FUT2和FUT3基因多态性及其表达与溃疡性结肠炎的关系

目的探讨浙江籍汉族人群FUT2和FUT3基因多态性及Lewis抗原的表达与溃疡性结肠炎(UC)的关系。方法收集485例UC患者和580名正常对照者,采用SNa Pshot技术检测FUT2 rs281377、rs1047781和rs601338及FUT3rs28362459、rs3745635和rs3894326基因多态性。随机选取10例存在乙状结肠炎症的UC患者,另选10例确诊为良性乙状结肠息肉的患者为对照组,采用免疫组织化学法检测并比较乙状结肠中Lewis a和Lewis b抗原的表达水平。结果UC组FUT3 rs3745635突变等位基因(A)和基因型(GA+AA)的频率明显高于对照组(P=0.016,95%CI 1.339~1.699;P=0.038,95%CI 1.330~1.742)。进一步分层分析发现,与远端结肠炎相比,广泛性结肠炎患者中FUT3 rs28362459突变等位基因(G)和基因型(TG+GG)的频率明显降低(P=0.001,95%CI 0.567~0.786;P<0.001,95%CI 0.503~0.742)。广泛性结肠炎患者中FUT3 rs3745635突变等位基因(A)和基因型(GA+AA)频率亦明显低于远端结肠炎患者(P=0.011,95%CI0.621~0.900;P=0.006,95%CI 0.553~0.845)。乙状结肠炎症UC患者和良性乙状结肠息肉对照组Lewis b抗原表达水平无统计学差异(P>0.05),但UC患者乙状结肠隐窝上皮中Lewis a抗原的表达水平明显高于对照组(P=0.028)。结论 FUT3基因多态性及肠道Lewis a抗原表达水平可能与UC相关。

血清同型半胱氨酸、叶酸、维生素B_(12)水平与溃疡性结肠炎的关系

目的分析浙江省汉族人群血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、叶酸、维生素B_(12)(vitamin B_(12),VitB_(12))水平和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)临床特征的相关性。方法纳入186例UC患者和202例性别与年龄相匹配的正常对照者,采用“Truelove&Witts”评分评估UC患者的疾病活动度。应用循环酶法测定Hcy水平,化学发光免疫法测定叶酸、VitB_(12)水平。运用Pearson相关性分析、多元线性回归分析探讨UC患者Hcy水平与“Truelove&Witts”评分、叶酸、VitB_(12)、C反应蛋白、血清白蛋白等实验室指标的关系。采用Logistic回归法评估UC独立危险因素。结果与正常对照组比较,UC组中Hcy水平显著高于正常对照组(13.01±4.02μmol/L vs 10.01±2.40μmol/L,P<0.01),而叶酸、VitB_(12)水平均明显低于正常对照组(5.74±2.64ng/ml vs 7.59±2.21ng/ml,P<0.01;274.49±115.12pg/ml vs 429.85±120.92pg/ml,P<0.01)。UC组中高同型半胱氨酸血症(high homocysteine,HHcy,>15.0μmol/L)和叶酸缺乏(<4.0ng/ml)、VitB_(12)缺乏(<203.0pg/ml)的比例均明显升高(24.19%vs 5.94%,P<0.01;27.96%vs 5.44%,P<0.01;29.57%vs 6.93%,P<0.01),且UC患者中Hcy水平重度>中度>轻度(15.27±4.73μmol/L vs 12.45±3.64μmol/L vs 9.32±2.27μmol/L,P均<0.01),而叶酸、VitB_(12)水平均重度<中度<轻度(4.26±2.89ng/ml vs 6.03±2.50ng/ml vs 7.14±2.37ng/ml,P均<0.01;198.37±98.64pg/ml vs 316.58±134.37pg/ml vs 402.17±130.61pg/ml,P均<0.01)。多因素Logistic回归分析表明,在校正性别和年龄等因素后,UC组中Hcy水平与叶酸、VitB_(12)水平呈独立负相关(β=-0.287,P=0.025;β=-0.267,P=0.032),多因素Logistic回归分析结果显示,叶酸缺乏、VitB_(12)缺乏均为UC的独立危险因素(OR=3.314,P=0.012;OR=7.019,P<0.01)。结论浙江省汉族UC患者中高同型半胱氨酸血症和叶酸、VitB_(12)缺乏的情况可能普遍存在,血清Hcy水平和叶酸、VitB_(12)水平与UC患者疾病严重程度密切相关,叶酸、VitB_(12)缺乏均为UC的独立危险因素。

