产前无创基因检测在胎儿性染色体非整倍体疾病筛查中的临床价值

目的:探讨产前无创基因检测(NIPT)在胎儿性染色体非整倍体疾病(SCAs)筛查中的应用价值。方法:选取2018年1月至2019年12月在温州市中心医院行NIPT普通三项或NIPT PLUS的单活胎孕妇27116例为研究对象,其中NIPT普通三项有15218例,NIPT PLUS有11948例。利用高通量基因组测序平台及生物信息分析技术,对孕妇外周血中胎儿游离DNA进行深度测序,获取胎儿染色体信息。对检测结果高风险者进行遗传咨询,知情同意后行羊膜腔穿刺及羊水染色体核型分析。结果:NIPT普通三项共检测出SCAs 125例,阳性率为0.82%(125/15218),70例经羊水产前诊断证实阳性17例,阳性预测值24.29%(17/70)。NIPT PLUS共检测出SCAs 97例,阳性率为0.81%(97/11948),70例经羊水产前诊断证实阳性29例,阳性预测值41.43%(29/70)。结论:NIPT可作为胎儿SCAs的筛查方法,具有较高的临床应用价值。与NIPT普通三项相比,NIPT PLUS显著提高胎儿SCAs的检测效能。对于NIPT或NIPT PLUS结果高风险者必须进行侵入性产前诊断,对于结果低风险者应警惕漏诊可能。

温州地区2743例育龄女性MTHFR C677T基因多态性分析

目的 分析温州地区育龄女性亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C667T基因多态性及其地区遗传分布特征,为临床科学指导育龄女性补充叶酸提供遗传依据。方法 选取2021年8月至2023年11月到温州市中心医院产科门诊进行孕前及孕期检查的温州地区育龄女性2743例,采用实时荧光定量PCR技术测定MTHFR C677T基因位点多态性。统计出MTHFRC677T基因多态性的基因型频率与等位基因频率,将温州地区育龄女性与文献报道的其他地区数据进行比较分析。结果 2743例育龄女性检测到MTHFR C677T基因多态性CC、CT及TT基因型频率分别为41.2%、43.9%和14.8%,等位基因C和T分别为63.2%和36.8%。与已报道四川省、贵州省贵阳市、江西省及浙江省绍兴市等地育龄女性相比差异无统计学意义,与广西壮族自治区南宁市、安徽省、浙江省杭州市、福建省莆田市、上海市、河北省廊坊市、江苏省苏州市、河南省郑州市、西藏自治区昌都市、河北省张家口市及湖北省武汉市相比则差异有统计学意义(P<0.05)。结论 温州地区育龄女性MTHFR C677T基因多态性分布具有地域特性。大约58.8%的育龄女性具有叶酸代谢障碍风险(CT型和TT型)。MTHFR基因突变检测可指导该地区育龄女性合理补充叶酸。

4943例高危孕妇羊水细胞遗传学分析

目的:探讨高危孕妇不同产前诊断指征与羊水细胞异常核型发生频率及类型的关系。方法:回顾性分析4943例因不同高危因素在温州市中心医院行产前诊断的孕妇临床病例资料。结果:检出异常核型182例,异常检出率为3.68%。无创DNA高风险组异常率最高(为90.47%),另有12例因无创DNA提示性染色体异常行羊水穿刺后提示异常率为75.00%,超声异常组的异常率为7.61%,高龄组异常率为3.43%,唐氏筛查21-三体高风险组异常率为3.09%,唐氏筛查18-三体高风险组异常率为2.28%,不良孕产史组异常率为0.37%。无创DNA高风险组的染色体异常率最高,其次是超声异常组。结论:无创DNA不能完全代替羊水细胞核型分析,羊水细胞核型分析仍是检测胎儿染色体异常的金标准;高龄孕妇胎儿染色体容易突变,建议直接行产前诊断,对有超声异常或者高龄者建议加做基因芯片。

