肺癌患者MTHFR基因多态性与抑癌基因过甲基化的关系

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与肺癌易感性及抑癌基因甲基化的关系。方法采用病例对照研究的方法 ,以限制性片段长度多态性方法 ,检测了93例肺癌患者及106例对照的MTHFRC677T基因型;用巢式甲基化特异性PCR(nMSP)法检测肺癌患者外周血血清中p16及MG-MT基因的甲基化。结果 MTHFRC677TC/C,C/T,T/T基因型分布频率在病例组中分别为:29%、49.5%、21.5%,在对照组中分别为:36%、51%、19%,频率分布差异无统计学意义。病例组中p16甲基化检出率为68%(63/93),MGMT甲基化检出率为52%(48/93)。各基因型之间的p16与MGMT基因甲基化阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MTHFR基因C677T多态性与肺癌发生之间未发现相关,MTHFR变异基因型(C/T,T/T)并非导致p16与MGMT基因甲基化的直接原因。

飞行质谱法测定血清脑硫苷脂

目的建立基质辅助的激光解吸附离子化-飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)测定血清脑硫苷脂的方法,并探讨人血清参考范围。方法经去蛋白、各种条件的高温皂化、萃取、干燥后的血清,用不同浓度的过滤溶剂在MonoTip C18洗脱管中过滤杂质,以桂皮酸为基质,在飞行质谱仪上点样测定。在优化后的条件下测定方法的线性范围、回收率与人血清参考范围。结果用90%甲醇配制的浓度0.1mol/LNaOH在150℃皂化25min、用体积比6∶4的蒸馏水与甲醇在MonoTip C18管过滤杂质效果最好。方法线性范围为浓度0～20nmol/ml,回收率为73.7%～75.5%,40例健康人血清参考范围:浓度(8.2±1.5)nmol/ml,男女间差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过飞行质谱仪测定血清脑硫苷脂的含量,具有较高的准确性和线性范围。

检测血清半乳甘露聚糖对肾移植术后侵袭性肺曲霉病的诊断价值

目的探讨检测血清曲霉半乳甘露聚糖(GM)抗原对肾移植术后侵袭性肺曲霉病的诊断价值。方法对31例肾移植术后合并肺部感染且对广谱抗生素治疗效果不佳的患者,每周采集血液标本2次进行GM试验,共测定标本92份。GM检测采用双夹心酶联免疫吸附法。对GM试验阳性的患者给予伊曲康唑或伏立康唑抢先抗曲霉治疗。结果31例患者中11例GM试验阳性(35.5%)。GM阳性的11例中,7例确诊为侵袭性肺曲霉病。9例GM试验阳性的患者完成针对曲霉病的抢先治疗,7例有效,2例无效死亡。结论检测血清GM抗原可作为早期诊断肾移植术后侵袭性肺曲霉病的一种有效方法。

HPLC法测定妇外洗剂中蛇床子素的含量

目的建立HPLC法测定妇外洗剂中蛇床子素含量的方法。方法采用SB-C18分析柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-水(65∶35),检测波长∶322nm。结果蛇床子素在0.015μg-0.27μg范围内线性关系良好(r=0.9993),平均回收率为97.65%,RSD为1.20%。结论本法操作简便、灵敏、准确,可用于妇外洗剂的质量控制。

辅导员队伍建设机制探微

随着高校辅导员队伍专业化和职业化趋势的不断发展,辅导员队伍建设的机制亟待更新。本文从"高进"的选聘机制、"重养"的培训机制、"严管"的考核机制、"优待"的激励机制、"宽出"的流动机制五个方面探讨辅导员队伍的建设机制。

荧光原位杂交法快速鉴定阳性血培养中的不动杆菌

目的建立一种快速鉴定阳性血培养中不动杆菌的方法。方法Bact/Alert3D120报警后,取阳性血培养液15μL于玻片上,预处理后50℃杂交45min,荧光显微镜下观察,作荧光原位杂交法(FISH)分析。同时将阳性标本转种至血平板和巧克力平板,用Vitek32系统鉴定,比较两种鉴定方法的符合率。结果探针的特异性经标准菌株和临床分离株证实,最低检测限为103CFU/mL。通过对31株临床标本的检测,杂交法的特异性为96.4%。结论荧光原位杂交法可快速鉴定阳性血培养标本中的不动杆菌。

HPLC法测定肝炎平合剂中柴胡皂苷a的含量

目的用HPLC法测定肝炎平合剂中柴胡皂苷a的含量。方法采用SB-C18分析柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(37∶63),检测波长:208nm。结果柴胡皂苷a在0.5μg-10μg范围内线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为98.70%,RSD为1.10%。结论本法操作简便、灵敏、准确,可用于肝炎平合剂的质量控制。

呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析

目的：明确呼吸道感染病原菌的构成及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法：对痰培养标本进行细菌培养，用VITEK仪鉴定细菌；药敏试验采用K—B法。结果：呼吸道感染前五种病原菌分别为白假丝酵母菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯肺炎亚种、鲍曼不动杆菌及大肠埃希菌。革兰阴性杆菌对亚胺培南、美南培南、阿米卡星及头孢哌酮较敏感，鲍曼不动杆菌有极强的耐药性。革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁敏感性为100％。结论：分析呼吸道感染细菌的分布及耐药性，可指导临床医生用药。

量化免疫学指标在理论教学中的应用

医学免疫学是一门抽象且逻辑性强的学科。在教学过程中，量化临床上常用的一些免疫学指标，可为学生提供具体的知识信息，将抽象的理论知识运用到临床实践中，进而在其脑海中形成清晰的概念。其目的在于激发学生学习兴趣，提高教学效果。

姜黄素对HeLa细胞的去甲基化效应

目的探讨姜黄素作用于人宫颈癌HeLa细胞后其p16和MGMT基因表遗传方面的影响。方法配制不同浓度的姜黄素(20、40、60μmol/L)分别处理人宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT检测细胞的生长情况,利用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测不同浓度姜黄素处理前后的肿瘤细胞中p16和MGMT基因甲基化状态的改变,并用RT-PCR法检测姜黄素作用前后HeLa细胞的p16及MGMT基因的表达情况。结果姜黄素能够抑制HeLa细胞的增殖和生长;HeLa细胞的p16和MGMT基因均表现出异常甲基化状态,当姜黄素浓度为40μmol/L时,HeLa细胞的p16和MGMT基因呈去甲基化状态;20μmol/L的姜黄素可以让HeLa细胞中表达缺失的p16基因重新表达,对于MGMT基因,姜黄素可以使其表达增强。结论姜黄素对HeLa细胞的增殖具有明显抑制作用,且表现出剂量依赖性(P<0.01);高浓度的姜黄素溶液对HeLa细胞p16和MGMT基因有一定的去甲基化作用,并能调控p16和MGMT基因的表达。

临沂市献血人员人细小病毒B19感染情况的调查

目的 调查山东临沂市区部分献血员中人细小病毒B19 （human parvovirus B19,HPVB19）的感染状况.方法 采用实时荧光定量PCR检测方法,对临沂市632份无偿献血者的血清HPVB19进行检测.结果 632名献血员HPVB19检测阳性42例,阳性率为6.64%.其中男26例（阳性率为6.28%）,女16例（阳性率为7.33%）.两组比较（χ2＝0.14,P＞0.05）,无统计学意义.各年龄段中,18～25岁年龄组阳性率最低,为3.85% 36～45岁年龄组阳性率最高,达到15.69%.36～45岁年龄组明显高于18～25岁组、26～35岁组和46～55岁,与其他年龄组比较（χ2=17.16,P〈0.01）,具有统计学意义.结论 对临沂市献血人员血液中HPVB19的感染状况进行了初步血清流行病学调查,为输血安全和血液制品安全管理政策的制订提供了理论依据.

肺炎支原体感染患儿急性期血清IFN-γ和IL-4水平的变化

目的:探讨肺炎支原体(MP)感染患儿急性期血清细胞因子即干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平的变化。方法:选择某中医医院儿科门诊和住院疑诊为MP感染的患儿,采用明胶颗粒凝集试剂检测其血清MP抗体,将滴度为1∶160以上的60例患儿以及30例健康儿童采用酶联免疫吸附试验检测血清IFN-γ和IL-4浓度。结果:与对照组比较,患儿组血清IFN-γ和IL-4水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MP患儿血清急性期IFN-γ和IL-4均升高,提示MP患儿发病可能与免疫功能紊乱相关。

干化学分析仪与全自动生化分析仪葡萄糖氧化酶法测定血糖的比对分析

目的探讨干化学法与全自动生化分析仪葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖结果的可比性。方法根据美国临床和实验室标准研究院(CLSI)方法对比评价EP 9-A文件的要求,用两种检测系统即干化学法(Y)与全自动生化分析仪(X)葡萄糖氧化酶法各重复2次测定40例新鲜葡萄样品,做结果比对。结果两种检测系统回发方案:Y=1.042X-0.295,相关系数r=0.978,两系统的相关性良好。3个医学决定水平浓度(X c)下两系统间的比对试验总体符合临床要求,但在低值时不符合。两系统测定结果具有统计学差异(P<0.05),干化学法检测结果偏低。结论在测定低值血糖时要利用回归方程进行截距和斜率校准,使系统误差达到临床可接受标准。在室内质控结果不稳定时必须进行校准。干化学法仅适合于血糖的随机监测参考,而不能作为临床诊断的依据。在血糖仪检测结果接近临界值时,应以静脉血清(血浆)在生化分析仪上的检测结果为诊断参考依据。