表达谱芯片和DNA甲基化芯片联合分析筛选克罗恩病发生、发展的分子靶标

目的 通过生物信息学方法筛选与克罗恩病(CD)发病相关的异常甲基化修饰的差异表达基因。方法 从公共基因表达数据库(GEO)下载CD的表达谱芯片GSE102134和DNA甲基化芯片GSE105798。通过R语言软件对CD表达谱芯片进行差异表达分析,同时对CD的DNA甲基化芯片进行差异甲基化位点分析。筛选异常甲基化修饰的差异表达基因进行功能富集分析。STRING数据库和Cytoscape软件共同构建蛋白相互作用网络,筛选CD的核心基因。最后通过GEO数据库GSE75214和GSE186582验证差异基因表达。结果 采用表达谱芯片分析,共筛选出1315个差异表达基因,其中780个表达上调,535个表达下调。CD组与对照组比较,共发现11066个差异甲基化位点,其中8542个高甲基化位点,2524个低甲基化位点。对差异表达基因和差异甲基化基因进行联合分析,找到55个低甲基化修饰下表达上调的基因,和125个高甲基化修饰下表达上调的基因。GO分析表明异常甲基化修饰的差异表达基因与跨膜转运蛋白活性、细胞顶端组成和有机阴离子转运相关。KEGG信号通路主要为PIK/Akt信号通路、黏附斑和ECM-受体相互作用等。STRING和Cytoscape软件筛选信号通路中的关键基因,并在GSE75214和GSE186582芯片集验证差异基因的表达,结果提示COL4A2、COL4A1、PDGFRB和PYY可能在CD中起重要作用。结论COL4A2、COL4A1、PDGFRB和PYY可能是CD疾病诊断和治疗的潜在靶点。

整联蛋白α4和细胞间黏附分子1基因多态性与克罗恩病发病风险及其临床病理特征的相关性

目的探讨整联蛋白α4(ITGA4)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因的多态性与克罗恩病(CD)的发病风险及临床病理特征之间的相关性。方法收集2010年1月至2021年1月于温州医科大学附属第二医院消化内科确诊的215例CD患者及性别、年龄相匹配的529名正常对照者。应用基质辅助激光解吸电离-时间飞行质谱技术检测ITGA4(rs6740847、rs7562325)和ICAM-1(rs5498)的基因型。采用Harvey-Bradshaw指数(HBI)评估CD的疾病活动度,并依据蒙特利尔CD表型分类标准将CD患者分层。采用非条件Logistic回归分析ITGA4(rs6740847、rs7562325)和ICAM-1(rs5498)基因多态性在CD组和正常对照组之间的分布差异及其对CD临床病理特征的影响。结果CD组ITGA4(rs7562325)的变异等位基因(T)和变异基因型(CT+TT)的频率均高于正常对照组(40.70%vs.31.57%,P=0.001;62.79%vs.54.36%,P=0.042)。中重度活动期CD患者ITGA4(rs6740847)的变异等位基因(G)和变异基因型(AG+GG)的频率均低于轻度活动期CD患者(31.18%vs.51.72%,P=0.002;55.91%vs.75.86%,P=0.042);中重度活动期CD患者ICAM-1(rs5498)的变异等位基因(G)和变异基因型(AG+GG)的频率均高于轻度活动期CD患者(31.45%vs.17.24%,P=0.027;54.30%vs.31.04%,P=0.020)。与(回肠末端型+回结肠型)CD患者比较,结肠型CD患者ITGA4(rs6740847)的变异等位基因(G)和变异基因型(AG+GG)的频率显著偏高(55.26%vs.29.38%,P<0.0001;84.21%vs.53.11%,P<0.0001),ICAM-1(rs5498)的变异等位基因(G)和变异基因型(AG+GG)的频率亦显著偏高(42.11%vs.26.84%,P=0.008;73.69%vs.46.33%,P=0.002)。(狭窄型+穿透型)CD患者ICAM-1(rs5498)的纯合变异基因型(GG)频率低于非狭窄非穿透型CD患者(0.00%vs.12.32%,P=0.001)。合并肛周病变的CD患者ITGA4(rs6740847)的变异等位基因(G)和变异基因型(AG+GG)的频率均高于无肛周病变的CD患者(40.28%vs.30.77%,P=0.049;72.22%vs.51.75%,P=0.004)。结论ITGA4(rs7562325)基因变异可能是CD发病的风险因素。ITGA4(rs6740847)基因变异可能与CD疾病活动度降低相关,却可能是结肠受累和肛周病变的风险因素。ICAM-1(rs5498)基因变异可能是CD疾病活动度增加和结肠受累的风险因素,却可能是狭窄或穿透的保护因素。此外,ITGA4(rs6740847)基因变异和ICAM-1(rs5498)基因变异可能均与CD疾病早发相关。

