质的过度累积。

白藜芦醇抑制蛋白激酶B磷酸化缓解大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化

目的探讨白藜芦醇对大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化的影响。方法制备大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,白藜芦醇干预组于手术当天ig给予白藜芦醇20 mg·kg^(-1),术后第7天取其梗阻侧肾脏进行检测。HE和Masson染色分别观察肾组织病理改变和纤维化程度;免疫组织化学染色检测肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。体外分别培养肾小管上皮细胞(NRK-52E)和成纤维细胞(NRK-49F),各分为3组:细胞对照组,转化生长因子β_1(TGF-β_1)5μg·L^(-1)诱导组和TGF-β_15μg·L^(-1)+白藜芦醇10或100 mmol·L^(-1)干预组。细胞免疫荧光染色检测α-SMA、细胞外基质成分(Ⅲ型胶原)和上皮细胞标志物E-钙黏着蛋白的表达;Western蛋白印迹法检测细胞或组织中蛋白激酶B(AKT)磷酸化。结果与假手术组相比,HE染色显示UUO模型组肾间充质面积扩大(P<0.01),Masson染色显示UUO模型组胶原累积明显(P<0.05);白藜芦醇干预组上述改变均被抑制(P<0.05),α-SMA阳性肌成纤维细胞的形成亦被抑制(P<0.05)。体外应用TGF-β_1刺激后,与细胞对照组相比,TGF-β_15μg·L^(-1)诱导组α-SMA表达增加(P<0.01),提示细胞表型转化为肌成纤维细胞数量明显增加,同时伴随着Ⅲ型胶原过度累积(P<0.01);白藜芦醇干预组上述改变被抑制(P<0.05)。进一步研究发现,在肌成纤维细胞产生过程中,AKT磷酸化水平增加(P<0.05);白藜芦醇干预后,体内外AKT磷酸化升高均被抑制(P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过拮抗AKT的磷酸化,抑制TGF-β_1所诱导的NRK-52E和NRK-49F表型转化为肌成纤维细胞,进而减少基质累积,缓解肾纤维化。