浙南地区乐清市非综合征型耳聋患者的致聋基因突变研究

目的探讨浙南地区乐清市非综合征型耳聋患者致聋基因的突变特征。方法收集乐清籍非综合型耳聋患者319例,采用耳聋基因芯片检测患者GJB2、GJB3、SLC26A4以及线粒体12SrRNA等4个基因9种热点突变,对基因芯片检出的23例GJB2基因单杂合突变患者行Sanger测序,对基因芯片检出的10例SLC26A4基因杂合突变患者行多重连接酶反应检测技术检测。结果319例耳聋患者中,共检出基因突变患者128例(40.13%)。共检出GJB2基因突变58例(18.18%),其中双等位基因突变49例,杂合突变9例。检出SLC26A4基因突变12例(3.76%),其中双等位基因突变6例,c.919-2A>G杂合突变3例,c.919-2A>G杂合突变复合线粒体12SrRNA基因m.1555A>G突变2例,c.919-2A>G杂合突变复合GJB2基因c.109G>A纯合突变1例。线粒体12SrRNA基因m.1555A>G突变60例(18.81%),其中1例复合基因GJB3基因c.538C>T杂合突变;线粒体12SrRNA基因m.1494C>T突变1例(0.31%)。本研究共检出7种GJB2基因突变、4种SLC26A4基因突变、1种GJB3基因突变以及2种线粒体DNA突变。结论与我国其他区域耳聋群体基因图谱不同,线粒体12SrRNA基因m.1555A>G突变是浙南地区乐清市非综合征型耳聋患者的首要致聋因素,耳聋基因检测及慎用耳毒性致聋药物的宣传是本地区耳聋精准防控的主要内容。

一例Shwachman-Diamond综合征的产前诊断

目的本研究对SBDS基因(Shwachman-Bodian-Diamond syndrome gene)c.183184delTAinsCT和c.258+2T>C复合杂合变异导致的Shwachman-Diamond综合征(Shwachman-Diamond syndrome,SDS)家系的1位中期妊娠妇女行产前分子诊断,从而预防SDS患儿的出生。方法孕妇于18孕周在B超引导下行羊膜腔穿刺,抽取羊水10mL,提取羊水细胞基因组DNA。选用17个多态性STR位点,包括D13S317、D7S820、D18S51等,排除母源污染。在此基础上,对SBDS基因2-4号外显子进行扩增,纯化后的PCR产物基因SBDS基因2号外显子正、反向测序。结果该胎儿SBDS基因2号外显子测序结果显示胎儿只携带了与母亲相同的SBDS基因变异位点,未携带与父亲相同的SBDS基因变异位点。结论对SBDS基因而言,该家系的待测胎儿为SBDS基因c.183184delTAinsCT杂合变异携带者。

脐动脉血采集时间及方法对血气分析结果的影响

目的观察脐动脉血气标本采集时间及采集方法对血气分析结果的影响,以建立规范化的脐动脉血气标本采集程序。方法选取2018年1月至2019年4月该院单活胎足月正常新生儿208例,按断脐与否及采集时间分为四组:未断脐即刻采集59例,未断脐45~60s内采集49例,断脐后即刻采集52例,断脐后45~60s内采集48例。对新生儿脐带血行血气分析,包括pH、二氧化碳分压(PaCO2)、氧分压(PaO2)、碱剩余(BE)、血氧饱和度。结果四组pH、PaCO2、PaO2、BE、氧饱和度检测结果接近,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿出生后60s内采集脐带血,断脐与否、采集时间不同对血气分析结果未有明显影响。医护人员应依据产时产后母儿情况个体化采取采血方法,以提高采血成功率。

