用磁捕法快速分离HCV-mRNA

目的 :寻找一种操作简便、快速、敏感性高、重复性好且特异性强的RNA分离纯化方法。方法 :磁捕法是用亲和素包被的磁珠交联带有生物素标记的丙型肝炎病毒 (HCV)寡核苷酸探针 ,与血清HCV mRNA(以异硫氰酸胍作裂解液 )特异性结合 ,经洗涤分离纯化HCV mRNA模板 ,作逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,用于检测HCV患者血清。并用蛋白酶K消化法作对照。结果 :磁捕法检测抗 HCV阳性肝病患者血清5 0例 ,HCV RNA阳性 34例 (6 8% ) ,对 34例阳性标本 ,用蛋白酶K消化法提取HCV mRNA检测HCV ,结果HCVRNA阳性仅 2 8例。结论 :磁捕法分离HCV mRNA具有操作简便、快速。