岩藻糖基转移酶3基因多态性及单倍型与炎症性肠病的相关性

目的探讨岩藻糖基转移酶3基因（fucosyltrasferase 3，FUT3）的多态性及单倍型与炎症性肠病的相关性。方法收集389例溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis，UC）患者、274例克罗恩病（Crohn’Sdisease，CD）患者及492名正常对照者，采用直接测序法检测FUT3基因的rs28362459、rs3745635和rs38943263种单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP），并用Haploview4．2软件进行连锁不平衡和单倍型分析。结果UC组和CD组分别与对照组比较，3个SNP位点的等位基因和基因型频率的差异均无统计学意义（P〉0．05）。进一步分层分析发现，远端结肠炎患者FUT3（rs3745635）的突变等位基因（A）和基因型（GA＋AA）频率均显著高于对照组（19．05％VS．13．41％，P〈0．01；33．77％VS．25．20％，P〈0．05）。在回肠受累（回肠型＋回结肠型）的CD患者中，FUT3（rs28362459）的突变等位基因（G）和基因型（TG＋GG）以及rs3745635的突变等位基因（A）的频率亦均高于对照组（30．35％弧23．58％，P〈0．05；53．18％vs．41．67％，P〈0．01；18．21％735．13．41％，P〈0．05）。此外，狭窄型CD患者rs28362459的突变等位基因（G）频率高于对照组（32．28％％23．58％，Pd0．05）。经Haploview4．2软件分析发现，3个SNP位点存在紧密连锁[rs3894326／rs3745635（D’=1．0，r^2=0．017）；rs3894326／rs28362459（D’=0．937，r^2=0．311），rs3745635／rs28362459（D’-0．944，r^2=0．448）]，但UC组、CD组分别与对照组比较，各单倍型的频率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论FUT3基因rs3745635位点的突变可能增加远端结肠炎的发病风险。rs28362459和rs3745635位点的突变可能增加回肠型和回结肠型CD的发病风险，且rs28362459位点的突变还可能与狭窄型CD的发病相关。

哮喘家庭授权管理项目对哮喘患儿家庭功能及哮喘症状的影响

目的探讨哮喘家庭授权管理项目对哮喘患儿家庭功能及哮喘症状的影响。方法选择2017年7月—2018年12月进入杭州市儿童医院留观室的90例哮喘患儿家庭,按照随机数字表法分为观察组(44例)和对照组(46例)。对照组患者由儿科专科护士对患儿家庭进行常规的自我管理指导和健康教育,观察组患者则采用哮喘家庭授权管理项目进行干预。在干预前(哮喘患儿及家属进入观察室内就诊时)和干预结束后(干预的第6周)采用父母压力指数(PSI)量表、家庭环境量表(FES)、哮喘严重度评分表对结局指标进行评价。结果观察组PSI量表总分、哮喘状态得分均低于对照组,FES各维度得分均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘家庭授权管理项目有利于降低父母压力指数,提高功能状态,并改善其哮喘症状。