GJB2基因p.V37I突变致病性及家系临床表型分析

目的探讨GJB2基因突变耳聋家系p.V37I(c.109G>A)突变致病性及分析家系患者临床表型。方法收集6个GJB2基因p.V37I(c.109G>A)突变耳聋患者及家系的临床资料及外周血样本,运用PCR产物直接测序技术对家系耳聋患者进行GJB2、GJB3基因编码区、SLC26A4基因外显子7和8、以及线粒体m.1494C>T、m.1555A>G位点检测分析,另对家系5先证者行高通量全外显子序列检测。结果 6个家系均检出GJB2基因p.V37I突变,其中家系3、5为纯合突变,家系1、2、6先证者另复合GJB2基因c.235del C杂合突变,家系4患者另检出c.299-300del AT杂合突变;全部家系均未检出GJB3基因编码区、SLC26A4基因外显子7和8、以及线粒体m.1494C>T、m.1555A>G位点突变,家系5先证者高通量全外显子序列检测结果亦提示GJB2基因p.V37I纯合突变为其致聋原因。结论 GJB2基因p.V37I突变具有一定致病性,该位点纯合突变可导致轻度至中度听力损失,而p.V37I突变复合c.299-300del AT、c.235del C杂合突变可导致中度至重度感音神经性耳聋。

425例胎儿畸形治疗性引产的临床分析

目的了解胎儿畸形的发生率、发生顺位,探讨胎儿畸形发生的相关因素,为预防胎儿畸形的临床咨询提供依据。方法回顾分析2017年1月至12月份在本院因胎儿畸形而引产的425例孕妇的病历资料,同时随机抽取425例于同期分娩正常新生儿的产妇为对照组,通过出生缺陷报告卡和电话随访获得相关信息进行统计分析。结果 425例胎儿畸形引产中超声异常为254例,占59.76%,染色体异常为132例,占31.05%,超声及染色体均异常为37例,占8.7%,另有两例因中重度地中海贫血引产。在染色体异常的孕妇中,≥40岁的孕妇异常率最高10.10%,≥35~40岁的孕妇异常率次之2.58%,不同年龄段之间差异具有统计学意义(P<0.05)。病例组与对照组在高龄、服用叶酸、不良孕产史、不良工作环境、吸烟及是否正规产检方面的差异具有统计学意义。胎儿超声畸形中以多系统畸形比例最高,中枢神经系统畸形居第二位,心脏畸形居第三位。结论高龄是胎儿染色体异常的高危因素,不良孕产史、吸烟、高龄及不良工作环境是胎儿出生缺陷的高危因素。要重视出生缺陷的一级预防,孕早期服用叶酸,正规产前检查,及早发现胎儿畸形,适时选择性终止妊娠,避免给社会和家庭造成严重的负担。

GJB2基因显性突变致聋家系的基因检测与临床表型分析

目的对两个常染色体显性遗传耳聋家系进行临床表型分析及基因突变检测,并对有生育需求的耳聋家系进行产前诊断。方法收集两个耳聋家系成员外周血样本及临床资料,运用PCR产物直接测序技术对家系所有成员进行GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体12SrRNA4个耳聋相关基因检测,明确耳聋致病突变;结合STR位点分析方法排除产前诊断中胎儿DNA受母体基因组的污染。结果家系1先证者为GJB2 c.34G>T杂合突变,临床表型为先天性进展性的的极重度性感音神经性耳聋;妻子为线粒体m.1555A>G突变,其子为GJB2c.34G>T杂合突变复合线粒体m.1555A>G突变。家系2先证者为GJB2c.187G>T杂合突变,临床表型同为先天性进展性的的极重度性感音神经性耳聋;丈夫为c.109G>A/c.235delC复合杂合突变,产前诊断结果显示胎儿为c.235delC杂合突变携带者。结论 c.187G>T和c.34G>T同为GJB2基因上的显性突变,两种突变均可导致进展性的中度至极重度性感音神经耳聋;本研究的GJB2 c.34G>T复合线粒体m.1555A>G突变为临床的双基因致聋模式提供了遗传学理论基础。