尿蛋白电泳在肾脏疾病鉴别诊断中的意义

目的采用非浓缩尿电泳对尿蛋白成分进行测定,判断肾脏疾病的受损部位及病变程度。方法采用sp ife 3000全自动电泳分析仪对87例蛋白尿患者、25例经肾穿刺术确诊的肾病患者进行尿蛋白琼脂糖电泳分析。结果87例蛋白尿患者电泳图谱显示23例生理性蛋白尿,41例肾小管性蛋白尿,10例肾小球性蛋白尿,13例混合性蛋白尿。25例确诊的肾病患者中,有6例局灶节段性肾小球硬化,13例局灶性肾小球肾炎,2例肾小球轻微病变,2例狼疮性肾小球肾炎,2例系膜增生性肾炎。结论该技术简便、快速、无创伤,尿蛋白电泳组分和肾脏损害部位及程度有关。

男性不育患者精子线粒体膜电位及顶体酶活性检测的临床研究

目的 通过对男性不育患者精子线粒体膜电位（mitochondrion membrane potential,MMP）及精子顶体酶活性的检测,分析其与精子运动能力和正常精子形态的关系,探讨其在精子质量评价以及在男性不育诊断中的价值.方法 将90例男性不育患者分为弱精子症组（n=33）、畸精子组症组（n=31）、弱畸精子症组（n=26）,以30例正常生育男性作为对照组,分别用计算机辅助精子分析仪（computer assisted semen analysis,CASA）、流式细胞仪（flow cytometry,FCM）分析其精子前向运动率（PFM）和正常精子形态率（PNM）和MMP,应用化学法检测精子顶体酶活性.结果 男性不育患者各组MMP、PFM、PNM和精子顶体酶活性皆明显低于正常生育组（P=0.000） MMP与PFM呈显著正相关（r＝0.525,P=0.000）,与PNM呈显著正相关（r＝0.733,P=0.000）,与顶体酶活性呈显著正相关（r＝0.605,P=0.000） 顶体酶活性与PNM呈显著正相关（r=0.647,P=0.000）.结论 精子MMP及顶体酶检测是评价精子质量的良好指标,其与精子活动力和精子的形态密切相关,是评估男性生育能力的重要依据.

GC法测定冻伤搽剂中樟脑的含量

目的建立冻伤搽剂的含量测定方法。方法气相色谱法测定冻伤搽剂中樟脑的含量;以聚乙二醇(PEG)-20M为固定相,涂布浓度10%,柱温160℃。结果樟脑在0.5-8μg范围内线性关系良好(r=0.9992),平均回收率为96.46%,RSD为0.58%。结论本法操作简便、灵敏、准确,可用于冻伤搽剂的质量控制。

乙肝病毒前S1蛋白的临床诊断意义

目的研究前S1蛋白(PreS1)与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系,及其诊断乙型肝炎的价值和判断预后的作用。方法采用酶联免疫吸附法对232例慢性乙型肝炎患者血清标本和40例确诊为急性乙型肝炎患者发病后一段时间的血清标本进行PreS1测定,并与HBV-DNA、ALT间关系做对比分析。结果HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA和PreS1阳性检出率分别为87.4%和82.5%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组分别为32.6%和30.3%,两组患者血清PreS1与HBV-DNA检出率高度符合(P>0.05)。急性乙肝患者ALT异常与PreS1阳性相关性高(P>0.05),而与HBV-DNA阳性检出率之间有显著差异(P<0.05)。结论PreS1蛋白能够敏感地反映乙型肝炎病毒复制的情况,在一些设备比较落后的地方可以采用PreS1法代替HBV-DNA。急性乙肝患者PreS1先于HBV-DNA转阴,提示疾病预后良好,并且可以有效监测ALT的动态变化。

SYSMEX-SF3000血球计数仪在血小板计数中的漏检现象探讨及处理

目的探讨SYSMEX-SF3000型血球计数仪在血小板(PLT)计数中的漏检现象与原因,以便及时进行处理。方法同一份标本运用仪器计数与显微镜直接计数的结果相比较,同时对不同的大血小板比例(P-LCR)范围结果的组间结果进行统计学分析。结果当P-LCR>40 fl时,两种方法有显著差异(P<0.05),仪器结果明显低于显微镜法;P-LCR<30 fl时,两种方法没有显著差异(P>0.05)。且P-LCR越高,PLT计数结果相差越大,两者呈正相关。结论当P-LCR>40 fl时,引起大血小板聚集,在计数的过程中仪器将其作为小红细胞而未计入,结果会出现错计或漏计,此时应采用显微镜直接计数。