沉默信息调节因子3在丹酚酸A抗紫外线诱导视网膜色素上皮细胞氧化应激性损伤中的作用及机制

目的:探讨SIRT3在丹酚酸A(Sal A)抗紫外线诱导视网膜色素上皮细胞损伤中的作用及其机制。方法:将ARPE-19细胞分为对照(Sal A)组、UV组、Sal A+UV组、Sal A+UV+阴性si-RNA组、Sal A+UV+si-SIRT3组,UV照射剂量为30 mJ/cm^2,Sal A浓度为50 μmol/L,采用MTT法检测细胞存活,DCFH-DA法分析细胞内ROS水平,Cu Zn/Mn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)检测SOD2活性,Western blot分析SIRT3、SOD2、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase3、Cyt c的表达,RT-qPCR法检测细胞内SIRT3和SOD2的mRNA表达情况。结果:UV处理后,ARPE-19细胞内SIRT3蛋白和mRNA表达量降低,经5、25、50 μmol/L预处理后,SIRT3表达量明显增加。与对照组相比,UV组细胞凋亡率,ROS含量,Bax、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。与UV组相比,Sal A+UV组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显降低,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显增加。与Sal A+UV相比,Sal A+UV+si-SIRT3组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。结论:Sal A可增加SIRT3的表达,恢复SOD2活性,降低UV诱导细胞损伤作用。

兔眼结膜下注射雷珠单克隆抗体的视网膜渗透研究

目的探讨兔眼结膜下注射雷珠单克隆抗体（ranibizumab）是否可以渗透进入视网膜。方法实验研究。56只新西兰大白兔随机分为4个组：空白对照组（3只）、结膜下注射生理盐水组（3只）、结膜下注射雷珠单克隆抗体组（25只）及玻璃体腔注射雷珠单克隆抗体组（25只），均取右眼进行注射。在注射后1、2、4、8、12周时分别用ELISA和免疫荧光的方法检测兔眼房水中的药物浓度和视网膜中的药物定位情况。药物浓度数据的比较采用t检验。结果玻璃体腔注射雷珠单克隆抗体组注射后1、2、4、8、12周房水中药物浓度分别为（389．67±22．55）、（319．33～17．93）、（22．67~3．06）、（9．67_＋1．53）、（7．33~2．18）mg／L。结膜下注射雷珠单克隆抗体组注射后1、2、4、8周房水中药物浓度分别为（53．67～3．21）、（12．67～3．06）、（8．33～1．53）、（2．66～2．08）mg／L，各时间点药物浓度均与玻璃体腔注射组有统计学差异（t=32．96，38．39，7．67，11．07，P〈0．05）；12周时房水中未检测到雷珠单克隆抗体。视网膜免疫荧光检查结果与上述结果类似，在结膜下注射组中，只有12周时检测不到雷珠单克隆抗体的阳性信号。结论雷珠单克隆抗体可以通过结膜下注射的给药方式渗透至视网膜。